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荧光定量pcr与普通pcr用的材料差不多,只是多了染料,是这样么?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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ksclxn_456

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5 个回答

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汤姆卜丽波

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在试剂添加上确实是这样,但是其他方面有本质上的区别,原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的。

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bamboopiggy

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对,只是多了可以进行荧光定量的染料。

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小K学弟

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还有用的仪器设备不一样。实验设计不一样,根据实验目的,qPCR要求实验有一定的重复性,要设定标曲。不一定是染料也可以是探针

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天一湖医者

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不是的,二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。

区别:

1、二者系统组成不同

荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。

2、二者原理不同

荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光,普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR最终产物量。

3、二者反应要求不同

荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp,普通PCR可以扩增长点的片段。

4、二者应用不同

荧光定量PCR主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,反之不行。

5、二者测量成本不同

定量PCR仪价格较为昂贵,普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。

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未来9

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实时荧光定量PCR与普通PCR的区别:

1、二者系统组成不同

荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。

2、二者原理不同

荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光,普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR最终产物量。

3、二者反应要求不同

荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp,普通PCR可以扩增长点的片段。

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