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        qPCR溶解曲线

        相关实验:细菌克隆的溶解实验

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        小庄要勇敢

        qPCR溶解曲线出现一个低谷,可能是什么原因呢?图片描述

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        3 个回答

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        晓雨知春来

        有帮助

        有可能是高盐浓度导致熔解曲线出现低谷。

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        土井挞克树

        有帮助

        一般考虑是引物二聚体或者短的非特异性扩增,解决手段通常有:降低引物浓度或提高退火温度

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        loveliufudan

        有帮助

        以下是一些可能的解释:

        1. 增强剂或化学物质残留:在反应中使用的增强剂或其他化学物质的残留可能导致溶解曲线中的低谷。这些残留物可能与探针或引物相互作用,导致反应的信号下降或扩增效率降低。

        2. 高盐浓度:高盐浓度可能对PCR反应产生不利影响,例如影响引物的特异性或DNA的热解性能。这可能导致在溶解曲线中出现低谷。

        3. 阻碍剂:存在可能影响PCR反应的阻碍剂,如血液中的抗凝剂、PCR抑制剂或其他样品污染物。这些阻碍剂可能干扰DNA扩增反应,导致溶解曲线中的低谷。

        4. 低浓度的模板或靶序列:如果初始的DNA模板浓度较低或靶序列的丰度较低,扩增的信号可能会降低,导致溶解曲线中的低谷。

        5. 引物或探针设计问题:如果引物或探针设计存在问题,例如靶序列的特异性不佳或引物的结构不稳定,可能导致溶解曲线中的低谷。


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