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        请问有用bEnd.3做过Transwell小室跨膜电阻(TEER)的吗

        相关实验:聚合酶链反应构建重组 DNA

        user-title

        一切顺利_

        我是用bEnd.3细胞构建体外BBB,12孔Transwell小室,每孔大概种了8万,PET膜,膜面积是1.12cm2,空白组的电阻值大概在100-110左右,实验组接种细胞的电阻值在130-150,在显微镜下看见细胞长得挺满,但是电阻值一直上不去,请问有做过类似实验的前辈是怎么处理的呢?希望大家指点一下,非常感谢!!!

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        以下是一些可能导致你的实验中电阻值不上升的因素和处理建议:

        细胞状态和成熟度:bEnd.3细胞需要达到一定的成熟程度才能形成功能完整的BBB模型。确保细胞达到适当的分化状态和成熟度,可能需要进行更长时间的培养或使用特定的培养条件和培养基。

        细胞-基质相互作用:细胞与PET膜表面的相互作用可能影响TEER测量。确保细胞与PET膜表面有良好的附着和相互作用,可以尝试预涂层PET膜,如使用胶原蛋白或胶原蛋白类似物等。

        培养条件和培养基:确保提供细胞所需的适当培养条件和培养基。适当的培养条件可以有助于细胞生长和形成功能完整的屏障。

        培养时间:如果你的实验尚未达到所需的时间点,电阻值可能还没有达到最高水平。继续培养细胞并定期测量TEER,观察其动态变化。

        质量控制:确保实验中使用的Transwell小室和测量设备的质量良好,并按照操作说明正确操作。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        首先测电阻的时候不要触碰到小室,把电极片充分浸入液体可以减少误差,其次细胞太过分散也会导致电阻测量误差

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