克隆较长片段的基因组DNA的时候，怎么检测模板DNA是否合格？提DNA的时候有什么需要注意的地方？用什么方法提？

用紫外分光光度计测od值

a260/a280正常1.8左右

如果制备的dna样品a260/a280<1.7，说明样品中含酶和蛋白质过高，应将样品用酚、氯仿、异戊醇抽提，再用乙醇沉淀dna

a260/a280>2，说明样品中rna过高，可用rnase消化后，用酚、氯仿、异戊醇抽提，再用乙醇沉淀dna

提dna需要注意的点，比如说，你在操作时一定要轻柔，动作要缓和，避免剧烈运动

可以通过测序检测序列是否正确，提DNA时注意RNA的污染，可以使用简易的gDNA提取试剂盒提取效果不错。

1、裂解液要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解.

2、 酚一定要碱平衡.苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护.氯仿易燃、易爆、易挥发,具有神经毒作用,操作时应注意防护.

3、 各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解.

4、 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰.

5、 异丙醇,乙醇.NaAc,KAc等要预冷,以减少DNA的降解,促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀.

6、 提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理.

7、 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制.