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        质粒构建整个流程和软件

        相关实验:🔥 分子克隆技术

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        dxy_csamswa8

        质粒构建整个流程是什么,引物设计常用软件是什么?

        wx-share
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        6 个回答

        user-title

        juyue2010

        有帮助

        snapgene软件不错,简单易学,功能齐全

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        质粒构建整个流程是 分 切 接 转 筛,生化书上都有,就是先找目的片段,根据你的载体和酶切位点,设计pcr引物,然后连接,转化,涂板,挑单克隆,送测序。 一般用snapgene和vector NT的多。

        user-title

        Keven轩

        有帮助

        目的基因的筛选与鉴定 获取目的基因 构建基因表达载体 软件用snapgene

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        待引物合成之后,我们用ddH2O将其稀释到100 μM作为母液,取一些稀释到10 μM做下一步实验了。

        首先我们P出目的基因,这一步建议用高保真PCR酶。

        按照下面的体系

        图片描述

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        引物设计软件如Primer 5或NCBI Primer-BLAST在线设计引物并合成后,配制PCR反应体系:将模板、引物、dNTP酶、反应缓冲液和ddH20按比例加入,加好后轻微瞬离,放入PCR仪中扩增目的片段,扩增后通过琼脂糖凝胶检测目的片段大小是否正确。质粒构建方式多样,常规的T4连接酶, T4连接酶可用于平末端也可用于粘性末端连接,但一般推荐适用黏性末端。

        user-title

        未来9

        有帮助

        基本步骤:

        设计引物加接头,扩增目的基因,连接到T载体上测序。

        软件:Vector NTI

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