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FOXO1蛋白分子结构
汤姆卜丽波
已知蛋白的话看它的结构可以上蛋白结构数据库PDB里看
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问
菌液活化过程中,大肠杆菌在加了氨苄的固体LB上可以长出单克隆,但是将单克隆挑取到液体培养基上怎么都长不出来,可能是什么原因呢?
申东熙老伯
注意一下是不是氨苄的平板出现了卫星菌落,这样挑的菌抗性丢失,在液体培养基菌长不起来。
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问
请教一下,我要用超滤离心管浓缩我的抗体和DNA序列,我想知道分子量大小怎么算,抗体是不是按IgG或者'IgM来算
汤姆卜丽波
你的抗体如果是商品化的那就有说明书咨询商家是多少道尔顿
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问
核酸电泳跑成这样可能是什么原因呢?
秋秋欣欣
不只是样还有marker也是花的,应该是胶的问题
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问
模型组内参和目的基因呈等比例改变
dxy_v06fr6k2
换内参,OGD后actin会改变
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问
石蜡包埋块(常温的)可以做RNA-seq吗?是不是和新鲜组织冰冻的数据差别很大?
超级无敌小旋风
石蜡包埋提取DNA质量就不咋地,何况RNA容易降解,只能拼运气了,大部分后期提取质量不太好,会影响文库质量,测序结果也会跟着受影响,比如片段太小,dup太高等等
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问
染色质免疫超声时片段不碎该如何解决?
bamboopiggy
先确定你的超声破碎仪的参数是对了没有,然后做预实验,把你 超声后,跑胶的图发上来看看,那个是看不到很清晰的条带的,都是些smear的band
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问
SDS- PAGE电泳图为什么这么脏!
Eason老歌迷
云雾状东西我也出现过,是配考马斯亮蓝溶液过滤时,没有过滤好,不过没有关系,你可以用个小镊子轻轻的刮一刮,就可以把云雾状东西去掉,小点一般也可以去掉,如果是胶里的东西说明配的胶有杂质,可以重新配。
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问
求助丨质粒在革兰阴性菌中是如何进行双向复制的?
Eason老歌迷
质粒的双向复制:构成DNA链的两条核苷酸链是反向平行的,因此复制叉向两侧推进时,如果起始点处A链合成方向为5'到3',那么在B链上是3'到5',这个反向推进的DNA复制行为后来被日本分子生物学家冈崎夫妇在1967年证明是不连续合成。先在B链上以DNA为模板生成一段接一段的不连续少量RNA小片段作引物,随后以5'到3'方向延伸成为一个个DNA-RNA片段杂合链,再去除引物,把这些一个个的小片段连在一
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问
里面的23-cM,CMC1,19Mb,5q13-15是什么意思?
申东熙老伯
19Mb是长度,5q13-1是5号染色体长臂13-1位置。
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问
MEP酵母菌株
Eason老歌迷
楼上实验室师姐有,你是想要这个mep酵母菌还是想咨询问题。
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问
全长克隆求解
秋秋欣欣
是不是产生的引物二聚体啊,如果是可以更换引物
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问
摇菌老是出现白色漂浮物是为什么?
申东熙老伯
白色漂浮物可能是泡沫,也可能是菌的产物,避开白色漂浮物,不会影响到结果。
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问
Ros问题
Eason老歌迷
是不是你的抗荧光淬灭封片液加少了?
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问
感受态细胞的转化,摇菌摇太久?
balalaLy
转化后摇菌是为了复苏感受态,一般摇40分钟左右,不过我做一般的转化是不摇的,直接涂板。摇太久会有杂菌或者减低转化效率
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问
关于FOXO3a蛋白的讨论,希望有做过的前辈给点意见,谢谢啦
秋秋欣欣
可以无血清和有血清做对比,重复几次
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问
急,急,急
Eason老歌迷
有些质粒在大肠杆菌中的拷贝本来就很低,可以多收集菌体。这个载体是表达载体,拷贝数低于克隆载体,所以提质粒较少,可以多提取点,洗脱时候少加点洗脱液来提高浓度。质粒拷贝多少跟载体本身有关跟宿主菌关系不大。
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问
ROS胰酶选择
秋秋欣欣
影响不大,但是如果你细胞好消化的话最好还是用不含的
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问
利用CRISPR进行基因敲除能不能敲除第一个外显子即ATG所在的外显子
bamboopiggy
这个技术上是可以敲掉的,但是一般进行基因敲除会从二号外显子开始进行。
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问
病毒滴度的测定有哪些方法,什么原理
汤姆卜丽波
可以用稀释计数法,不同稀释比例的量去感染细胞然后镜下计数,在计算病毒滴度
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