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科研学霸天团，48小时有问必答

DNA

问PX458稳转细胞系

dxyc42u

GFP荧光可以在荧光显微镜下观察不用流式，筛选的话用抗生素抗性基因来筛选

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问8-异戊烯基大豆苷元基因号？

saiao20230601

CAS编号：135384-00-8英文名：8-Prenyldaidzein分子式：C20H18O4

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问关于碱性琼脂糖凝胶电泳

sswei

碱性琼脂糖凝胶电泳能够使DNA保持单链状态，根据其分子大小在碱性琼脂糖凝胶中泳动。

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问关于危险因素的meta分析

loveliufudan

您对Meta分析的理解基本上是正确的。Meta分析是一种综合性的研究方法，通过汇总和分析多个独立研究的结果来评估特定研究问题的整体效应。在危险因素的Meta分析中，研究者通过检索和纳入多个研究，从而扩大样本量，以便更准确地评估危险因素与特定疾病之间的关系。在Meta分析中，一般会进行单因素分析来确定每个危险因素与疾病之间的关联程度。通过整合多个独立研究的数据，可以得到更具统计学意义的效应估计值和置

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问meta小白提问//药物对比生存率分析

huarenqiang5

不需要踢出，你可以直接在对照组数据录入0即可。

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问如何验证蛋白分泌出细胞并结合在膜上

loveliufudan

要证明目的蛋白已经分泌到真菌细胞外，您可以尝试以下方法： 1. 细胞培养上清液检测：收集培养基中的上清液，通过蛋白质浓度测定、Western blot或ELISA等方法检测目的蛋白的存在。如果目的蛋白在上清液中可检测到，说明它已经被分泌到细胞外。 2. 免疫荧光染色：对真菌进行固定和免疫染色，使用抗体特异性地与目的蛋白结合，并通过荧光显微镜观察荧光信号。如果荧光信号在细胞外被观察到，可以确认目的蛋

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问无内毒素提取质粒

huarenqiang5

可能原因：1、菌体未活化，生长效率低，菌量少，需要活化菌种；2、属于低拷贝质粒。增加菌液的量；3、Buffer RB 裂解不充分。

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问求助cre+的验证

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问国产荧光微球标记抗体稳定性下降

dxy_mqg1dtg8

荧光微球标记稳定性下降可能有以下几个原因：1. 微球质量差：国产微球的质量可能不如进口微球，导致微球的表面粗糙度不一，比表面积不同，固相效果差，导致标记的蛋白易于脱落。2. 微球与蛋白的比例不合适：微球与蛋白的比例不合适可能会导致蛋白在微球表面的分布不均匀，部分蛋白可能会溶解或脱落，导致标记的稳定性降低。3. 固相方法不当：固相方法可能不够完美，导致蛋白没有均匀地附着在微球表面上，或者蛋白分布不均

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问求助CC A分析

土井挞克树

不是p值，pr代表的是概率，也就是回归的概率分布

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问蛋白转运抑制

huarenqiang5

抑制分泌蛋白的药物有激素、ARB类、AECI类等。

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问斑点杂交膜颜色很紫很紫是什么原因

土井挞克树

洗脱的时间不够吧，延长洗脱时间看看

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问关于组学实验结果作图

土井挞克树

用image可以做组学的实验结果图。

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问discovery studio

loveliufudan

在Discovery Studio 19版本中，可以使用相应的工具和模块来模拟不同温度下的分子对接。该软件包含了一系列的计算工具和模拟方法，其中一些方法可以考虑温度的影响。具体来说，Discovery Studio中的Ligand-Protein Interaction模块（LPI）和其他分子对接工具（如CDOCKER、ZDOCK等）通常允许用户设置模拟参数，包括温度。通过调整温度参数，你可以模拟

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问蛋白组学数据分析

loveliufudan

蛋白组学数据的分析通常涉及多个步骤和方法。以下是一般的蛋白组学数据分析流程的一些常见步骤： 1. 数据预处理：包括数据清洗、峰识别、背景校正等。这些步骤有助于减少噪声和非特异性信号，提高数据质量。 2. 蛋白鉴定和定量：通过比对实验数据和数据库（如UniProt）中的蛋白质序列信息，确定鉴定出的蛋白质。常见的鉴定方法包括谱库搜索、数据库搜索、比对引擎等。定量方法可以使用标记的（如TMT、iTRAQ

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问为什么ppic9k转入GS115的时候，要用通用引物来验证呢，用目的基因的特异性引物

loveliufudan

在将pPIC9K质粒转入GS115酵母细胞中，通常使用通用引物进行验证的原因是确保质粒成功转入细胞，并且在细胞中进行了稳定复制。这种验证方法可以确认质粒的整合和存在，而不依赖于特定目的基因的引物。使用目的基因的特异性引物进行验证是更直接和具体的方法，可以验证目的基因是否被成功表达。这种方法可以提供关于目的基因表达的信息，但并不提供关于质粒整合和存在的信息。因此，在pPIC9K转入GS115酵母细胞

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问细胞污染危险动作⚠️

土井挞克树

会的，不要继续使用了，污染率非常高

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问双荧光素酶top/fop实验，萤火虫值低

loveliufudan

双荧光素酶top/fop实验是用来评估转录因子活性的常见实验方法。根据你的描述，如果在质粒比例的不同条件下，使用相同的细胞系和相同的转染时间，萤火虫荧光值都维持在10^4左右，而海参荧光值在10^6或10^8左右，可能有几个可能的原因： 1. 表达系统问题：萤火虫荧光素（Luciferase）和海参荧光素（Renilla Luciferase）具有不同的性质和表达效率。可能存在一些细胞因子或转录因

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问求助 | 细胞彗星实验protocol

dxyc42u

细胞彗星实验主要步骤 1.单细胞悬液制备（1）悬浮细胞：细胞悬浮液经离心分离获得。将细胞以1×105个/ml的速度悬浮于1XPBS(不含Ca+和Mg+)中。（2）贴壁细胞：轻轻从皿底分离细胞。将细胞和培养基转移到离心管中，进行细胞计数。用1XPBS(不含Ca+和Mg+)冰洗一次。将细胞以1×105个/ml的速度悬浮于1XPBS(不含Ca+和Mg+)中。（3）组织制备：称取组织约0.05g，加入制

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问求助｜质粒感受态转化不长菌落

dxyc42u

培养皿的材质有时候会影响长菌的

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