• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        求教crisper/ptaget F系统敲除bl21de3,但是pcr结果和对照菌条带长度没区别,目前正在送样测序

        user-title

        dxy_hnjpkjnq

        求教crisper/ptaget F系统敲除bl21de3的uxaC,设计了一对500bp上下游同源臂,重叠后和sgRNA一起电转到含pcas质粒的bl21(用30mM的d-阿拉伯糖诱导),这个菌株里面还带有一个氯霉素抗性的质粒,所以我都在固态和液体培养基中加了氯霉素50ug/ml,kan50ug/ml,电转化长出一片片的菌,没有单菌落,然后我去验证发现pcr结果敲除片段大小和对照没区别,然后pcr了pcas和sgrna,发现都p出来了,想着直接把长满菌的平板再涂后长出单菌落,可是挑单菌落到液体中过夜没有长出来,试了有抗性和没抗性就一个管长了,各位大佬能看看那有问题,查了文献也没找到问题

        wx-share
        分享

        0 个回答

        该问题暂时还没有回答

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序