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RNAscope阳性没信号,是什么原因?

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周皮皮42

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4 个回答

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亮婆婆

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请问后面做出来了吗?我是目标探针没有信号,阳性好的,给跪了

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sswei

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由于样本本身制备过程中未按照标准流程,固定不充分,导致RNA大幅度降解,故无法检测到靶探针信号。

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loveliufudan

有帮助

如果RNAscope阳性但没有信号,可能是由于以下原因导致:

样本处理问题:样本处理过程中可能存在破坏RNA分子的情况,如过度切片或超声波破碎等。此外,如果样本冷冻或固定的时间太久,也可能导致RNA分子的降解。

RNAscope实验操作问题:实验过程中可能存在RNA适配体和探针的浓度不足、杂交温度或时间不当等问题。另外,使用的探针可能不够特异性,也可能导致信号不明显。

仪器问题:如果使用的显微镜或成像系统设置不当,也可能导致信号不清晰或无法观察到。

针对这些问题,可以尝试进行以下措施:

优化样本处理方法,避免RNA分子的降解。

调整RNAscope实验参数,包括适配体和探针的浓度、杂交温度和时间等。此外,建议使用经过验证的特异性探针。

检查仪器设置是否正确,包括显微镜和成像系统等。如有问题,应及时维修或更换。

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土井挞克树

有帮助

可能是rna存在降解所以没有信号,检查一下样品rna

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