请问可不可以同一个共聚焦样品，同时染红光和绿光，然后测共定位情况啊？

可以 例如经典死活双染 Calcein AM 和PI

但是需要考虑串色问题（选择合适波长可避免）

当然可以啊 两个蛋白只要一抗种属不同就可以共染。然后对应种属二抗偶联不同的荧光基团就行 一般488和555共染效果就很好

是可以的，但是两种染料的波长相差要大一点，避免互相影响，分别在同一视野下拍红光和绿光，然后再merge到一起就可以了。

可以，对显微镜中看到的组织切片、单个细胞或亚细胞器官,共定位意味着不同的分子连接到同一个受体上。然后使用两种染料分别标记，一般是分别拍摄红色与绿色荧光，但是红光和绿光可能会相互干扰，当两个染料的荧光强度差不多的时候，漏过来的一点点其他荧光对图像没啥影响。但是，如果两种染料的荧光强度相差太大时，就有问题了，会串色，拍片不好看