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科研学霸天团，48小时有问必答

问核蛋白提取时有浆蛋白污染怎么办

sswei

用 0.5 ml 预冷 PBS 重悬，10000 rpm，离心 3-5 分钟清洗沉淀可以减少胞浆蛋白污染

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问发酵新手，举步维艰请求支援。 BL21(DE3)，5L发酵罐，实际发酵体积3L

刷了遗忘两千风

你好，我也遇到过类似情况，推测是菌体活力不够，建议重新转化后接种子液。我的培养基和你几乎是一样的成分，但是甘油浓度是5g/L，后续补料甘油。我最开始遇到这种情况的时候用的5 L发酵罐（1 L发酵液），诱导后菌体自溶产生气泡，溶氧快速上升，最后接近100%。重新做转化后接种，就没有这种情况了。但是做3 L发酵的时候又菌体自溶了。因此该建议仅供参考。染菌可能性不大，因为染菌后杂菌可能会继续活着，溶氧不

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问如何用image j测量一张照片中红色和绿色分别所占面积的百分比

sswei

面积测量的Workflow很简单，只需要两步：1、选出感兴趣的区域（ROI）——即图像分割2、Measure面积测量的本质其实就是图像的分割，图像分割的好坏直接决定了结果的好坏。区域的框选又可以分为三种类型：1、自动框选（Threshold、Analyze Particles、Color Threshold）2、半自动框选（魔法棒工具、Trainable Weka Segmentation）3、手

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问plasma membrane proteins是指什么？它位于何处？

feixue7758527w

指的是质膜蛋白，就是跟CD4对应的质膜蛋白安的。

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问ggplot画图

sswei

软件功能设置错误，提示没有star compare means这个功能，需要重新设置。

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问放射处理克隆形成的一些问题

烧伤科常医生

设计两个组，一组不经过放射处理，另外一组经过放射处理观察，形成克隆的时间，就能知道是否克隆时间形成延长了

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问室内饲养蜘蛛如何人工制作洞穴

烧伤科常医生

一组挖好洞的，一组不挖洞的，观察蜘蛛是自愿钻到现成的洞里，还是自行挖洞

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问组织体内磺胺嘧啶浓度测定

土井挞克树

可能是产物重氮盐，重氮盐进一步与β-萘酚发生偶合反应，生成由橙黄到猩红色的沉淀。

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问HPV假病毒生产的感染率很低要如何解决？

Leila_Lei

是哪个型别呢？也在做这个实验，可以交流一下。

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问多肽浓度测定方法的选择及相关问题

huarenqiang5

这种情况一般使用BCA法进行测定，两种方法的对比如下: BCA法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到0.5μg，在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系； Bradford法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到1μg，在 50～1000 µg/mL浓度范围内有良好的线性关系。

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问先冻干在进行脱色脱脂还是先脱色脱脂再冻干

烧伤科常医生

你所表述的第二个步骤程序是正确的顺序

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问样品前处理中脱色脱脂需要什么试剂及仪器

烧伤科常医生

CBE-5/10L亚临界萃取实验装备，引入plc电脑控制技术，物料萃取设备改为快开结构，用程序自动控制料容比，萃取时间，温度，压力次数等参数，使操作更简便，得到的数据更准确。

3 回答551 围观

问动物脱色脱脂是要先烘干弄成粉末，再加脱脂试剂进行脱脂吗

烧伤科常医生

我的经验是先烘干，然后再加脱脂试剂

3 回答263 围观

问刚刚接触这个，体外转录时，为什么需要还需要反向DNA oligo,将其退火后为双链转录模板，转录什么

dxy_mqg1dtg8

在体外转录实验中，反向DNA oligo的主要作用是用作DNA模板。由于反向DNA oligo是单链的，因此需要通过退火的方式将其转变为双链DNA模板。这样可以在转录反应中提供一个可靠的DNA模板，以便RNA聚合酶与其结合，从而合成RNA分子。反向DNA oligo可以编码各种类型的RNA，例如mRNA，siRNA，miRNA等。在转录反应中，RNA聚合酶会根据DNA模板序列合成RNA分子，这些R

3 回答726 围观

问外泌体在水凝胶中的释放

dxy_mqg1dtg8

从你的描述中，我猜测你是在使用水凝胶来固定细胞，并收集水凝胶上的外泌体。在这种情况下，你需要注意一些细节，以确保测量结果的准确性：1. 在测量前，需要将所有水凝胶上的外泌体充分释放。为此，可以使用一定浓度的洗涤缓冲液来洗涤水凝胶，以收集所有的外泌体。通常来说，需要多次洗涤，并将每次洗涤所得的上清汇总，用于后续的测量。2. 测量时，需要将每个时间点所得的上清进行分别测量。如果你想计算总释放量，可以将

2 回答1506 围观

问5-氟尿嘧啶的正常使用剂量是多少，应该如何搜索。谢谢大家。

dxyc42u

单药静脉注射剂量一般为按体重一日10～20mg/kg，连用5～10日，每疗程5～7克（甚至10克）。若为静脉滴注，通常按体表面积一日300～500mg/m2，连用3～5天，每次静脉滴注时间不得少于6～8小时；静脉滴注时可用输液泵连续给药维持24小时。

3 回答726 围观

问嘌呤霉素用紫外线照射后还可能用吗

dxyc42u

可以先做预实验看看还有效果吗，紫外线容易使其化学结构改变

3 回答1128 围观

问DNA斑点杂交加底物溶液为什么30min内甚至7小时都无斑点？是静止孵育吗

土井挞克树

可能是阻断封闭不足，建议将经过杂交和严格清洗后的膜用马来酸缓冲液漂洗1~5min；将膜在l00ul阻断液中孵育30min。

2 回答429 围观

问海参提蛋白前脱色脱脂方法

sswei

传统脱色方法包括活性炭吸附法等，但是这些方法损失率高，利用膜分离法脱色则会克服传统脱色方法缺点。

3 回答494 围观

问兔耳血液循环障碍要注意什么？

dxy_mqg1dtg8

注意以下几点可能有助于避免或减少兔耳血液循环障碍的发生：1. 确保兔子的饮食充足、均衡，提供足够的水和维生素，避免营养不良导致的贫血等问题。2. 经常检查兔子的体温、心率、呼吸等生命体征，及时发现异常并采取相应措施。3. 定期检查兔子的健康状况，发现疾病及时治疗，避免感染等问题。4. 给予适当的运动，防止长期缺乏运动引起的心血管疾病。5. 避免过度紧张、惊吓和不适当的处理方法，以免引起兔子的心理压

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