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实验问答23,750,665 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

其他

问液氮冻融法转化农杆菌，一直转不成功怎么办，菌液pcr无条带

loveliufudan

以下是一些可能的原因和解决方法： 1. 菌液PCR无条带：如果您在进行菌液PCR时没有观察到任何条带，这可能是由于以下原因： • 菌液中没有目标DNA：确保您在菌液中加入了正确的目标DNA。您可以对目标DNA进行质粒提取或PCR扩增，并在转化试验中使用适当浓度的DNA。 • PCR条件不正确：检查您的PCR反应条件，包括引物浓度、扩增温度和循环数等。确保您使用了适当的PCR引物和条件。 • 菌液处

3 回答4588 围观

问流式细胞术检测cy5

吴U4GF

请问cy5.5怎么标记纳米粒啊

4 回答1598 围观

问栓剂直肠给药如何对实验大鼠进行操作？

sswei

用栓剂给药时，要时刻观察是否有滑出栓剂的问题，以免影响实验结果，可捏紧肛门保持一段时间，也可固定动物头低位状态。

4 回答1182 围观

问Tricine-SDS PAGE三层胶的配方及注意事项

loveliufudan

以下是Tricine-SDS PAGE三层胶的配方和注意事项： 1. 垂直电泳缓冲液（上缓冲液和下缓冲液）： • 上缓冲液（Anode Buffer）：25 mM Tris，192 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 • 下缓冲液（Cathode Buffer）：50 mM Tris，384 mM glycine，0.1%（w/v）SDS，pH 8.3。 2. 聚丙烯酰

3 回答2009 围观

问树突细胞鉴定流式细胞术（直接测量）需要买什么抗体

loveliufudan

在树突细胞鉴定的流式细胞术中，用于确定细胞类型的抗体可以包括以下一些： 1. CD11c：这是树突细胞的标志性表面分子，用于确认细胞为树突细胞的关键标记。 2. CD80（B7-1）和CD86（B7-2）：这些共刺激分子在树突细胞表面表达，并与T细胞激活和共刺激过程密切相关。 3. MHC-2（主要组织相容性复合体类II分子）：这些分子在树突细胞中高度表达，用于呈递抗原给CD4+ T细胞。 4.

4 回答1485 围观

问AAPH和ABTS原理

loveliufudan

原理如下： 1. AAPH：AAPH是一种自由基产生剂，它通过热解产生自由基，主要是氧自由基（ROO•）。在抗氧化实验中，AAPH会引发氧自由基的产生，这些自由基可以与抗氧化物质反应并被消耗。测定抗氧化能力时，添加被测试样品到含有AAPH的溶液中，然后测量在一定时间内自由基的消耗程度。抗氧化能力较强的样品会有效地消耗AAPH引发的自由基，导致自由基的减少。 2. ABTS：ABTS是一种人工合成的

3 回答11876 围观

问如何设计Fish探针

土井挞克树

fish探针设计方法：1.FISH使用的探针序列来源于基因组或BAC(细菌人工染色体)DNA，包含许多重复序列。串联重复序列(Tandemrepeat)，如存在于着丝粒的α卫星DNA(SatelliteDNA)；散在重复序列(Interspersedrepeat)，如Alu家族。2.探针中的这些重复序列，在与基因组杂交时易产生非特异信号3.人类Cot-1DNAx是在杂交中常用来封闭及去除重复序列的

3 回答6094 围观

问为什么稳转Gaussia luciferase的细胞系检测不到RLU？

土井挞克树

可能是转染后存在降解，一般降解发生的比较快，降解后就检测不到rlu了

3 回答615 围观

问请教酵母转化，醋酸锂转化法相关问题

土井挞克树

以下为酵母醋酸锂转化法的步骤：l.于5mlYPD液体培养基中接种酿酒酵母，300C下200rpm过夜振荡培养。2.计数过夜培养的细胞密度，以5x106个／ml的最终细胞密度接种于50mlYPD培养液。3.置300C条件下200rpm振荡培养至细胞浓度为2x107个细胞_Jml，通常须要3．5小时，该培养物的细胞足够约可用于l0次醋酸锂转化。4.离心，添加醋酸锂

2 回答2566 围观

问GC-MS前处理是不是必须要冻干研磨成粉才可以提取代谢物？

土井挞克树

也可以不冻干直接用匀浆提取，但是相对来说准确度不如冻干样品

3 回答624 围观

问非靶向代谢组学实验中仪器的选择

dxy_mqg1dtg8

UPLC-Q-TOF/MS和UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS都是常用的非靶向代谢组学检测仪器，它们之间的主要区别在于分离柱、检测器和质谱分析器的不同。具体如下：1. 分离柱：UPLC采用超高效液相色谱柱（Ultra Performance Liquid Chromatography），其粒径和长度均比传统的高效液相色谱柱（HPLC）小，因此分离能力更强，分离效率更高。

4 回答1608 围观

问目前使用chatgpt进行降重会有问题吗？

土井挞克树

可以的，chatgpt是常用的降重方法

3 回答264 围观

问做了XPS为什么氧元素特别高？

土井挞克树

首先考虑污染了，可能是需氧类细菌的污染

3 回答2970 围观

问荧光免疫层析T线条带不均匀是怎么回事

sswei

可能是包被抗原抗体膜存在问题。

5 回答1861 围观

问求助🆘怎么设计实验探究荧光染料随着细菌分裂代数的荧光淬灭情况？

loveliufudan

下面是一个可能的实验设计： 1. 实验材料和设备： • 细菌培养基和培养皿 • 荧光染料 • 显微镜和荧光显微镜装置 • 计时器或时钟 2. 实验步骤： • 准备培养基：根据细菌的需求制备适当的培养基。 • 培养细菌：将细菌接种到培养基中，并根据其生长特性，在恰当的温度和环境条件下培养细菌。 • 添加荧光染料：在细菌培养基中添加适量的荧光染料，并确保荧光染料均匀分布。 • 分裂代数观察：使用显微镜

4 回答212 围观

问求RAW264.7，BMDM转染经验分享

loveliufudan

对于 RAW264.7 和 BMDM（骨髓源巨噬细胞）的转染，有几种常见的方法可供选择，包括化学转染和电转染。下面是一些转染经验分享和常用条件的建议：化学转染（使用 Lipofectamine 2000）： 1. 细胞密度：在转染前，确保细胞达到适当的密度，通常是约70-80%的细胞完全覆盖培养皿。 2. 转染试剂：按照 Lipofectamine 2000 的说明书准确配制转染试剂。注意检查试剂

4 回答2001 围观

问求助各位前辈，使用乙酰胆碱转移酶抑制剂，如何在体外抑制乙酰胆碱转移酶？查不到文献

loveliufudan

在体外抑制乙酰胆碱转移酶的方法有多种选择，以下是一些常用的方法： 1. 抑制剂：使用已知的乙酰胆碱转移酶抑制剂。例如，丙酰胆碱等结构类似物可以与乙酰胆碱转移酶竞争结合位点，从而抑制其活性。根据需要选择适当的抑制剂浓度进行实验。 2. 高温处理：通过加热样品或反应混合物来破坏乙酰胆碱转移酶的活性。一般来说，乙酰胆碱转移酶在较高温度下（如50-60°C）会失活。 3. pH调节：乙酰胆碱转移酶的活性与

1 回答374 围观

问细胞药物处理24、48、72小时是什么意思？

晓雨知春来

在细胞培养后的第24小时: 观察或采集样本以评估药物处理对细胞的影响。·48小时: 选择再次给药，添加更多的药物到培养基中·72小时:再次观察或采集样本，以了解细胞对于长时间暴露于药物的反应。

4 回答2901 围观

问请问大家平时做实验，有什么方法，经验分享一下吗？

loveliufudan

当进行实验时，以下是一些方法和经验分享，可以帮助你提高实验效率和准确性： 1. 计划和设计：在实验开始之前，制定一个详细的实验计划，并设计实验流程。考虑实验的目的、假设、实验变量、控制组等因素，并确保你有足够的材料和设备。 2. 实验室安全：始终遵守实验室安全规定。戴上适当的个人防护装备，如实验手套、实验室外套、护目镜等。熟悉化学品的安全操作和废物处理方法。 3. 校准和标定：确保你的仪器设备在使

3 回答490 围观

问Meta分析异质性究竟是怎么算的啊

sswei

异质性超出合理范围的meta分析，得到的结论常常让人觉得不可靠，没有意义。所以异质性是必然存在的，但要在合理的范围。由此可见，异质性分析也是必不可少的。一般来说I square<50%，P>0.05是被认为可接受的Meta回归，看到底是哪个因素导致的异质性，当然了，如果影响因素很明显或者涉及因素很少的话，也没有必要做meta回归，直接做亚组分析就好了。觉得结果不稳定应用敏感性分析。敏感

3 回答842 围观

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