登录
搜索
提问
我要登录
|免费注册
首页
>
实验问答
>
其他
实验问答
22,848,354 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
单细胞测序怎么样最大程度的减少误差呢?要从哪里方面做呢?
whilt-shirt
样本准备原则(1)建议使用宽枪头重悬,以减少对细胞的损伤;(2)每次移液前先混匀细胞悬液,然后从管中部吸取;(3)所有环节都最好在无菌环节下操作、使用无核酸酶的试剂、减少移液步骤以及当可能损伤细胞的时候尽量使用宽枪头等。此外,可用一次性转液管去除离心后的上清液,以减少细胞沉淀的干扰;(4)取样的时候最好设置两个重复,对每个样品计数 2 次,即共计 4 次计数;(5)弃上清时候注意不要破坏细胞沉淀;
1 回答
755 围观
1 回答
755 围观
去回答
问
wb中杂带有很多,没法区分
dxy_gwrp7ndq
1.低效阻塞。实验中会应用到多种不同的封闭剂,某些非离子去污剂或蛋白质等封闭剂容易产生低效阻塞的影响。如果改变阻塞条件就可以解决此问题。2. 抗原浓度过低。信号增强可能会导致人工带的出现。因此可以适当考虑通过分级分离或免疫沉淀富集抗原。
2 回答
426 围观
2 回答
426 围观
去回答
问
流式分析小鼠组织浸润淋巴细胞该如何设置组别
288 围观
去回答
问
骨组织wb内参不齐怎么整?
whilt-shirt
蛋白浓度一样不代表内参浓度一样,我们实验室一般现用BCA法测总蛋白浓度,第一次上样后根据内参调整上样量,这样内参就齐了
2 回答
494 围观
2 回答
494 围观
去回答
问
什么浓度可以使斑点大小统一?多次点样比较好还是一次?
239 围观
去回答
问
临床手术取到的肿瘤组织如何保存使得RNA最不容易降解?同时也能提蛋白?
协和再爱我一次
要么超低温冻存要么加好Trozol研磨后冻于-80,用于后期提取RNA直接加裂解液研磨后冻于-40以下冷冻,用于后期提蛋白以上均不可反复冻融
3 回答
381 围观
3 回答
381 围观
去回答
问
RNA跟DNA的区别?
菲菲飞呀飞
RNA又称核糖核酸,一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成,RNA的碱基主要有4种为腺嘌呤,鸟嘌呤,咆嘧啶,尿嘧啶,RNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成一条单链,它的主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达。DNA又称脱氧核糖核酸,它的主要功能是长期性的信息储存,DNA的复制方式为随机半保留复制。
4 回答
661 围观
4 回答
661 围观
去回答
问
探针法pcr低浓度模板复孔之间的差异大,除了加样问题还有什么原因会导致?
府宅
分装试剂时是否混匀,加模板时是否有挂壁
2 回答
418 围观
2 回答
418 围观
去回答
问
多重pcr是将配好的已优化好的单重体系等体积混合,还是将各引物对和探针按优化后的比例依次加入buffer和酶中?那种方法比较好?
dxy_gwrp7ndq
按优化好的比例依次加入,这样可以不断调整反应条件,直至最佳反应条件
1 回答
452 围观
1 回答
452 围观
去回答
问
骨髓染色体畸变实验分散不均怎么办?
415 围观
去回答
问
蛋白组学微量样本如何测定?
dxy_gwrp7ndq
可以利用纳米级的液相色谱串联质谱,能同时鉴定并定量少量组织样品中的数百个蛋白。
1 回答
587 围观
1 回答
587 围观
去回答
问
实时荧光定量PCR反应
dxy_gwrp7ndq
两步法,三步法并没有本质区别,信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。两步法,是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度,而且定量PCR的产物都很短,需要的时候都短,所以两步法更方便。三步法的话,花的时间长,不利于快速实验。
2 回答
916 围观
2 回答
916 围观
去回答
问
细胞经常染支原体怎么办,也在用杀支原体的药,就是经常反复
府宅
1)药物辅助加温处理:先用药物处理后,再将污染的组织培养物放在 41℃ 培养 18 小时,可杀死支原体,但对细胞有不良影响。2)免疫反应清除法:主要包括有动物体内接种除菌法和体外吞噬细胞吞噬法,前者是把受污染的细胞接种在动物皮下或腹腔中,借动物免疫系统消灭支原体,而细胞却能在体内继续生长,待一定时间后,从体内取出细胞再进行培养繁殖;而后者从动物腹腔采取巨噬细胞并对其进行纯化,加入被污染的细胞培养液
2 回答
675 围观
2 回答
675 围观
去回答
问
做实验老是没有重复性,不能确定自己操作准确,很苦恼,也不知道操作问题还是实验确实不行。有没有大佬指点
whilt-shirt
换个人同样的操作,或者自己一步步操作,找师兄师姐在旁边督促看看
2 回答
286 围观
2 回答
286 围观
去回答
问
RNA提取没有沉淀是什么原因?
wuli猫宁
有时候看不到沉淀,说明你用的细胞或组织太少,RNA比较少,亦或者RNA不低,但看不到沉淀,可能离心时RNA没聚集在一起,散贴在管壁!对于这两种情况,不要灰心,实验不一定失败!取15ul的无RNA水(不要太多),把管壁好好洗洗,RNA就会溶解在水里,一般情况,RT后,也足够做好几次实验了!
3 回答
2223 围观
3 回答
2223 围观
去回答
问
何为基因工程抗体??
dxy_gwrp7ndq
目前在临床试验中基因工程抗体约占生物制剂的30%。重组抗体的体积越来越小,或被重新构建成多价分子,或与其它分子相融合,如放射性核素、毒素、酶、脂质体和病毒。重组技术的出现使筛选、人源化、抗体的生产得到革新,并取代杂交瘤技术,从而使以抗体为基础的药剂设计成为可能。
2 回答
608 围观
2 回答
608 围观
去回答
问
Nanopore测序数据和RNA-seq数据的标准化方式一样吗?
376 围观
去回答
问
RNA浓度低/质量差的原因及解决办法有哪些?
dxy_gwrp7ndq
得率过低:提取样本过低总量不足或者提取样本过多裂解不彻底;解决方法:可以使用适当质量的组织或细胞进行提取,样本前处理一定要做好,裂解应充分。
1 回答
1964 围观
1 回答
1964 围观
去回答
问
酵母单杂实验中已经转入启动子的感受态转入转录因子后阳检不出来是什么原因?或者大家阳检酵母的方法一般是哪些?
413 围观
去回答
问
利用WB检测asc寡聚化
dxywode
一般做蛋白的寡聚化,用交联的方法,可以分为In vivo 和in vitro两种情况。in vivo:用Cross-linker(such as DTSSP)处理细胞一定时间,如果你的蛋白是寡聚体形式存在,它可以把你的四聚体交联在一起,那么用不含DTT的裂解液收集细胞,然后跑胶,western,你可以看到在分子量4倍的地方有条带,设好各种对照,你可以判断出那是不是你的四聚体形式。这里就讲个原理,具
2 回答
4881 围观
2 回答
4881 围观
去回答
1
•••
299
300
301
302
303
•••
317
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序