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科研学霸天团,48小时有问必答
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如何检测细胞内的NADH
bamboopiggy
有专门的检测试剂盒,国产的都有。
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问
🔥#话题探讨#:那些不得不说的「实验室生存法则」
dxy_h0v3cvu4
我们需要的以礼待人,礼貌、真诚的打招呼,以及恰当的介绍自己。切记不能给人以强势之感,或忽视之余。当把好的印象留给老师、师兄师姐时,可以说,你已经建立起良好的人设。但前提是,你真的是这样的懂礼貌,不做作的。积极主动的干一些并不是一些坏事情。比说说,打扫下环境卫生,帮他人干些活。有些人会觉得,师兄师姐没有叫我这么做,或许此时他/她们正在考验你。但是,你也需要记住,这不是一时的显摆,需要你真正地愿意。勤
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问
外泌体提取?提外泌体怎样才算的好?想请教大家一下。
府宅
WB检测可以发现样品中具有外泌体的标志物,可以一定程度上排除溶酶体、蛋白聚团、支原体等情。NTA粒径分析可以反应外泌体样品中粒子的群体特征,了解其纯度
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问
蛋白纯化有活性无条带
bamboopiggy
你的酶活性太高了,可能蛋白浓度还不够wb检测的,那点点蛋白的酶活性就够了。
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问
脑立体定位注射如何确定深度
府宅
在翻到该核团所在的页面,多是冠状切面,核团的长度要看所占的页数(右下角有一个Bregma值,用第一页的这个数值减去最后一页的这个数值就是核团的长度)。根据这些数据估算核团的长度。核团的宽度、高度可直接由图上的坐标读出,即在各页面上挑选一个横截面最大的,在核团中心点一点,经这个点划水平线和垂直线,水平线和纵坐标的交点就是核团的深度坐标(颅骨下多少mm),垂直线和横坐标的交点就是核团左右坐标(中线旁开
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问
细胞转染后出现了很多小点点,是凋亡吗?
bamboopiggy
出现的黑点可能是细胞碎片,可以在收样的时候,用pbs洗掉
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问
谷氨酸棒杆菌电转,每个电击杯加多少质粒和菌液呢?
府宅
转化时一般200ul感受态细胞悬液 中加入的质粒含量不超过50ng,体积不超过10ul。将40~100ul解冻的感受态细胞转移电击杯
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问
外泌体研究
dxy_gwrp7ndq
可使用洗涤剂处理和超声波替代电穿孔方式
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问
biolegend的Fixation Buffer可否用于表面染色后的细胞保存?
bamboopiggy
paraformaldehyde 是多聚甲醛,如果你的biolegend的fixation buffer成分也是多聚甲醛,可以用的
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问
Pcrtargeting切除抗生素是电转进Bt340后在37度完成筛选吗?然后在42度过夜诱导吗
府宅
37度培养筛选,42度热击90秒
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问
ImageJ连续处理图片,每张图都需要Calibrate吗?
bamboopiggy
需要啊,因为每张图的底色可能都不一样
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问
植物CP蛋白的单抗感觉特异性不是很强,能跑出来很多带,请问这是正常现象吗,如何解决?
dxy_gwrp7ndq
如果实在没有更好的抗体,建议采用阴性对照和阳性对照来确定上述哪个条带是目的条带。
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问
各位老师,请问动物实验生化指标中的SOD和MDA的数据是不应该反着来,会不会有这两个指标同时升高或同时降低的情况
dxy_gwrp7ndq
SOD 和MDA,一个是清除超氧自由基的酶,一个是指膜过氧化程度。保护指标和损伤指标不会同高或同低
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问
SOC培养基已经混合好的粉末如何灭菌
dxy_gwrp7ndq
可以用0.22um滤器过滤除菌。
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问
跑WB的时候 内参总是特别粗 还喜欢连在一起 请问怎么回事?
bamboopiggy
降低内参的抗体的浓度,以及二抗的浓度
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问
请问在做植物细胞悬浮培养时(百合),如果要将愈伤组织分散,所用的酶有哪些,对应的用量是多少呀?浓度和用量之类的。
迟C迟
用果胶酶和纤维素酶。称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶溶液,每次用100-200微升就可以。
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问
做完转录组学后,必须要做q-pcT昨做验证吗
迟C迟
看文献吧,一般需要再次用qPCR验证一下公司做的转录组数据准不准确的。
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问
慢病毒细胞稳转时间多久最好?
天一湖医者
慢病毒细胞稳转时间16-18小时最好
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问
构建质粒时,什么标签可以防止包涵体的形成?
bamboopiggy
重组基因在表达宿主中表达量过高或合成速度过快,以至于没有足够的时间进行折叠,二硫键不能正确配对,导致蛋白以包涵体的形式存在。所以你要调整你摇菌的速度和温度
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问
用大肠杆菌纯化蛋白时出现包涵体怎么办?
迟C迟
可以用尿素(8M-10M):尿素溶解不电离,呈中性,成本低,蛋白复性后除去不会造成大量蛋白沉淀;溶解后的包涵体可选用多种色谱方法纯化。 或者用盐酸胍(6M-8M):溶解能力强,高达95%以上的溶解作用。
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