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科研学霸天团,48小时有问必答
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病毒分离样品脂类物质怎么去除?
天一湖医者
将预冷的有机溶剂等量加入、样品中,强烈振荡后,1000 r/min离心5 min,脂类和非病毒蛋白保留在有机相,病毒则保留在水相。应当注意的是,对有机溶剂有抗性的病毒才能这样处理。
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问
在表面活性剂裂解及酶解法进行生物样品预处理实验中,为避免细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中降解生物大分子,需要注意什么?
天一湖医者
为避免细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中降解生物大分子,可以加入蛋白水解酶抑制剂。
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问
这是之前问的一个问题,由于丁香平台不能回复,还请各位大佬看一下下面的图文
Eason老歌迷
我还是觉得一楼那个方法可行,查找相关酶的序列,和你的目标酵母菌序列进行对比。或者我在教你一个方法。你就用ncbi,打开NCBI,用关键词在Taxonomy数据库搜索。得出它的拉丁文,并且有一个问题需注意,酵母菌下还是有一些种的。知道了酵母菌的txid,就很容易了。一搜就出来了。上面已经定位到了酵母菌下的所有蛋白的基因了。上面如果要找核酸的,把数据库选择为Nucleotide就行了。接下来就是定位到
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问
双荧光酶素实验中把构建的含启动子区的载体质粒和插入转录因子的载体质粒共转染查看转录活性时还需要PGL-TK做内参三个质粒转染可否
Eason老歌迷
需要啊,肯定是需要的,一个空白对照,一个空转,一个转你的目的蛋白
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问
请问一下蛋白质和多糖静电结合的量怎么测?
Eason老歌迷
先把蛋白质变性去除,如用钨酸沉淀,过滤后再测多糖。
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问
如何选择合适的家兔,哪些特征需要注意?
Eason老歌迷
看细节选定好具体目标后,首先要检查一下兔兔的五官有无异常,特别是眼睛,用手在兔兔的一侧晃动,观察兔兔是否有反应,兔子的正前方有视觉盲区,所以要从侧面晃;耳朵能自由转动,内侧没有明显的皮屑或痂皮;鼻子内侧呈淡粉色,没有鼻水,鼻子周围没有毛发打结或粘连;牙齿发育正常,没有弯曲或断裂;胡须无明显分叉。一只手托住小兔子的身体,把它翻过来,检查脚底板和屁股附近的毛发,确认没有打结或粪便污染;**及**周
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问
请问有没有收网络药理学的期刊,没有验证实验,最好是不收APC费用的
Eason老歌迷
期刊名称:Briefings in Functional Genomics; 期刊ISSN: 2041-2657;
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问
试剂保存:乙醇,甲醇,乙二醇,甲醛,氯仿,丙酮,氢氧化钠存放在保存柜,产生了!嗯个很难闻的味道,请教一下,这个气味是什么反应呢?
Eason老歌迷
并不是什么反应,这些化学药品都需要妥善保管,氯仿是甜味,丙酮是芳香味,可能是甲醇吧
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大鼠取血,除了剪尾巴,还有哪些呢?要取1毫升血离心取血清做ELISA
Eason老歌迷
割尾法,鼠尾刺血法,眼眶静脉丛法,断头取血,心脏采血,颈动静脉采血,股动静脉采血等方法。
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问
在做血液流变学检测实验时,实验废料撒漏后如何处置?
Jason萱
所有的传染性废弃物在处理前需经高压消毒。待消毒物品应放置在安全的容器内,至少在121℃的条件下高压消毒30分钟,然后进行焚烧处理。但若无法进行则必须采用其他合适的方法,如用漂白剂或10%次氯酸钠溶液进行消毒。
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问
请问一下大家,最近在做GST pull down试验,发现GST也能将我互作蛋白的his拉下,是什么原因呢?
bamboopiggy
是单纯的his?还是你的互作蛋白耦连了his?如果是耦连的,当然要跟蛋白一起被拉下来啊。
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问
为什么瓶装PBS那么贵?
bamboopiggy
瓶装的要在无菌环境中生产,还要罐装,当然贵啊。你买的粉,自己配,如果你算算,会发现,不买粉,直接自己称量各组分来配的话,更便宜。
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问
血液流变学检测哪一种方法更合理?
Eason老歌迷
血液黏度是血液最基本的流变特性。血液黏度测定包括全血黏度和血浆黏度测定。血液黏度的单位以 mPa·s表示。血液黏度测定的方法主要分两大类,一类是毛细管黏度测定法,另一类是旋转式黏度测定法。我觉得第一类方法更合理。
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问
血液流变学检测怎么保证准确性?
Eason老歌迷
为保证检测的准确性,应特别注意采血时间及摄食时间。在采血方式上,也应注意避免造成血粘度误差的因素,如采血时压脉带的压力大小、血管受压时间长短等均对血粘度检测结果有所影响,血管在较高的压力下受阻时间长,则血液会有所浓缩。抗凝剂的正确使用也是保证检测准确性的关键之一。因草酸盐或枸橼酸钠等抗凝剂可引起细胞的形态改变、影响红细胞的聚集性和变性能力,导致血粘度检测不准确。
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问
敲除基因后的基因组与野生型基因组如何比对序列?
Eason老歌迷
可以通过pcr鉴定的方式来确定。也可以用dna序列软件,进行测序结果与野生型序列进行比对,如果发生非3倍数的indel,则说明该细胞系在基因组水平上已经实现了敲除。
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问
壳聚糖有还原性吗?会还原二价铜离子吗?
Eason老歌迷
没有。但是它壳聚糖可以吸附铜离子。
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条件培养基的制备过程中的坑!
bamboopiggy
1000rpm,10min或者是3000rpm,5min就可以。)后0.22um滤器过滤,这些的目的都是去除培养基中的细胞。不需要测定营养物质的消耗,条件培养基,主要是收集细胞分泌的促增殖的物质,来促进细胞增殖的。
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流式分析求助
Eason老歌迷
7AAD就行。上下相差很接近。
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问
外泌体保存
天一湖医者
要验证血液外泌体里的目的基因,可以直接保存血液。
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问
阿霉素大鼠尿蛋白差异太大怎么办?
Eason老歌迷
个人感觉是你的鼠尾注射没有操作好。说到底尾静脉注射技术就像投篮一般,有的时候蒙一下能进,或者手感热的时候连续进球,但其他时候还是不够稳定。如果想要提高成功率还是需要在找对方法的情况下,经常练习手感。至于姿势问题大家不必拘泥,我也只是把对我而言最合理的姿势分享给大家,各位在练习的过程中也可以微调,毕竟无论教科书般的投篮姿势还是端尿盆儿,只要能进球就好。
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