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问
骨组织wb内参不齐怎么整?
whilt-shirt
蛋白浓度一样不代表内参浓度一样,我们实验室一般现用BCA法测总蛋白浓度,第一次上样后根据内参调整上样量,这样内参就齐了
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问
什么浓度可以使斑点大小统一?多次点样比较好还是一次?
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问
临床手术取到的肿瘤组织如何保存使得RNA最不容易降解?同时也能提蛋白?
协和再爱我一次
要么超低温冻存要么加好Trozol研磨后冻于-80,用于后期提取RNA直接加裂解液研磨后冻于-40以下冷冻,用于后期提蛋白以上均不可反复冻融
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问
RNA跟DNA的区别?
菲菲飞呀飞
RNA又称核糖核酸,一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成,RNA的碱基主要有4种为腺嘌呤,鸟嘌呤,咆嘧啶,尿嘧啶,RNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成一条单链,它的主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达。DNA又称脱氧核糖核酸,它的主要功能是长期性的信息储存,DNA的复制方式为随机半保留复制。
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问
探针法pcr低浓度模板复孔之间的差异大,除了加样问题还有什么原因会导致?
府宅
分装试剂时是否混匀,加模板时是否有挂壁
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问
多重pcr是将配好的已优化好的单重体系等体积混合,还是将各引物对和探针按优化后的比例依次加入buffer和酶中?那种方法比较好?
dxy_gwrp7ndq
按优化好的比例依次加入,这样可以不断调整反应条件,直至最佳反应条件
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问
骨髓染色体畸变实验分散不均怎么办?
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问
蛋白组学微量样本如何测定?
dxy_gwrp7ndq
可以利用纳米级的液相色谱串联质谱,能同时鉴定并定量少量组织样品中的数百个蛋白。
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问
实时荧光定量PCR反应
dxy_gwrp7ndq
两步法,三步法并没有本质区别,信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。两步法,是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度,而且定量PCR的产物都很短,需要的时候都短,所以两步法更方便。三步法的话,花的时间长,不利于快速实验。
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问
细胞经常染支原体怎么办,也在用杀支原体的药,就是经常反复
府宅
1)药物辅助加温处理:先用药物处理后,再将污染的组织培养物放在 41℃ 培养 18 小时,可杀死支原体,但对细胞有不良影响。2)免疫反应清除法:主要包括有动物体内接种除菌法和体外吞噬细胞吞噬法,前者是把受污染的细胞接种在动物皮下或腹腔中,借动物免疫系统消灭支原体,而细胞却能在体内继续生长,待一定时间后,从体内取出细胞再进行培养繁殖;而后者从动物腹腔采取巨噬细胞并对其进行纯化,加入被污染的细胞培养液
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问
做实验老是没有重复性,不能确定自己操作准确,很苦恼,也不知道操作问题还是实验确实不行。有没有大佬指点
whilt-shirt
换个人同样的操作,或者自己一步步操作,找师兄师姐在旁边督促看看
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问
RNA提取没有沉淀是什么原因?
wuli猫宁
有时候看不到沉淀,说明你用的细胞或组织太少,RNA比较少,亦或者RNA不低,但看不到沉淀,可能离心时RNA没聚集在一起,散贴在管壁!对于这两种情况,不要灰心,实验不一定失败!取15ul的无RNA水(不要太多),把管壁好好洗洗,RNA就会溶解在水里,一般情况,RT后,也足够做好几次实验了!
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问
何为基因工程抗体??
dxy_gwrp7ndq
目前在临床试验中基因工程抗体约占生物制剂的30%。重组抗体的体积越来越小,或被重新构建成多价分子,或与其它分子相融合,如放射性核素、毒素、酶、脂质体和病毒。重组技术的出现使筛选、人源化、抗体的生产得到革新,并取代杂交瘤技术,从而使以抗体为基础的药剂设计成为可能。
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问
Nanopore测序数据和RNA-seq数据的标准化方式一样吗?
431 围观
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问
RNA浓度低/质量差的原因及解决办法有哪些?
dxy_gwrp7ndq
得率过低:提取样本过低总量不足或者提取样本过多裂解不彻底;解决方法:可以使用适当质量的组织或细胞进行提取,样本前处理一定要做好,裂解应充分。
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问
酵母单杂实验中已经转入启动子的感受态转入转录因子后阳检不出来是什么原因?或者大家阳检酵母的方法一般是哪些?
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问
利用WB检测asc寡聚化
dxywode
一般做蛋白的寡聚化,用交联的方法,可以分为In vivo 和in vitro两种情况。in vivo:用Cross-linker(such as DTSSP)处理细胞一定时间,如果你的蛋白是寡聚体形式存在,它可以把你的四聚体交联在一起,那么用不含DTT的裂解液收集细胞,然后跑胶,western,你可以看到在分子量4倍的地方有条带,设好各种对照,你可以判断出那是不是你的四聚体形式。这里就讲个原理,具
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问
想问一下大家有观察过PCMV6表达载体和PCDNA3.1表达载体的表达效率差异吗?大概有多少倍呀?
txs900416
这两个载体都是高拷贝载体,表达也都是CMV为启动子,差异不大啊
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问
免疫疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些
dxy_gwrp7ndq
主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
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问
我目前在做无脊椎动物免疫,但我想了解一下,在人体中或者哺乳动物中有没有叫做“免疫占位”的现象,通俗来说就是一种药物可以占住病毒。
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