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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
有人有辅助质粒pRK2013的序列吗,网上现在查不到了。如果能提供真的非常感谢!!!
汤姆卜丽波
找有它的文章然后和通讯作者沟通,他们会很乐意给你的
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问
求HIF-1信号通路详细信息,以及HIF与其他信号通路,如HSP90,PI3K/Akt的关系,球球各位大神了?
bamboopiggy
这个你最好自己查文献,如果实在懒得查,可以去c一些抗体公司官网找他们公布得通路图,那些通路图还是做得很好的
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问
最近在静电纺丝的纤维膜上培养细胞染色后看不到,细胞漏在了比较薄的纤维膜下面,但是比较厚的纤维膜下面和膜上都没有看到,为啥啊
天一湖医者
先把膜润湿,去掉培养基,再用高密度细胞悬液种植,待吸附0.5~2h,待吸附后沿孔边缘。
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问
细菌菌体内的化合物用什么试剂提取比较好
青梅竹马的青梅
看你化合物的极性,大极性可以用乙酸乙酯,小极性可以用正己烷
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问
多聚赖氨酸包被细胞培养板的具体步骤是什么?
bamboopiggy
你可以配置好多聚赖氨酸将其过滤除菌,分装,待用。培养的前一天包被培养板把多聚赖氨酸加到培养板中,静置15分钟,吸出多余的多聚赖氨酸,然后用高压过的双蒸水洗板,培养板放入37度烘箱里过夜就可以用了
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问
构建点突变基因载体,突变效率低,有没有好用的酶。
bamboopiggy
好像有个专门做点突变的kit,你可以找找看,如果不行,建议做长引物pcr来做突变点。
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问
求助大佬们,酵母单杂的点板结果不明显,空载和目的基因启动子共转在不同浓度抑制剂的缺陷板上都能长,是表示没有互作吗?谢谢!
汤姆卜丽波
首先确定你的培养基各个组分没有受到蛋白胨,酵母粉等的污染,重新按照上述配方配制MD。然后需要确定你的感受态是不是有问题:分别划板MD,YPD(倒平板时加点氨苄和卡那,防止E.coli的污染。)
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问
qRT-PCR结果的cq值误差多少内可以用?
whilt-shirt
新版的软件都叫Cq值,不叫Ct值了,不必理会。Ct值15-25是最好,10-30之间也接受。如果超过30了,得看一下复孔是否一致,如果一致,也接受。如果不一致,基本就是废的。
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问
请问制备单(多)克隆抗体和制备亚单位疫苗的过程有什么区别呢?可以根据单克隆抗体筛选出来的抗原表位来设计表位疫苗么?
汤姆卜丽波
可以,我们做的是亚单位疫苗,只是亚单位疫苗相当于抗原的功能
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问
10倍溶液稀释到1倍溶液是用水还是生理盐水配啊
whilt-shirt
看你做的实验,如果最终的稀释溶液作用于细胞或者动物或者组织,那就需要用PBS或者生理盐水稀释,如果是用于非生物样本,那一般是用水
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问
配秋水仙素时,用2%的DMSO来溶解。想知道需要加2%DMSO多少?(只用将秋水仙素溶解就行了吗?还是说用2%DMSO来配制?)
未来9
1.0g/L秋水仙素溶液的配制:称取20 mg秋水仙素,加入8.5g/L NaCl溶液20mL,待完全溶解后,经5.516×104Pa,15min高压蒸汽灭菌后避光保存于4度冰箱中。使用时再用DMSO溶解。
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问
qPCR引物设计时,如果primer blast的结果除了目的基因(比如CHS)还有一个预测的CHS基因,那这对引物能用吗
灵枢天问
可以用的,我也有这样的情况,还是可以检测表达的,
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问
4T1细胞溅到眼睛里了,对身体会有伤害么?
balalaLy
应该没什么太大影响,细胞属于外源物质,会被机体免疫细胞解决掉。不放心的话及时做好局部清洗,找眼科医生看看。
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问
求HIF-1α(缺氧诱导因子)对于胶质瘤的具体作用机制
天一湖医者
这个文章写的比较详细,参考一下https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=fb3fa6e6230bebf6527f15e00375c2ec
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问
用细菌基因组如何分析次级代谢产物?
迟C迟
你可能还会用到次级代谢产物预测网址:https://fungismash.secondarymetabolites.org可进行细菌、真菌以及植物次级代谢产物的预测。
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问
怎么用基因组编码结构示意图说明得到的是基因全长
迟C迟
还是得根据发表的文章判断,中间少一段是不是内含子啊,如果是内含子无所谓。还有一个办法,翻译成蛋白序列,看蛋白序列是否完整,就能知道是不是得到基因全长了。
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问
亲和标记法和膜重建法鉴定膜上蛋白质是否为膜转运蛋白的方法?
whilt-shirt
可以选用荧光标记或者His探针试试
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问
活体成像c57灌胃带荧光菌液必须脱毛么?
balalaLy
一般都会剃毛比较好,毛发会带有背景荧光造成干扰。
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问
关于植物悬浮培养的几个问题
bamboopiggy
现在有那种一次性的,细胞滤网,你可以直接买,尽量别用镍网了,反复处理太麻烦。你可以用移液枪吸了细胞,直接抵在滤网上过滤就好。镍网要洗干净后高压灭菌。培养基需要参见参考文献,因为具体不知道你养的什么。看培养瓶的浑浊度。离心留下的细胞多,静置损伤的细胞多,还是要看你的实验目的。你可以把你的组织放到无菌的离心管里称量,然后把组织放到无菌的瓶里后,再称量一下控的离心管,就知道组织重量了微孔滤膜是高压蒸汽灭
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问
请高手帮忙看下小鼠主动脉瓣Masson染色如何计算胶原百分比,图中圈出的部分属于主动脉瓣还是心脏?谢谢🙏
汤姆卜丽波
是心脏啊。下面那部分才是主动脉瓣
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