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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
请教一下各位大佬们,取小鼠组织用LC/MS做药物分布,请问计算浓度的时候需不需要用整个器官重量计算呢?
Dr_劉医生
不需要用整个器官重量计算,质谱检测药物分布是按单位蛋白质/单位样本(组织匀浆)浓度来算的,不是按组织体积
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问
用血卟啉产生单线态氧,并且检测,具体的实验流程怎么做,需要注意什么
Dr_劉医生
实验流程可以参考这篇文章《血卟啉衍生物光敏产生的单线态氧量子产额的测定及其影响因素的研究》的方法学部分(下图)
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问
在用铁死亡抑制剂DFOM时,浓度控制在多少呢?说明书上说是20μM,可是实验中发现这个浓度并不行,文献查阅到的跨度很大,怎么调?
Dr_劉医生
还是建议用说明书的20uM浓度,可以完善一下上样的量,参考一下这篇文章
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问
求助流式细胞术
Dr_劉医生
大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)流式细胞分离的具体步骤,见图
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问
细胞实验
Dr_劉医生
可以用,先用注射AngII泵来做细胞的高血压表型,然后加入目的药物来干预,实验方法可以参考这篇文章
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问
请问一下,做snp与性状的相关性分析,是用JMP做还是使用emmax做GWAS分析?
Dr_劉医生
建议使用emmax做GWAS分析,SNP量太多,JMP算力不行
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问
肾小球芯片构建高血压型慢性肾脏病模型?
Dr_劉医生
大致步骤是先用软件制造掩膜,再进行PDMS芯片加工,最后肾小管芯片组装(过程如图);而且不建议自己造模,没技术支持。你可以看这两篇文献,了解造模原理;Paoli R, Samitier J. Mimicking the Kidney: A Key Role in Organ-on-Chip Development[J]. Micromachines. 2016, 7(7): 126.Kim S,
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问
FITC双通道流式分析法如何简便分析及其思考是怎样的?
土井挞克树
FITC双通道流式分析主要通过看流式结果图来分析,流式结果图的不同象限具有不同的意义。不同的细胞群也具有不同的结果图。可以区分坏死细胞,晚期凋亡细胞,早期凋亡细胞以及未发生凋亡的细胞。
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问
链霉菌泛素-蛋白酶体降解蛋白过程中需要维持一个铁稳态吗?
土井挞克树
需要固定时间向特定菌数的培养基中补充铁。
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问
请问有无投过journal of gastroenterology的老师?
Dr_劉医生
利益说明可以后续补交,而且在投稿时,系统也会让你勾选confilct of interest,问题不大
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问
抗体染色后细胞荧光反而比未染色更低?
大草原的小灰驴
1.封闭的时间太短,导致非特异性染色或者内源性过氧化物酶活性反应。2.标记抗体染色的条件不合适,抗体浓度过高、pH值没调整好、洗过量的抗体不充分。3.光源的波长选择错误。4.试剂失效或者被污染。
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问
HR的计算问题
juyue2010
使用spas,做cox分析,会得到HR信息
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问
求助求助!!!
土井挞克树
推荐一篇文献Recommendations for presenting analyses of effect modification and interaction. PMID: 22253321,DOI: 10.1093/ije/dyr218, 文章的补充材料里有excel,可用来计算RERI 及其CI 和P值
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问
R语言基因差异分析求助
土井挞克树
你换成计数资料后可以设置一个代名。
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问
C2C12细胞转染效率低
huarenqiang5
从以下几点找一下原因:1.质粒DNA或混和液中含有血清。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 4.转染试剂选择不当。5.细胞密度不是最优,优化细胞密度。6.混和加入细胞中不含血清。在转染过程中使用含有血清的培养基,细胞状态良好有利于转染效率的提高。7 .转染体系中含有抑制物。8.转染试剂保存不正确,转染试剂保存在4℃。
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问
H9C2心肌细胞形态
土井挞克树
换的太频繁了,延长换液时间。三天一次
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问
建库 电转求助
土井挞克树
可以改变载体质粒的性质提高连接产物滤
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问
血卟啉来产生单线态氧需要注意什么
土井挞克树
需要注意的是血卟啉单线态氧荧光探针在碱性pH条件下或者某些溶剂中会发生活化,溶剂包括但不限于乙腈、DMSO、DMF、丙酮等。
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问
链霉菌培养一直染真菌怎么办?
土井挞克树
可以使用抗真菌类药物,不要使用抗生素,会适得其反
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问
荧光素酶体外发光实验
土井挞克树
具体方法1. 加裂解缓冲液裂解转染的细胞。2. 将上述裂解物转移入微孔板或者试管中(根据检测的需要选择所用器材类型)。3. 加入含有所有酶反应成分(必须包括底物荧光素),使化学发光反应开始。4. 使用荧光仪或者液闪计数仪检测所发射的荧光
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