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科研学霸天团，48小时有问必答

问构建的稳定细胞系被污染了，有啥补救措施吗？谢谢啦

loveliufudan

以下是一些建议来补救这种情况： 1. 检查实验室环境：仔细检查实验室环境，包括培养室、材料和试剂的存储区域，以确定是否存在潜在的污染源。确保实验室环境的清洁和无菌状态。 2. 检查操作流程：回顾你的实验操作流程，特别是与细胞处理相关的步骤。确认是否有可能存在污染的操作，如培养皿、培养液、工具等。确保在操作中严格遵守无菌操作规范。 3. 更换细胞培养物：考虑更换新的细胞培养物，包括培养基、补充物和抗

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问关于流式细胞术补偿调节问题

静心观照

1、需要设置单染管，但通常是对照组设置单染管。2、可以使用PBS稀释细胞悬液；也可以接种的时候适当增加细胞接种密度，上机的时候使用低速跑。3、未染色的管是双阴管，两种染料都不染，此管主要用来圈门，确定大部分细胞的位置；通常也是对照组设双阴管。4、FSC-SSC，调节的原则是上下左右都不压线，如果细胞比较小，可以选择不同的模式，适当放大信号，细胞分群就会比较明显了。6、个人使用过Biolegend这

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问MTT测试细胞增值抑制率

土井挞克树

药物浓度是可以的，可以考虑调整一下细胞密度。降低一下细胞密度

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问EvansBlue是一种非膜透性染料，只有细胞膜受损的时候才能透过膜进入细胞

静心观照

伊文斯兰，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞因有外排功能而无法被伊文斯兰染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞，但无法区分死亡与坏死。

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问血液中蛋白质组学如何确定要提取膜蛋白或线粒体蛋白呢？

dxyc42u

用血清比较好一些，血清提的蛋白更加纯一些

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问求助🆘可以直接取10ul荧光染料标记后的菌液到载玻片上，在荧光显微镜下观察吗？还是必须得用PBS重悬细菌后取样观察？

土井挞克树

重悬后再观察吧，效果会好很多。

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问大鼠鞘内注射利多卡因后双下肢不发生瘫痪，但是给其他药物时有明显的刺激症状，是什么原因呢？

dxyc42u

很可能是利多卡西给的太少了，建议加大剂量

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问天然蛋白做乳化剂，可以促进肠道淋巴转运吸收吗？有哪些蛋白可以促进胃肠道淋巴吸收呢？

huarenqiang5

天然蛋白做乳化剂能够促进肠道淋巴转运吸收。

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问请问大家都是怎么提乳鼠的原代肝细胞呀，有具体的实验步骤吗,我提的不贴壁，到底原代肝细胞是否贴壁呢？

huarenqiang5

估计是你的操作步骤问题。原代肝细胞很容易贴壁生长，4小时一般都能贴壁。

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问用荧光染料染完菌后，再把菌接入培养基继续培养菌液，想观察荧光染料与细菌分裂次数的关系，应该怎么取样处理再在荧光显微镜下观察呢？

sswei

利用荧光D-氨基酸（fluorescent D-amino acid, FDAA）的多色染料检测细菌发生细胞分裂的运作。

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问如何选合适的杂志，以及换杂志格式如何快速修改？

sswei

打开Elsevier Journal Finder主页填入预投稿论文的题目 | 摘要 | 关键词 | 领域点击“Find journals”按钮搜索结果会显示推荐的各种投稿期刊啦，会显示期刊影响因子 | 接收率 | 审稿周期等。最后根据需求选择。

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问怎么有礼貌的回复审稿人

sswei

感谢编辑最终决定文章是否被录用的人是编辑！在回复的时候，添加一个cover letter。感谢编辑的辛勤工作，告诉他已经根据要求做了回复和修改。对审稿人提出问题逐条答复对审稿人的建议和问题表示感谢不遗漏任何意见逐点回复，可以将审稿意见进行编号，然后顺序回复，标示论文中进行的修改，或是指出修改前后的页码与行数，另外，为了更好区别意见和回复，审稿意见可以使用粗体字，或者换一种颜色。

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问MTT实验细胞铺96孔板密度一般多少

sswei

在96孔板中加200ul比较合适，细胞的密度一般取1undefined5。正好合适。

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问请问人肺炎支原体培养怎样做才能做细胞之间不相互感染

huarenqiang5

首先保持周围环境无菌，其次主要严格按照无菌技术进行操作一般不会相互感染。

3 回答382 围观

问冰冻切片切完后，脑片可以放在4度保存多久啊

sswei

做了冰冻切片如暂时不染色观察，如果第二天做，可以直接放在4℃冰箱保存。如果想保存更久，用冷丙酮固定10分钟，放-20℃保存。染色前，从冰箱取出后在4℃复温20分钟，再室温复温15分钟即可。

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问投稿需要查重降重吗？

sswei

如果用户在普通期刊上发表论文，重复检查率的要求将在30％以内，整体难度仍然相对较小。例如，如果核心期刊上发表的论文重复检查，则论文重复检查难度较大。一般来说，我们应该确保论文的查重率低于15％。当许多顶级期刊发表论文时，论文查重检测应低于5％。

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问两种药物联合用药浓度如何获得？

dxy_mqg1dtg8

联合用药的药物浓度需要考虑两种药物的药代动力学参数，如药物的吸收、分布、代谢和排泄等。一般来说，联合用药的药物浓度需要进行药代动力学模拟，通过计算机模型来预测药物浓度的变化。这个过程需要考虑药物的各种药代动力学参数，如药物的半衰期、药物在体内的分布、药物的清除速率等等。药代动力学模拟可以帮助优化药物剂量和给药方案，从而达到更好的治疗效果。药代动力学模拟可以使用专业的药物动力学软件，如WinNonl

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问测CAT时，是用煮死的酶用来校零，测对应活着的酶的吸光度吗？另外，煮死的酶在测定时显示的吸光度不稳定，一直在变，可能是什么原因呢？

dxy_mqg1dtg8

可能是由于样品的分解或者氧化等因素导致的。为了避免这个问题，可以尝试使用新鲜的煮死CAT酶样品，或者在样品制备和测定过程中加入适当的抗氧化剂，如抗坏血酸等，以减少样品的氧化和分解。此外，也可以尝试进行多次测定，取平均值来减小误差。

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问如何使用液氮研磨组织？

dxy_mqg1dtg8

液氮研磨是一种有效的样品制备方法，但是需要注意一些安全和操作问题。首先，将组织剪碎后放入研磨罐中，然后将研磨罐放入液氮中，等待5分钟，这个步骤是正确的。但在研磨之前，需要等待样品回到常温，这样才能进行研磨，否则样品会过于脆弱而无法研磨。其次，如果样品不易研磨，可以尝试将样品放入液氮中浸泡更长时间，或者重复浸泡和研磨的步骤，直至样品研磨均匀。关于手动研磨方法，将组织剪碎后放入研钵中，然后倒入液氮手动

7 回答4993 围观

问2组相对1组，有明显统计学差异。那么，2组的标准误一定要大于1组数据才有意义吗？也不知道是不是我理解错了讲座的意义？急

feixue7758527w

不是的，不是2组一定要大于1组才有意义的。在统计学上标准误不是很起作用的，但是标准误太大还是对结果有影响的。

3 回答269 围观

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