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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
请问冻干粉末蛋白复溶之后用什么液体进一步稀释?
土井挞克树
冻干粉末可以用pbs来进行稀释。
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问
在病毒感染细胞的过程(细胞没死前)显微镜能看到细胞的什么变化嘛?
土井挞克树
如果是实施电镜的话可以看到细胞变形,崩解的过程。
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问
请问SpliceAI中的那个-A参数怎么通过自己的gtf文件得到
土井挞克树
-A参数是开始修改的元素索引位置。在gtf中可以查看到
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问
Tran screener CD73实验,最后的结果怎么处理呀
土井挞克树
得到CD73分泌的阳性结果后,可以做荧光染色定位,查看定位情况。
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问
请问这个破骨细胞诱导成功了吗?
sswei
诱导成功的破骨细胞为可见单个核细胞融合成多核细胞,TRAP染色可见多数细胞胞浆呈酒红色。因该镜下呈酒红色胞浆的细胞数太少,所以诱导欠成功。
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问
做韭菜叶片的石蜡切片在脱蜡复水过程中出现了脱离玻片是因为什么啊?
土井挞克树
脱片是因为脱水过度了,减少脱水时间。
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问
基因过表达后,相关的表型结果,过表达株比空载株高,二者有统计学差异。但未到野生株水平,这个应该怎么解释呢?
loveliufudan
基因过表达可以导致表型的变化,但是基因表达水平的高低并不是唯一影响表型的因素,还可能受到其他基因、环境和遗传背景等因素的影响。因此,即使基因过表达株比空载株表现出显著的表型差异,也不一定能够达到野生型的表型水平。这种现象可以通过以下几种方式来解释:基因过表达只是表型变化的一部分:在自然界中,很少有单个基因能够完全控制某个表型的发生,表型通常受到多个基因的影响。因此,即使某个基因过表达,也不能保证该
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问
从细胞中提取外泌体的实验,一般需要养多少细胞再进行提取分离比较合适
土井挞克树
一般需要养10x7左右的细胞再分离提取
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问
做sdspage的时候上层蛋白质条带总是会消失,有没有大神能帮忙看一下会是什么原因导致
土井挞克树
我之前也经常出现锯齿,后来发现是蛋白降解了,你可以跑个电泳验证一下
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问
碧云天的茜
土井挞克树
c0148是专门检测成骨细胞的,c0138检测干细胞显色好
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问
求助:小鼠MCAO模型
土井挞克树
1.选用柔韧度合适的线栓2.选择线栓型号要与老鼠体重相配。每个地区的老鼠有差异,所以要做预实验,根据预实验结果来选择合适型号线栓。3.插破的情况下,也可以根据插破点来找到合适型号线栓。
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问
Transwell小室侵袭与共培养问题
土井挞克树
可以共同培养,自己收的细胞要放在上室。
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问
如何检测标本中某基因或蛋白的含量
土井挞克树
可以做rt-pcr,来检测rna的含量。然后做qpcr来定量分析rna
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问
观察拟南芥的表型,其中要求计算拟南芥的萌发率,那在一天的什么时候数拟南芥的萌发数最好呢,还是一天多数几次,分早中晚
sswei
拟南芥在发芽过程中,它要求合适的温度(22-23℃)、光照、光周期、湿度。并且要求打破休眠。上述影响因素中,光照和湿度是2个必需的条件。在种子发芽的过程中,如果种子被土壤遮盖而不能见到阳光则种子不能发芽。所以,在计萌发数时宜白天为佳,每天白天固定时间数3次。
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问
求问大神角膜上皮细胞怎么提取,培养?
土井挞克树
培养基:无血清角质形成细胞培养液,添加0.15mmol/L 钙、0.1ng/ml 人上皮生长因子、5mg/ml 胰岛素、0.5mg/ml 氢化可的松和30mg/ml 牛垂体提取物;MEM;PBSA;胎牛血清
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问
降解TLR4实验所用的LPS刺激时长大家都是多久?然后孵育PROTAC时长又是多久?
土井挞克树
lps一般的刺激时长为3-5h。
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问
请问牙龈卟啉单胞菌的浓度与od值关系?
sswei
一般OD600=1时对应的细菌浓度为undefined10^9cfu/ml。
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问
分子克隆测序都是载体的的序列?
土井挞克树
说明载体没连接或者载体脱离了,需要重新连接
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问
实验中用到的buffer的配置详细是什么试剂进行配置,以及蛋白含量和对应磁珠用量的具体比例是什么?
土井挞克树
buffer的配置有很多种方法,可以参考下表
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问
一个基因有三个转录变体,克隆基因时会对测序结果造成影响吗,影响克隆基因吗
huarenqiang5
一个基因有三个转录变体时可以用以下两种方法进行基因测序: 1.设计CDS引物,通过提取组织RNA,并设计相应引物,运用PCR的方法获得目的基因CDS序列,连接到克隆载体后,挑取单克隆进行测序。这种方法相对成本较低,但是PCR过程可能引入突变。适合基因CDS序列较短的情况。 2.全基因合成:根据目的基因的CDS序列,直接交给公司设计合成目的基因。此方法优点准确
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