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动物模型的设计原则

动物模型的设计原则和注意事项一、设计原则 生物医学科研专业设计中常要考虑如何建立动物模型的问题,因为很多阐明疾病及疗效机制的实验不可能或不应该在病人身上进行。常要依赖于复制动物模型,但一定要进行周密设计,设计时要遵循下列一些原则。(一)相似性 在动物身上复制人类疾病模型。目的在于从中找出可以推广(外推)应用于病人的有关规律。外推法(Extrapolation)要冒风险,因为动物与人到底不是一种生物 ...

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三足离心机使用注意事项

三足离心机使用的注意事项与小经验

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血液分析仪校准规范化的建议

血液分析仪是临床实验室最常用的分析仪器之一,其检测结果是否准确对疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。在仪器检测结果精密度良好的前提下,仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤,为此结合国内的实际情况,在参考有关文献的基础上,就血液分析仪校准的基本要求提出如下建议。 一、血液分析仪校准的一般要求 (一)为了保证检测结果的准确性,要 ...

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如何选择动物血细胞分析仪(图)

人的血液和动物血液很多形态都不同的,简单的例子,很多动物的红细胞有核,人血红细胞有核的很少,同剂量同浓度的溶血剂可以完全破坏人血红细胞但对某些动物血却无能为力,那么就会再白细胞的lym前出现大量的影子图形,会造成一些静态界标的设备白细胞计数假性增高,甚至影子细胞与lym重叠,造成单项分类偏高。如果改变溶血剂浓度或者剂量,那么白细胞的破坏也会变得明显,这样就会造成分类严重不准确。其实,就动物学来讲, ...

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细胞培养中的一些试剂

一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor) 在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。 在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培养前加入适量秋水仙素,使正在分裂的细胞停留在中期,以获得大量分裂相供分析之用。 ...

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有关细胞支原体污染的经验讨论

支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。 细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细 ...

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细胞支原体污染的荧光检测方法

DNA荧光染色法: 1.原理:利用荧光染剂(bisbenzimide Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之荧光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。 ...

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细胞培养的一般过程

一、准备工作 准备工作对开展 细胞培养 异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后 ...

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细胞培养基的应用选择

选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考: (1 )建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 (2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 (3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 (4) 用多种培养基培养目的细胞 ...

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细胞培养室建立的细节问题

前段时间,经历了几个月的时间,为实验室建了一个 细胞培养间。目前这个细胞培养间运转良好,培养的神经元长了10来天,长势不错,已经可以认为细胞培养室建立成功。在建立细胞培养间的过程中,碰到了许多问题,逐一解决后,觉得大家如果要建立细胞培养间,肯定也会碰到许多相同的问题,所以将我碰到的问题整理出来。首先向大家推荐一本书,个人认为是比较经典的――《动物细胞培养-基本技术指南》科学出版社,英,R.I.弗雷 ...

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培养基的历史

体外培养(in vitro culture)包括:组织培养(tissue culture)、细胞培养 (cell culture)、器官培养(organ culture)。顾名思义,就是将活体结构成分(如活体组织、活体细胞或者活体器官等)从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。 体外培养已经历了约一百年的发展历史,但发展初期进程比 ...

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建立细胞系或细胞株

各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certified Cells)。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各种细胞系(株)已难胜数,我国也建有百种以上,并在不断增长中。 体外培养细胞的种类和命名 体外培养细胞的名称,随培 ...

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细胞培养基的定义

人工模拟细胞体内生长的营养环境,维持细胞生长的营养物质它是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。 包括: 1.天然培养基 指来自动物体液或利用组织分离提取的一些培养基,如动物血浆、胚胎浸出液、血清和人血清,水解乳蛋白等。 2.合成培养基 人工设计、配制的培养基,如MEM、199、DMEM、RPMI1640等。 ...

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细胞培养常见问题解答(FAQ)

1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞 ...

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动物细胞培养技术平台

动物细胞大规模培养已成为生物制药领域最重要的关键技术之一,并以其研究的深入和进展推动生物技术产业的迅速发展。专家预言:蛋白治疗药物如糖蛋白、抗体和多肽药物仅仅只是刚刚开始进入市场,预计在下一个10年或20年会有更为快速的发展。届时,蛋白治疗药物的迅速增长和市场需求将远远超过全世界的生产能力。 动物细胞规模化生产重组蛋白和抗体的工艺选择可考虑使用当前较成熟的工业化支持技术平台,以缩短产品工艺研发的 ...

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细胞生存条件

1.基本营养物质 (1)糖:六碳糖主要能源、维持渗透压,含葡萄糖1-5%。 (2)氨基酸:维持生存需12种氨基酸(精、胱、亮、异亮、赖、蛋、苯丙、苏、色、组、酪、缬)。谷氨酰胺需量最大缺乏时细胞生长不良。 单 细胞培养 或细胞量少时所需氨基酸的种类和量增多,细胞主要利用左旋氨基酸异构体。 (3)维生素:细胞大部分需水溶性B族维生素,Vitc不可少,1-10mg/100ml可促进正常细胞生长繁殖。 ...

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细胞培养基的基本要求、组成及作用

细胞培养基的基本要求 1.营养成分:氨基酸、单糖、维生素、无机离子与微量元素。 2.促生长因子及激素 3.渗透压 4.pH 5.无毒、无污染 细胞培养基组成及作用 1.氨基酸 组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而 ...

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细胞培养目的和用途

1.科学研究 (1)药物研究开发,如新药筛选,疫苗、基因工程药物、细胞工程、药物研究与开发、单克隆抗体制备等。 (2)基础研究,如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。 2.生物制药 (1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(肿瘤疫苗)等。 (2)基因工程药物生产:如EPO等。 (3)抗体药物、基因治疗药物生产。 (4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物 ...

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细胞培养基发展趋势和品质

细胞培养基发展趋势 1.无血清培养基:是设计用来在无血清条件下促使特殊类型的细胞生长或进行专门应用的培养基。需要添加生长因子和/或细胞因子,含有个别蛋白或大量蛋白组分。其主要优点:增加确定性;性能更一致;容易进行纯化和下游加工;提高制品安全性和/或产量。 2.无蛋白培养基:培养基中没有添加蛋白,但仍然可能包含一些动物或植物来源的成分(如低分子量肽的各种水解物)。&nbs ...

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细胞培养基本概念和环境

一、细胞培养基本概念 细胞培养 是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。 细胞培养 的培养物为单个细胞或细胞群。 在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋巴 细胞培养 具有时间短、技术简便、可重复取材等优点,它在临床染色体分析中使用最广泛。体外 ...

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