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植物组织培养培养基的五类成分

1、无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成。大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离 ...

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组织培养培养基配制、灭菌及保存

1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。 2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,配成培养基。 4、用1N的氢氧化钠或盐酸,滴入3中的培养基里,每次只滴几滴,滴后搅拌均匀 ...

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组织培养常用培养基

组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。 培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有变化,因此各配方中均不列入。几种常用培养基如下: MS培养基 MS培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度,对保证组织生长所需的 ...

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外植体的灭菌

接种用的材料表面,常常附有多种多样的微生物,这些微生物一旦带进培养基,就会迅速滋生,使实验前功尽弃。因此,材料在接种前必须进行灭菌。灭菌时,既要将材料上附着的微生物杀死,同时又不能伤及材料。因此,灭菌采用何种药剂,什么浓度,处理多长时间,均应根据材料对药剂的敏感情况仔细敲定。 经常使用的灭菌剂有次氯酸钠、过氧化氢、漂白粉、溴水和低浓度的氯化汞等。使用这些灭菌剂,都能起到表面杀菌的作用。但氯化汞灭 ...

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电热恒温培养箱的使用方法

1、使用方法 1.1把电源开关拨至“l”处,此时电源指示灯亮,控温仪上有数字显示; 1.2温度设定 a. 当所需加熟温度与设定温度相同时不无原则设定,反之则需重新设定。先按控温仪的功能键“SET”进入温度设定状态,SV设定显示一闪一闪,再按移位键“◢ ”配合加键“△”或减键“&rdqu ...

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厌氧培养箱操作规范

一、操作室厌氧环境形成 1、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋。 2、通电源开照明灯,开控温仪,调节所需温度及安全温度。 3、操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂并放入美兰指示剂(封闭)。 4、 关紧取样室内外门,并抽真空校验。 5、操作室内第一次置换(氮气置换): (1)先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋。 (2)接通氮气进气路,打开氮气控 ...

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组织培养再生的步骤

一、接种 组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: 1、在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。 2、在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌(无菌室照射20~50分钟,接种 ...

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厌氧菌的分离和培养

1 目的 1.1 了解厌氧微生物的生长特性 1.2 观察厌氧微生物(双歧杆菌)的形态特征 1.3 掌握厌氧微生物的滚管分离、培养与计数技术 2 原理 目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;亨盖特厌氧滚管技术。这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术。亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特(Hungate)于1950年首次提出并应 ...

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厌氧培养

1.厌氧缸法。接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。 2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生 ...

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袖珍式厌氧工作站 bugbox

·采用外源双瓶供气,一瓶为无氧混合气体,一瓶为氮气,使运作成本大为降低。 ·采用特殊处理的钯催化剂,省去了每次使用后的活化步骤,该催化剂可使用一年以上。 ·采用电子自动恒温恒湿系统。 ·转移闸系统可快速移入和移出样品。 ·采用EZEE SLEEVES裸手操作系统,避免使用刺激手腕的令人不舒服的橡胶袖套,尤其适用于对橡胶敏感的实验 ...

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无土栽培营养液配制

营养液的配方最好选用所栽作物专用的配方。如果专用配方找不到,可用霍格兰氏营养液的配方进行配制。 配制营养液时应按照以下方法进行: 1、在营养液的许多盐类中,以硝酸钙最容易和其它盐类起化合作用,如硝酸钙与硫酸钾相遇,容易产生硫酸钙沉淀,硝酸钙与磷酸盐相遇,也容易产生磷酸钙沉淀。因此,在配制营养液时,硝酸钙要单独溶解在1个容器里,稀释后才能和其它盐类混合在一起。 2、硝酸钙以外的其它大量元素和微 ...

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厌氧菌接种培养方法

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。厌氧缸法 接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养 ...

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培养箱温度失控处理措施

1.每天上班记录培养箱、冰箱的温度于温度记录本上,如发现普通培养箱的温度超过37℃(不包括37℃)或低于34℃(不包括34℃);真菌培养箱温度超过31℃(不包括31℃)或低于25℃(不包括25℃);冷藏冰箱的温度超过8℃(不包括8℃)或低于2℃(不包括2℃);冷冻冰箱的温度超过-10℃(不包括-10℃)或低于-30℃(不包括-30℃),应立即追溯其失控的时间和原因。 1.1如失控的原因可以马上纠正 ...

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Vicia Faba and Chemical Damage

Materials Growing root tips of the broad beanV. faba (2n=12) Solutions of chromosome-damaging agents listed in the introduction to this Chapter Reagents for Feulgen stain (Exercise 2.5) Oven at 60° ...

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Timing of Cycles

Materials Monolayer cultures grown in 75 mm culture flasks (Cells from Exercise 11.4 may be used or cultures of tetrahymena yeast or algae may be used.) H-thymidine with at least 4 µc/ml 0.36 c/ ...

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H-Thymidine Uptake by Cultured Cells

Materials Fibroblast cells in log phase growth Ca Mg free-phosphate buffered saline (PBSA) 5% (w/v) Glutaraldehyde (GTA) 2% (w/v) Perchloric Acid (PCA) Subbed slides (coated with chrom alum gelatin) a ...

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Ascaris Oogenesis

Materials Prepared slides of Ascaris megalocephala maturation Microscope Procedure 1.Place the slide(s) of Ascaris on the microscope and focus on the eggs within the body. Unlike the grasshopper testi ...

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Grasshopper Spermatogenesis

Materials Prepared longitudinal section of grasshopper testis Microscope Procedure 1.Place the slide on the microscope and with low power identify the apical end of the testis and the region where the ...

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实验用培养箱的种类与用途说明

培养箱是培养微生物的主要设备,可用于细菌、细胞的培养繁殖。其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境,如控制一定的温度、湿度、气体等。目前使用的培养箱主要分为三种:直接电热式培养箱、生化培养箱和二氧化碳培养箱。(一)电热式和隔水式培养箱 电热式和隔水式培养箱的外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成,隔水式培养箱内层为紫铜皮制的贮水夹层,电热式培养箱的夹层是用石棉或 ...

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Mitosis

Materials Prepared slide of Onion root tip Prepared slide of whitefish blastula Microscope Procedure 1.Obtain a slide of an onion root tip and examine it for the basic stages of mitosis. Refer to Figu ...

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