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一、细胞的裂解 1、单层细胞的裂解 a）吸出培养液，以7ml用冰预冷的无钙镁离子磷酸缓冲盐溶液PBS冲洗细胞培养皿内的单层细胞，重复1次，将平板置于冰上直至所有单层细胞冲洗完毕。也可将平板放在一块铝板上，再将铝板置于冰盘上。 b）直径为90mm的培养皿需加0.5ml RNA提取缓冲液，并使之遍布整个平板的表面。（RNA提取缓冲注液配方：0.14mol/L NaCl，1.5mmol/L MgCl2， ...

1.Basic Techniques - The 'Do's and Don'ts' of Cell Culture Given below are a few of the essential "do's and don'ts" of cell culture. Some of these are mandatory e.g. use of personal protecti ...

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 一、培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是： ...

How to thaw serum: Serum that is stored at -10º C to -40º C is stable for extended periods of time. It is neither necessary or desirable to store serum at -70º C as it does not prolong ...

植物制片是进行园艺植物科学研究所需用的一种基本方法，比如进行植物各个器官的解剖构造观察、花芽分化研究、授粉受精观察、贮藏营养观测以及染色体观察等等都需要进行制片。通过对切片结果的分析，可以比较不同试验处理的效果以及了解不同树种和品种相应的生物特性等。植物制片技术是一个相对独立的体系，内容繁多。在此我们仅介绍在园艺植物科学研究中常用的一些基本方法和原理。 &nbs ...

20世纪初植物细胞全能性的概念建立以来，植物组织和细胞培养的研究已取得了很大的进展，如试管苗大量繁殖技术、单倍体技术、原生质体培养、细胞杂交、体细胞变异及突变体的选择和利用等。80年代，随着基因工程的发展，其研究成果也渗透到细胞工程中来，引起了细胞培养研究的新突破。其中通过发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）中Ri质粒介导的天然植物遗传转化，建立发根培养系统来生产原植物中 ...

一、温度： 对大多数植物组织20～28℃即可满足生长所需，其中26～27℃最适合。 二、光： 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果，有些植物组织在暗处生长较好，而另一些植物组织在光亮处生长较好，但由愈伤组织分化成器官时，则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和根。有些次生物质的形成，光是决定性因素。 三、渗透压： 渗透压对植物组织的生长和分化很有关系。在培养基中添加食盐、蔗 ...

1、逆转录PCR(RT-PCR)用来扩增RNA的方法。2、竞争逆转录PCR(competitive reverse transcription-polymerase chain rection C-RT-PCR)低丰度RNA定量的好方法。3、多重PCR（multiples PCR）在同一PCR体系中加入多对引物可用于基天长度很长，发生多处缺失的检测。扩增同一模板的几个区域。4、多种PC ...

细胞培养常见问题及解答

Introduction A major advance in our knowledge of cells came about with the ability to maintain them in continous culture. Prokaryotes have been cultured for a relatively long time but eukaryotic cultu ...

细菌内毒素的简介及提取方法

1.检测仪背面键接通电源。2.器自检30秒后，按键。3.按键，选择Analy 。4.按键，选择D/S Filter 按。5.按键，选择单或双波长。6.键 ，将光标移至检测或参考波长。7.键，选择目的波长。8.整完毕后，放入待测酶标板，请注意将板框放平，压紧后关上检测盖。按 键开始检测。9.打印完毕后，关闭电源，取出样本后请做好使用记录。如需详细说明，请借阅说明书。 ...

1. 工作环境　　酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。　　a.仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。　　b.仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。　　c.为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。　　d.操作环境温度应在15℃~40℃之间，环境湿度在15%~85%之间。　　e.操作时电压应保持稳定。　　f.操作环境空气清洁，避免水汽、烟尘。　 ...

一、实罐灭菌 1、将冷凝水管路断开，拔下电极，打开罐盖，将培养基装入发酵罐及补料瓶，易产生泡沫的培养基尽量不要超过两升。 2、连接管路： 取样管路连接，补料管路连接； 空气过滤器用硅胶管与罐盖空气管连接，并用弹簧夹夹紧； 排气口与过滤器用硅胶管连接； 安装 ...

用于抗生素、氨基酸等近代生物技术产品的发酵罐，其主要形式结构未见有突出进展的介绍，而有关性能操作的部件却有日新月异的发展。主要是： 罐型结构 在生产规模应用的发酵罐大部分的型式，仍然是机械搅拌式、液体喷射循环式和压缩空气鼓泡式三大类型。 1 机械搅拌式发酵罐 主要是从径向液流的涡轮搅拌器向轴向液流的翼型叶轮及其组合结构的研究方向发展，Lightnin公司的A315为首的轴向叶轮在80年代问世以后， ...

首先将发酵罐彻底清洁干净，加入发酵罐容积1/10000的甲醛溶液，然后执行发酵罐灭菌标准操作规程，将罐温升至85度并保温30分钟。在保温期间要不间断的开关各小排气。 保温结束后，将冷凝水排走并加入发酵罐容积90％的饮用水，将罐温升至120度保温20-30分钟，保温结束待罐温下降后将水排走，最后再用饮用水清洁罐内壁及各部件。 再加一点，操作过程中记得做好劳动保护，比如口罩、眼罩、手套等。 ...

62 氯化钠结晶紫增菌液成分:蛋白胨 20g氯化钠 40g0.01%结晶紫溶液 5mL蒸馏水 1000mLpH9.0制法:除结晶紫外，其他按上述成分:配好，加热溶解。约加30%氢氧化钾溶液4。5mL，校正pH。加热煮沸，过滤。再加入结晶紫溶液，混合后分装试管。121℃高压灭菌15min。 63 氯化钠蔗糖琼脂成分:蛋白胨 10g牛肉膏 10g氯化钠 50g蔗糖 10g琼脂 18g0.2%溴麝香草酚 ...

51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨 15g眎胨 5g牛肉膏 3g酵母膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层 ...

41 GN增菌液成分:胰蛋白胨 20g葡萄糖 1g甘露醇 2g柠檬酸钠 5g去氧胆酸钠 0.5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.0制法:按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶225mL，115℃高压灭菌15min。 42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖 5g牛胆盐 20g磷酸氢二钠 8g磷酸二氢钾 2g煌绿 0.015g蒸馏水 100 ...

31营养琼脂成分:蛋白胨 10g牛肉膏 3g 氯化钠 5g琼脂 15～20g蒸馏水 1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。注:此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面，则应为2%。 32营养肉汤 ...