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1、逆转录PCR(RT-PCR)用来扩增RNA的方法。2、竞争逆转录PCR(competitive reverse transcription-polymerase chain rection C-RT-PCR)低丰度RNA定量的好方法。3、多重PCR（multiples PCR）在同一PCR体系中加入多对引物可用于基天长度很长，发生多处缺失的检测。扩增同一模板的几个区域。4、多种PC ...

细胞培养常见问题及解答

Introduction A major advance in our knowledge of cells came about with the ability to maintain them in continous culture. Prokaryotes have been cultured for a relatively long time but eukaryotic cultu ...

细菌内毒素的简介及提取方法

1.检测仪背面键接通电源。2.器自检30秒后，按键。3.按键，选择Analy 。4.按键，选择D/S Filter 按。5.按键，选择单或双波长。6.键 ，将光标移至检测或参考波长。7.键，选择目的波长。8.整完毕后，放入待测酶标板，请注意将板框放平，压紧后关上检测盖。按 键开始检测。9.打印完毕后，关闭电源，取出样本后请做好使用记录。如需详细说明，请借阅说明书。 ...

1. 工作环境　　酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。　　a.仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。　　b.仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。　　c.为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。　　d.操作环境温度应在15℃~40℃之间，环境湿度在15%~85%之间。　　e.操作时电压应保持稳定。　　f.操作环境空气清洁，避免水汽、烟尘。　 ...

一、实罐灭菌 1、将冷凝水管路断开，拔下电极，打开罐盖，将培养基装入发酵罐及补料瓶，易产生泡沫的培养基尽量不要超过两升。 2、连接管路： 取样管路连接，补料管路连接； 空气过滤器用硅胶管与罐盖空气管连接，并用弹簧夹夹紧； 排气口与过滤器用硅胶管连接； 安装 ...

用于抗生素、氨基酸等近代生物技术产品的发酵罐，其主要形式结构未见有突出进展的介绍，而有关性能操作的部件却有日新月异的发展。主要是： 罐型结构 在生产规模应用的发酵罐大部分的型式，仍然是机械搅拌式、液体喷射循环式和压缩空气鼓泡式三大类型。 1 机械搅拌式发酵罐 主要是从径向液流的涡轮搅拌器向轴向液流的翼型叶轮及其组合结构的研究方向发展，Lightnin公司的A315为首的轴向叶轮在80年代问世以后， ...

首先将发酵罐彻底清洁干净，加入发酵罐容积1/10000的甲醛溶液，然后执行发酵罐灭菌标准操作规程，将罐温升至85度并保温30分钟。在保温期间要不间断的开关各小排气。 保温结束后，将冷凝水排走并加入发酵罐容积90％的饮用水，将罐温升至120度保温20-30分钟，保温结束待罐温下降后将水排走，最后再用饮用水清洁罐内壁及各部件。 再加一点，操作过程中记得做好劳动保护，比如口罩、眼罩、手套等。 ...

62 氯化钠结晶紫增菌液成分:蛋白胨 20g氯化钠 40g0.01%结晶紫溶液 5mL蒸馏水 1000mLpH9.0制法:除结晶紫外，其他按上述成分:配好，加热溶解。约加30%氢氧化钾溶液4。5mL，校正pH。加热煮沸，过滤。再加入结晶紫溶液，混合后分装试管。121℃高压灭菌15min。 63 氯化钠蔗糖琼脂成分:蛋白胨 10g牛肉膏 10g氯化钠 50g蔗糖 10g琼脂 18g0.2%溴麝香草酚 ...

51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨 15g眎胨 5g牛肉膏 3g酵母膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层 ...

41 GN增菌液成分:胰蛋白胨 20g葡萄糖 1g甘露醇 2g柠檬酸钠 5g去氧胆酸钠 0.5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.0制法:按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶225mL，115℃高压灭菌15min。 42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖 5g牛胆盐 20g磷酸氢二钠 8g磷酸二氢钾 2g煌绿 0.015g蒸馏水 100 ...

31营养琼脂成分:蛋白胨 10g牛肉膏 3g 氯化钠 5g琼脂 15～20g蒸馏水 1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。注:此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面，则应为2%。 32营养肉汤 ...

21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液。3%过氧化氢溶液。试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL。静置于室温(20℃)中30～60min，观察结果。结果:阳性反应，细菌变为黑褐色;阴性反应，细菌不变色。注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。 22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾 34g1mol/L氢氧化钠溶液 175mL蒸馏水 82 ...

从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。 1、起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。在植物组织培养中沿用了愈伤组织 ...

11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏 3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠 1g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000mL制法:加热溶解后分装试管，121℃高压灭菌15min，使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物，移种于苯丙氨酸琼脂，在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴，自斜面培养物上流下，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。 12 ...

01 糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLpH7。4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后按0.5%加入葡萄糖分装于有一个倒置小管的小试管内121℃高压灭菌15min。2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后分装每瓶100mL121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10% ...

超低温冰箱一般采用二级制冷，第一级的制冷剂为R-12(23．Ooz，28．349 523g)，设计压力高压为400ppsi(1ppsi＝6．894 76X10‘Pa)，低压为90ppsi。第二级制冷的冷凝器和第一级制冷的蒸发器是放在一起的；第二级的制冷剂为R-503(8．50z)和R-290(0．70z)的混合体，设计的高低压均为300ppsi。感温探头为热敏电阻，根据阻值的大小(即温 ...

超低温冰箱一般有卧式和立式两种箱体。内箱体一般分为多个承物层，每层均设计有可独立开关的内门。外箱体一般由五块冷轧钢板相互直接拼接而成。箱体内外各有60mm和80mm的聚亚氨脂泡沫材料构成。自动调温器为铂电阻敏感器，用于对温度的精确控制。制冷剂现在一般采用环保型制冷剂，以达到环保要求。 超低温冰箱的制冷系统基本采用复叠式制冷的工作原理，选用两台全封闭压缩机作为高、低温级压缩机使用。低温级蒸发器的紫铜 ...

烘箱是利用电热丝隔层加热使物体干燥的设备。它适用于比室温高5~300℃（有的高200℃）范围的烘培、干燥、热处理等，灵敏度通常为±1℃。它的型号很多，但基本结构相似，一般由箱体、电热系统和自动控温系统三部分组成。 其使用及注意事项总结如下： 1.烘箱应安放在室内干燥和水平处，防止振动和腐蚀。 2.要注意安全用电，根据烘箱耗电功率安装足够容量的电源闸刀。选用足够的电源导线，并应有 ...