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免疫金银法(IGSS)操作指南

一、基本原理 免胶体金检测技术是用金属离子和金属蛋白复合物应用免疫组化原理检测组织内抗原抗体的技术,常用胶体金(铁、汞等)重金属离子。由于胶体金容易制成各种大小的颗粒且有很高的电子密度及分辨率,又不影响抗体的活性,因此既可用于免疫组化又适于免疫电镜技术。 二、操作步骤 1、脱蜡至0.05 mol/L TBS PH7.4缓冲液。 2、抗原修复。 3、1%卵蛋白(EA)15 min,不洗。 4、特异性 ...

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间接血凝检测应用实例

实例一、间接血凝检测多杀性巴氏杆菌荚膜抗原 (一)材料与试剂 1.绵羊红血球 2.标准多杀性巴氏杆菌荚膜菌种A、B、D、E。 3.待测荚膜群的多杀性巴氏杆菌 4.戊二醛(G.R.) 5.pH7.2的PBS液 6.阿氏液(Alserers) 葡萄糖&nb ...

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免疫胶体金技术介绍

一、免疫胶体金技术的基本知识 ㈠ 胶体金的概念 氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。 ㈡ 免疫金标记技术 胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面,无共价键形成,标记后大分子物质活性不发生改变。 ㈢ 胶体金的 ...

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反向间接乳胶凝集反应原理及方法

一、原理 同炭凝,只是载体换为聚苯乙烯乳胶,它是一种由0.6μm~0.7μm的颗粒所组成的胶体溶液,具有良好的吸附蛋白质的性能。 间接乳胶凝集目前已用于鼠疫菌、沙门氏菌、流感杆菌、脑膜炎双球菌、葡萄球菌肠毒素等的诊断。 二、材料与试剂 1.聚苯乙烯乳胶 2.免疫血清 3.正常血清 4.标准抗原 5.待检抗原 6.0.02Mol/L pH8.2硼酸缓冲液 硼砂&nbs ...

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间接炭凝反应原理及方法

一、原理 间接炭凝集反应简称炭凝。它是以炭粉微粒作为载体,将已知的抗体球蛋白吸附于这种载体上,形成炭粉抗体复合物,当炭血清与相应的抗原相遇时,二者发生特异性结合,形成肉眼可见的炭微粒凝集块。 目前炭凝反应已用于炭疽、鼠疫和马副伤寒性流产等病的诊断。 二、材料与试剂 1.炭粉 炭粉粒子最好大小在0.12mm~0.15mm,目前市场上出售的炭粉均不合要求,必须过300目/寸的标准 ...

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洗板机的标准操作程序与维护保养

【目的】 规范洗板机的操作程序,保证洗板机的正常状态。 【适用范围】 本实验室洗板机的操作。 【操作人员】 本实验室实验人员。 【操作步骤】 1。拔掉废液瓶口的塞子(接有与洗板机相连的废液管),倒掉废液瓶的废液,再把塞子安紧在废液瓶口上。注意不要让废液管拧劲,以保证废液管的通畅。 2。拧开洗液瓶的盖子(接有与洗板机相连的洗液管),倒掉前一天洗液瓶里剩余的洗液,倒进新配的洗液。拧紧盖子,注意不要让洗 ...

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全自动洗板机使用的故障排除

一般来说,智能化自动洗板机的故障在许多方面具有相似的地方,因此通过对某一厂家某一型号的设备的故障了解,往往可以给其他型号设备的故障排除提供思路和参考。 SLT型自动洗板机的清洗头有16针,微孔板上每个孔对应一个进液针和一个排液针。该仪器还能够使用9种软件来定义板型,用来控制圆底孔的微孔板的进液位置和排液位置,其进液和排液速度也有5种选择。仪器的运行必须按操作说明书进行,否则会造成仪器损坏或程序错误 ...

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ES / MEF cell culture and electroporation of targeting construct

Day 0 One frozen vial of Murine Embryonic Fibroblasts (MEFs) is thawed quickly in a 37oC water bath. When the last bit of ice is melted spray the vial with 70% ethanol and transfer the contents of the ...

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WELLWASH 4MK2洗板机故障维修

近几年来,全国各地的医院、防疫站及血站纷纷购置酶标仪和洗板机来代替人工判读和洗板,减少人为误差和感染途径。本文仅对芬兰雷勃公司的WELLWASH 4MK2洗板机发生的故障及维修方法进行说明,只能是拋砖引玉供各位参考,其它机型可加以参考。 从框图可以看出,由于正负压泵之间有一个压差,使清洗头一直在吸,而电路部分控制一个与内部驱动系统相连的磁力装置引导托盘移动,当移动到位时,打开PINCH阀,让洗液流 ...

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洗板机选购注意事项

洗板机选购应注意以下几个方面: 1、 关键指标:残留量≤2uL/孔。 这是洗板机的一个关键指标,残留量大的洗板机其洗板效果相对较差。目前大多数洗板机的残留量为≤5uL,设计良好的洗板机可达≤2uL。 2、 能否提供可选择的洗板环境 建议选择具有底部冲洗、两点吸液等功能的仪器;因为底部冲洗有利于减小微孔板底部的干扰性吸附;两点吸液可大大降低微孔液体残留量。这 ...

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比色计、分光光度计、酶标仪的维修与保养

1、分光光度计的原理 72G型、721型、751型、754型 和其它类型分光光度计尽管其功能、外型和结构不同,但都是根据朗伯比尔定律设计的。因而其工作原理和结构基本相同。它们主要由光源、单色器、狭缝、比色 池、光电转换和数值显示等部分组成。分光光度计的工作过程如下:光线通过一个狭缝或一个准直镜投向单色器,单色器可以是一个棱镜也可以是一个光栅,某类简 单仪器还可以是一片滤光片。光线在这里被分解为一个 ...

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酶标仪原理

酶标仪:即酶联免疫检测仪(ELISA Reader)是酶联免疫吸附试验的专用仪器。可简单地 分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量。 ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250 l以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 酶联免疫吸附试验方法 酶标朕免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中 ...

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酶标仪的维修实例及使用探讨

酶标仪在实际应用中很广泛 如应用在临床鉴别乙肝两对半 HIV 等很多方面。在临床实验方面应用在鉴定DNA 等许多方面 可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。故障一: 测量的结果重现性不好 即使用空板测量误差也在允许的范围之外。故障分析: 检查试剂发现没有问题 检查判定公式也没有问题 检查光路也没有污染。几经周折终于发现卡微板的卡簧在伸缩后没有卡到位 造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准 ...

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Preparation of Embryonic Extract

1.Ice on tray.2. Dissection tools: 1 pair of large scissors; 2 pairs of fine scissors; 1 pair of coarse forceps; 2 pairs of fine forceps; soak in 95% EtOH.&nb ...

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小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

以下是根据NIH老年病研究所提供的英文的R1胚胎干细胞培养protocol整理而成。根据经验作部分修改。 1、一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被&n ...

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凝集吸收实验

原理: 肠道杆菌中的许多细菌都有部分相同的抗原结构。因之一种细菌可与另一种细菌相应的抗血清发生交叉凝集反应。用一种过量的细菌抗原与发生交叉凝集反应的抗血清相结合。可将其共同抗体吸去,剩下抗体只能与特异性抗原起反应,这种试验即称凝集吸收试验。 利用凝集吸收试验可制备单价因子血清,以进行细菌抗原结构的分析及鉴定菌型。 材料: 1.免疫血清:1:10稀释伤寒杆菌免疫血清。 2.菌液:肠炎杆菌菌液 ...

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可调式移液器的标准操作程序

一.目的 规范仪器设备的操作程序,保证加样器的正常状态。 二.适用范围 本实验室加样器的操作。 三.操作人员 本实验室实验人员。 四.操作步骤 1.设定容量值:转动加样器的调节旋钮,反时针方向转动旋钮,可提高设定移液量。顺时针方向转动旋钮,可降低设定移液量。在调整设定移液量的旋钮时,不要用力过猛,并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。 2.预洗:当装上一个新吸头时应预洗吸头,先吸入一次液体并 ...

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协同凝集实验

金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋白能与人及多种哺乳动物(猪、兔、羊、鼠等)血清中IgG类抗体的Fc段结合。IgG的Fe段与SpA结合后,两个Fab段暴露在葡萄球体表面,仍保持其抗体活性和特异性当其与特异性抗原相遇时,也出现特异凝集现象。在以凝集反应中,金黄色葡萄球菌菌体成了IgG抗体的载体称为协同凝集反应.本反应也可用于检测微量抗原. 材料: 1.抗原:可溶性伤寒杆菌O抗原 2.免疫血清:伤 ...

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座式酒精喷灯的使用和维修

1.用途 酒精喷灯是实验中常用的热源。主要用于需加强热的实验、玻璃加工等。 酒精喷灯按形状可分为座式喷灯和挂式喷灯两种。初中常用的是座式喷灯。下面介绍座式酒精喷灯的原理、结构、使用及维修。 2.工作原理 喷灯的火力,主要靠酒精与空气、蒸气混合后燃烧而获得高温火焰。 3.结构 座式酒精喷灯的外形结构如图所示,它主要由酒精入口、预热碗、预热管、燃烧管、调节杆、调整管等组成。预热管与燃烧管焊在一起,中间 ...

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酒精灯使用规则

拿酒精灯时,应使用双手,一手扶住瓶身,另一手托住瓶底。 酒精灯最好装八分满,太多容易外漏,太少容易使酒精灯瓶中充满酒精蒸气,而导致气爆。 点火前,要检查酒精瓶是否有裂痕,如果有要更换.并检查酒精是否外漏,如有须擦拭乾净。 点火时,不可用另一个酒精灯来点火。 加热时,一定要使用陶纤维网,不然烧杯易因受热不均而破裂。 加热时,不可用纸张等易燃物将酒精灯围住。 熄火时,不可用火吹,需用盖子斜45度盖上。 ...

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