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一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。 众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫 ...

Day -1 Pass ES cells at normal density on gelatinized plate to free the culture of contamination fibroblast cells. Day 1 Trypsinized the cells as for normal passaging until the colonies li ...

Day -1 Pass ES cells at normal density on gelatinized plate to free the culture of contamination fibroblast cells. Day 1 Trypsinized the cells as for normal passaging until the colonies li ...

Day -1 Pass ES cells at normal density on gelatinized plate to free the culture of contamination fibroblast cells. Day 1 Trypsinized the cells as for normal passaging until the colonies li ...

1. Treat 10 cm tissue culture plates with 0.1% gelatin for at least two hours before use. 2. Sacrifice the pregnant female mouse (day 13 or 14 p.c.) by cervical dislocation. Dissect out the uterine h ...

Three weeks prior to embryonic fibroblast isolation a PGK-neo male mouse is mated to a heterozygote female. 13.5 days to 14.5 days after the plug is observed sacrifice the pregnant female either by ce ...

首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。 电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。 注意事项： 电泳仪通电进入工作状态后，由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时 ...

试剂及材料： 1）PBS 2）0.8%正常熔点凝胶（PBS配制） 3）0.6％低熔点凝胶（PBS配制） 4）毛玻璃片 5）盖玻片 6）碱性裂解液（2.5mol/ ...

免疫电泳 一、操作步骤 1.取一块干净的玻璃板，用少量75%乙醇冲洗，晾干后置于水平台，将1%琼脂糖融化，56℃水浴中保温。 2.将琼脂糖铺于玻璃板上，厚度约为1㎜。凝固后，打孔。 3.在孔内加入抗原，其中一孔内加电泳指示剂。 4.将凝胶板放在电泳槽中进行电泳，确定电泳时间。 5.电泳后在凝胶板上沿电泳方向平行挖2㎜宽的长槽，加入抗血清。 二、实验结果 将凝胶板放入湿盒，室温放置12小时，可观察在 ...

血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题，价格不菲的血清中含有诸如生长因子，维生素，氨基酸等珍贵物质，而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此，在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行，多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子，氨基酸等成分带来的负面影响，在我们的技术热线中最常被提到的就是否该对血清进行热灭活，下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。

培养基DMED的配置。

一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位，尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性，对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值，其过程包括：样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分离后水解片断的转移(固定)、特异性DNA片断的分子杂交及放射自显影。(一)样品DNA内切酶水解 限制性内切酶(RE)可裂 ...

细胞原代和传代培养的步骤及注意事项。

实验原理 单向定量免疫电泳又称火箭电泳（rocket immunoelectrophoresis）。在琼脂内掺入适量的抗体，在电场作用下，定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体，形成抗原—抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动，遇到琼脂内沉淀的抗原—抗体复合物，抗原量的增加造成抗原过量，使复合物沉淀溶解，一同向正极移动而进入新的琼脂内与未结合的抗体结合，又形成 ...

一、原理 定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中，在电场作用下，引起抗原抗体的迁移和相互反应，当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰，由于电泳继续进行，样品孔不断有抗原移向抗原抗体复合物的沉淀峰，因抗原过剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗体复合物的沉淀峰。如此反复向前，直到再无游离抗原而反应终止，形成上行火箭状的沉淀峰，其沉淀峰高度和抗原的浓度成正比，与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较， ...

细胞培养常见问题及解答

①电泳RNA 所用器械如制胶的模具、梳子、电泳槽等用肥皂粉洗干净后用双蒸水冲洗二遍后在室温晾干备用。 ②用新的1XTBE 配制1. 2 %琼脂糖凝胶倒胶时溴化乙锭(E直接加入凝胶中。 ③制备好的琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经高压灭菌过的1XTBE 液面只能刚好同胶面平齐缓冲液不要淹过胶面。 ④点样时样品RNA 每10μl 加入2μl 上样缓冲液上样缓冲液是用DEPC 处理的水配制的5 ...

醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体，有以下优点： ①电泳后区带界限清晰； ②通电时间较短（二十分钟至一小时）； ③它 对各种蛋白质（包括血清白蛋白，溶菌酶及核糖核酸酶）都几乎完全不吸附，因此无 拖尾现象； ④对染料也没有吸附，因此不结合的染料能完全洗掉，无样品处几乎完全 无色。它的电渗作用虽高但很均一，不影响样品的分离效果，由于醋酸纤维素薄膜吸 水量较低，因此必 ...

HBC裸鼠移植模型的建立包括活检取材的HBC标本和细胞株，后者应用较广泛。本贴主要讨论后者，算是抛砖了！ 1、人乳腺癌细胞株的选择 目前人乳腺癌细胞建株的癌细胞较多，本人曾接触过细胞株总结如下 ER（+）：MCF-7（来源：乳腺腺癌）ZR-75-30（乳腺导管癌）T47D（乳腺导管癌）ZR-75（乳腺腺癌） ER（-）：MDA-MB-435s（乳腺导管癌）MDA-MB-435（乳腺导管癌）SK-B ...

卡槽的清洁 松开固定卡槽前方Holder的螺丝，用羊毛刷及ddH2O清洁卡槽，然后用干净的刷子将其擦干，如果可以的话，可以用异丙醇，甲醇或者乙醇代替水进行清洁，这样保存的时间较长。 压力电极的清洁 吸入端电极的清理非常重要，利用甲醇，异丙醇，或者乙醇清洁内部及其顶端。在电极内部小孔的顶部涂上一层薄薄的润滑油进行有效的防护。压力电极底部边缘的两个小孔需要用羊毛刷和水每个月进行清洁。 毛细管卡槽的清洁 ...