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PCR技术（多聚酶链式反应）是现代分子生物学的一个巨大突破，它能在体外迅速、大量、灵敏地扩增基因片段。可是，经PCR技术扩增的大量相关基因片段如何能有效拼接，却是一个很值行探讨的问题。传统的方法是引入限制性内切酶位点，这不但操作繁杂，而有时为了构建限性位点还会影响解读三联密码的正确性。本介绍两种基因 拼接的新方法，即SOE和SDL法，就能巧妙地解决这个问题。 SOE法 1989年，Horton等人 ...

采集骨髓一般选择胸骨、肋骨、髁骨、胫骨和股骨等造血功能活跃的骨组织。猴、犬、羊等大动物的骨髓的采集用活体穿刺取骨髓的方法；大、小鼠等小动物骨头小难穿刺，只能剖杀后采胸骨、股骨的骨髓。 （一）猴、犬、羊等的骨髓采集法 1. 骨髓穿刺点定位 （1）胸骨：穿刺部位在胸骨中线，胸骨体与胸骨柄连接处，或选胸骨上1/3部。　　（2）胫骨：穿刺部位在胫骨内侧，胫骨上端的下方1厘米处。　　（3）肋骨：穿刺部位在第 ...

Procedure 1. Set up the following PCR tube: 5 μl of 10X Taq Buffer 5 μl of 25 mM MgCl2 2 μl of 10 mM dNTPs 10 to 100 ng of template DNA 25 pmol of specific primer 1 25 pmol of specific ...

Important parameters in the PCR: 1.Template DNA quantity (complexity determines ng) and quality (average length) While people typically measure DNA quantity in ng the relevant unit is actually moles i ...

荧光染料 荧光基团通常各自拥有单一的光吸收峰。在光的刺激下，荧光基团吸收光的能量后通常以三种方式释放出能量： 一、光能 许多荧光基团吸收光能后仍旧以光能形式释放能量，并且发射光的峰值大于吸收峰。比如荧光染料Fam的光吸收峰为490nm，而发射峰为530nm。 二、热能 某些荧光基团吸收光能后，能量转换为热量扩散到环境中，如Dabcyl。 三、转移给临近的分子 当临近的分子满足发生能量转移的要求时， ...

1、打开电源、稳压器、打印机、工作站、主机。2、工作站选择MS-DOS方式下操作，进入AFS系统。程序自检，全部出现PASS，同时听到“咔嗒”响声。3、按正确方向插上A、B道灯，用调光器调整光路，打开自动进样系统。4、按键，选定负高压，加热温度、炉高、A、B灯电流、载气流速、屏蔽气流速，按点火，预热30分钟。 5、按键，输入A、B道标准曲线点的浓度（由低到高），输入A、B道 ...

猴子的脑脊液采集 主要是穿刺采集，可以多点采集，但是要保证穿刺进针的方向和力度，否则的话很容易损伤脊髓，抽出浑浊的脑脊液或者带血的脑脊液。通常用2ml的注射器（连针头）在枕大池的凹陷处顺着颈椎的中缝垂直进针1~3cm，边回抽边进针，一旦有脑脊液流出就停止进针，根据需求量确定采集量。也可在腰椎膨大处穿刺采集，方法与上述相似，但是一般比较难采集的到，操作比枕大池要求高的多，建议采用枕大池穿刺采集，快捷 ...

仪器应在防尘洁净环境中使用，计算机暂时不用应在Special对话框中选择Sleep栏，休眠保护屏幕，酶标仪暂时不测样品，按Drawer键收回酶标板载框，仪器使用完毕后，应盖上防尘布。 1、接通接线板电源，开启酶标仪spectra MAX250（仪器背面）及计算机开关。 2、 待计算机自检后，点菜单上OK键进入，soft MAX软件。根据所处理样品的类别（活性，EGF、TNF、bFGF、IFN、G- ...

酶标仪的使用很简单，如果你使用的酶标仪别人已经用过一段时间了，基本无需进行特别设定，你所做的就是设定你所需要的检测波长（必要的话，还可以设参考波长）、空白孔，我们使用的也是bio-tek ELx800 （说实话，不怎么样），详细说明如下： 1、先从试剂说明书上获得以下信息： （1）使用什么波长 （2） 如何判断结果。 如：样本OD值Sod ≥ 阴性对照值Xod × 2 ...

在使用紫外可见分光光度计时，我们必须要注意一些使用后的维护，保养，和一些基本使用注意事项，才能达到更好的使用效果。 1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。 2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾 ...

一、 分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 1、波长准确度 分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。 2、 ...

PCR技术简史 一、PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 二、PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具 ...

1、试样空白： 显色剂没有颜色而试液有颜色，或者说在测量波长处，显色剂无吸收，试液有吸收时，应采用不加显色剂的试液作参比溶液，称为试样空白。 2、溶剂空白： 当试液、显色剂及所作用的其他试剂在测定波长处都无吸收时，可采用纯溶剂（如蒸馏水）做参比溶液，称为溶剂空白。 3、试剂空白： 若显色剂有颜色，并且在测量波长处有吸收，但试液在测量条件下没有吸收，在这种情况下，可用不含试液而显色剂和其他试剂都相 ...

常见无机阴离子的紫外线吸收波长 阴离子 波长（nm） 溴酸盐 200 溴化物 200 铬酸 ...

1、配制60mg/L的重铬酸钾溶液 在天平上称取已干燥的重铬酸钾60mg，准确至+-0.1mg。放在烧杯中，用适量蒸馏水溶解，并加入1ml（0.1mol/L）的高氯酸。然后转移到1000ml的容量瓶中，在蒸馏水稀释至刻度。 2、浓度为60mg/L的重铬酸钾溶液在各温度下的投射比（光谱宽度为2nm）波长　 235 350（nm）温度(℃) 10 18.0 22.615 18.0 22.7 ...

介绍了两种细菌计数的简便方法

　1996年，美国盐湖域的阿鲁普实验室遇到一个问题。该实验室从事帕帕尼科拉乌涂片的筛分工作以便找出宫颈癌症兆。当涂片上有少量异常细胞存在而又未被探测出来时，他们会错误地把它诊断为阴性。　　为了降低这种假阴性率，有关管理机构早就规定采用标准载被片两次筛分法。阿鲁普实验室采用临床信息把载波片分成高危和低危两类，然后对所有的高危阴性涂片和其余lo％的标本进行再筛分。活组织检查的阳性结果也导致他们再一次作 ...

ABER 能实时在线检测发酵罐内活细胞的浓度，密度，干重，生物量体积，电容大小，导电率大小；而不受细胞碎片，细胞团块，死细胞，发酵液泡沫，微载体颗粒等影响。

一、紫外分光光度计基本工作原理： 紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。 二、紫外分光光度计 ...

1.白细胞五分类2.流式细胞检测3.无须前处理即可进行全自动网织红细胞测定。具备网织红细胞专用仪器所具备的特殊处理能力，实现高效，高精度分析。