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A hemacytometer (also spelled hemocytometer) is an etched glass chamber with raised sides that will hold a quartz coverslip exactly 0.1 mm above the chamber floor. The counting chamber is etched in a ...

80年代的技术很经典，但那时分子生物学不够发达，现在方法有无进步呢?如何利用现在的技术来鉴定全新的病毒呢?有此想法很久了，可一直未搞清楚。这也跟如何发现一个新基因的道理是相通的。这是真正创新的基础。 我先来最简单的，1、采集各种病料，用各种细胞、宿主盲传，分离病毒，期望看到细胞病变。如果连细胞病变都没有，没折了？有别的办法证明有病毒吗？。2、纯化病毒，做电镜观察，与已有病毒形态、大小相似好办，要是 ...

随着生命科学技术的发展，动物实验已成为医学实验研究的基本方法。根据实验研究目的、实验动物的种类及药物剂型、剂量的不同，要求对实验动物实施不同的给药方法。尤其对于药物的毒理、药效的研究和药物剂量的确定，经口灌胃给药方法是一种重要的途径。在国内文献上却很少见到具体的描述。在此，作者将在实践中摸索出的一套实用于小鼠、大鼠、豚鼠、家兔经口灌胃给药的方法介绍如下。 一灌胃器具制作 1.1小鼠、大鼠、豚鼠灌胃 ...

We use two different kinds of media. Most cells are grown in DMEM. A few lymphoid cell lines are grown in RPMI. Cells grown in DMEM must be grown in a 10% CO2 atmosphere. As a result most of our incub ...

1. embryos are dissected from timed-pregnant mice from 11.5 d.p.c. to 13.5 d.p.c. 2. metanephroi and associated ureteric buds are microdissected and placed in holding medium (L15 medium supplemented ...

聚合酶链反应(polymerase chain reaction PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/ml，取0.1ml即为109拷贝，而1mg人基因组DNA才含1.4´106拷贝的单拷贝基因片 ...

复制动物肿瘤的方法很多，如将实验动物用放射线照射或静脉、局部注射放射性同位素；使用各种化学致癌剂（烷化剂、多环芳香烃类、芳香胺类、氨基偶氮染料、亚硝胺类）；使用植物毒素（如苏铁素、黄樟素等）；使用金属（如铬、镍、砷、镉等）；使用RNA和DNA肿瘤病毒；使用多种致癌性霉菌毒素（其中致癌作用最强者为黄曲霉素）等，均可诱发成各种肿瘤。 诱发性肿瘤模型其数量在诱发性动物模型中占首位。一般是利用致癌物质通 ...

embryos are dissected from timed-pregnant mice from 10.5-11.5 d.p.c. limb buds are microdissected and placed in holding medium (L15 medium supplemented with 1 x MITO+ serum extender) (all me ...

脑肿瘤目前仍是严重威胁人类健康和生命的疾病，而肿瘤实验动物模型的建立为研究其发病机制、生物学特性和检测各种治疗方法提供了一种高模拟性工具。自上世纪以来，先后建立了化学物质诱发脑肿瘤模型、病毒诱发模型、同种以及异种移植模型，随着现代分子生物学技术的发展，转基因动物模型又将成为人们研究的热点。 1、早期脑肿瘤动物模型及其局限性 1．1 自发性脑肿瘤动物模型 脑肿瘤在哺乳动物中的发病率不一，有报道狗为 ...

大鼠心肌梗死模型制作图解 （一）制作前准备 1、器械：动物呼吸机，开胸制作心梗模型，维持呼吸至关重要。虽然据说某些牛人可以不用呼吸机，但是我想这是经验积累的结果，开始时必然要用；况且需要看此说明的人应该没有牛到这个程度。当然，如果你经费异常充足，不在乎死亡成千上万的大鼠也可以。显微器械，最主要的是针持，大鼠胸腔、心脏均很小，常规器械无法进入胸腔缝扎。其他手术器械以眼科器械为主。 2、动物：应选择成 ...

Isolation of Lung Bud Endoderm What you need: E11-12 mouse embryos DMEM with 5% fetal bovine serum petri dishes for dissections and washes Tyrode-Ringer's solution pH 7.6-7.7 (recipe below) pancr ...

开始之前：其实非常简单，不需要你下载任何软件，但是你得有一台电脑能上网。当然，最重要的是，你要很清楚用于做引物的模板序列，至于怎么找模板序列，不再本贴的讨论范围。另外，要先对PCR目的序列的长度有个大致估计，好了，马上开始吧： 第一步：找到Primer3的站点。你不用记住这个站点，但是要记住“Primer3”这个词，然后打开GOOGLE首页，输入Primer3，跳出来的第一 ...

结合primer5和Oligo设计引物，步骤及心得

PCR引物设计的11条黄金法则 一、引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。 二、引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致 ...

问：我准备做病毒空斑实验，不知到怎样配置甲基纤维素覆盖培养液，敬请各位指教 答：1、我是这么做的： 24孔板VERO，HSV1 1）24孔板预板 2）24h后，弃培养液，用hanks液洗1次 3）接种病毒液0.1ml/ ...

PCR的问题，无疑是绝大多数学生物的人都关心的问题。今天我们把相关内容整理出来，与大家共同讨论，希望对大家能有所帮助。 引物设计 所谓“工欲善其事，必先利其器”，这年头手工设计引物的人似乎不多，还是用软件方便些，防止你一不小心看走眼，丢一个碱基，同时计算起来也方便。设计软件有很多，既可以在线设计（如Primer3 http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bi ...

一、实验动物(LaboratoryAnimal)基本概念及分类方法 (一)实验动物的定义：遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制，经科学方法人工培育用于科学实验的动物。 (二)实验动物的分类方法 1、按遗传学控制分类 近交系(1nbredStrain) (1)定义：杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖，各条染色体上的基因趋于纯合，品系内个体差异趋于零。 (2)近交动物 ...

问：现在我在做HSV－2的培养。接种的细胞是Hep－2细胞，对HSV-2是敏感的。曾经复制过一次，3天后出现典型的CPE，效果很好。但是这次不知道怎么回事，4天了还是没有出现CPE，而且培养基都快变黄了。pH值对病毒的吸附、复制影响大吗？我该怎么办呢？盲传是怎么回事？ 答：是不是两批接毒量不一样呀？如果毒量小的话，可能出现的晚，但也会出现的，同时与细胞的培养情况与有关的。盲传就是在不知是否有病毒 ...

自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来，PCR 技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR 技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR 引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带很弱，等等。 现在PCR 引物设计大都通过计算机软件进行。可以直接提交模板序列到特定网页，得到设计好的引物，也可以在本 ...

PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及活性 ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 一、模板 1、模板中含有杂蛋白质 2、模板中含有Taq酶抑制剂 3、模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白 4、在提取制备模板时 ...