全部

方法一 A液：1M，MnCl2： B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用无菌水配，配后不需灭菌； C液 称取CaCl2 0.10g，KCl 1.18g，全部转入细口试剂瓶，然后加入46ml三蒸水，轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎，然后放入灭菌锅121℃高压灭菌备用。 取1管B液（0.6ml），全部加入C液(46ml)中，混匀后，再用1ml移液器加入3.3m ...

1 .核蛋白的提取 ①用 细 胞 刮子刮取RAW264.7 细胞与VSMC ，移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS 洗两遍，于4 ℃ 5000g 离心3min ，沉淀细胞。③加5 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 洗细胞一次，于4 ℃ 5000g 离心3 min 沉淀细胞. ④加3 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 悬浮细胞，冰上放置30min 、剧烈振荡10 次，4 ℃ 5000g 离心15min ...

习惯上，人们用克隆 表示由同一物种具有相同基因型的两个或多个个体组成的群体。所以，从同一受精卵分裂而来的单卵双生子（monozygotic twins）便属于同一克隆 。细胞学上，克隆 是指由同一个祖细胞（progenitor cell）分裂而来的具有同一遗传背景的子细胞群体。分子生物学上，把将外源DNA 插入具有自主复制能力的载体DNA 中，使之得以自主复制和永久保存的过程叫做分子。 基因定位克 ...

生物大分子主要指核酸(DNA和RNA)和蛋白质，通过从分子水平上完成DNA RNA或蛋白质检测，从而对疾病作出诊断的方法称为分子诊断，目前常用的方法有基因诊断和肿瘤标志物检测两种。 基因诊断 基因诊断是用分子生物学的理论和技术，通过直接探查基因的存在状态或缺陷，从基因结构、定位、复制、转录或翻译水平分析基因的功能，从而对人体状态与疾病做出诊断的方法。 人体基因组的类型早在受精卵开始时就已形成，因 ...

掌握双脱氧链终止法测定DNA序列的原理与方法 DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3’-OH末端上进行的。由于2’，3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3’-位脱氧而失去游离-OH，当它参入到DNA链后，3’-OH末端消失，使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理，将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体，并用合成的寡聚核苷酸引物 ...

Phenol (removes protein) 1.add equal volume of Phenol (= tris-saturated Phenol-Chloroform-Isoamyethanol) 2.vortex 3.spin 2 minutes at 12000 rpm 4℃ 4.transfer supernatant to a fresh tube (avoid aspi ...

Analys of Genomic DNA by Southern Hybridization (Southern Blot) Outline: Localization of particular sequences within genomic DNA is usually accomplished by the transfer techniques described by South ...

This protocol is generalized and not to be considered optimal for all strains conditions and applications. Some aspects of this protocol may have to be modified significantly to suit your partic ...

Preparation of Transformation Competent DNA Dilute an overnight bacterial culture 1:20 in L broth. (For E. coli strain JA221 at A ) Using a serological pipet resuspend the bacterial pellet gently in ...

碱法大量提取DNA往往需要很长的时间.Promega公司的Wiazrd大量DNA纯化系统既简单又快速，只需要离心和真空抽干，这个系统可以从500ml培养液中在3小时以内获得1mg以上的高质量的质粒DNA(200-20000bp)。该系统不需要酚和氯仿抽提，纯化后的DNA溶于水或TE缓冲液中，不含任何盐份，可以直接用于DNA序列分析和酶切反应，也可以用于在核酸酶抑制剂（如RNasin）存在的条件下进 ...

核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子，原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子；有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子，RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子，不同类型的RNA分子可以具有不同的结构特点，如真核mRNA分子多数在3’端带有poly(A)结构，至于病毒的DNA、 ...

1、存放：超级感受态细胞必须从干冰运送包装箱取出直接放入–80℃冰箱的底部。一定不要用液氮来存感受态细胞。 1) 存放条件：超级感受态细胞对微小的温度改变也极度敏感，因此必须存放在–80℃冰箱的底部。即使是将细胞从一个冰箱转移到另一个冰箱也会导致转化效率的损失。采用BD Falcon 的14ml聚丙烯圆底试管：在转化实验中使用圆底14-ml BD Falcon聚丙烯试管（货 ...

1、仪器一定要有良好的使用环境 等离子体光谱与其它大型精密仪器一样，需要在一定的环境下运行，失去这些条件，不仅仪器的使用效果不好，而且改变仪器的检测性能，甚至造成损坏，缩短寿命。根据光学仪器的特点，对环境温度和湿度有一定要求。如果温度变化太大，光学元件受温度变化的影响就会产生谱线漂移，造成测定数据不稳定，一般室温要求维持在70～75摄氏度间的一个固定温度，温度变化应小于±1摄氏度。而 ...

毛细管电泳(capillary electrophoresis，CE)是 80 年代初发展起来的一种基于待分离物组份间淌度和分配行为差异而实现分离的电泳新技术。具有快速、高效、分辨率高、重复性好、易于自动化等优点。质谱分析技术(MS)是通过对样品离子的质量和强度的测定进行定量和结构分析的一种分析方法。具有分析灵敏度高、速度快等优点。这两种技术的联用 (CE/ MS)综合二者优点成为分析生物大分子物 ...

手持式折射仪因其具有：携带方便、测量精度高、价格低廉、操作维护简便、体积小重量轻等优点。被广泛地用于工农业生产和科学研究各个行业和部门。但它同时又是精密的光学仪器，因此正确的操作使用和维护是保证获得精确的测量结果的可靠保证，同时又可大大延长手持式折射仪的使用寿命。下面介绍一点手持式折射仪的使用和操作步骤以及维护知识供大家参考和交流。 第一步：打开盖板，滴入2～3滴蒸馏水或标准溶液在棱镜表面上，合上 ...

仪器用途 阿贝折射仪是能测定透明、半透明液体或固体的折射率nD和平均色散nF－nC的仪器（其中以测透明液体为主），如仪器上接恒温器，则可测定温度为0℃～70℃内的折射率nD。 折射率和平均色散是物质的重要光学常数之一，能借以了解物质的光学性能、纯度、及色散大小等。本仪器能测出蔗糖溶液的质量分数（锤度Brix）（0～95%，相当于折射率为1.333～1.531）。故此仪器使用范围甚广，是石油工业、油 ...

1. 仪器应放在干燥，空气流通和温度适宜的地方，以免仪器的光学零件受潮发霉。 2. 仪器使用前后及更换样品时，必须先清洗揩净折射棱镜系统的工作表面。 3. 被测试样品不准有固体杂抟，测试固体样品时应防止折射棱镜的工作表面拉毛或产生压痕，本仪器严禁测试腐蚀性较强的样品。 4. 仪器应避免强烈振动或撞击，防止光学零件震碎、松动而影响精度。 5. 如聚光照明系统中灯泡损坏，可将聚光镜筒沿轴取下，换上新灯 ...

此仪器可用来对透明或半透明固体和液体物质的折射率，平均色散和部分色散进行快速精确地测定（即能测定706.5nm、656.3nm、589.3nm、546.1nm、486.1nm、435.8nm、434.1nm和404.7nm等八种常用波长的折射率）。 当光学玻璃牌号已知可以很快地测得其折射率，这些数据对光学仪器的设计和制造是极为有用的。 一般仪器在测量试样折射率时需要有一定大小，而此仪器利用精确配制 ...

一、结构简图 二、操作步骤 A. 置零（建议不要省略该步骤） 1．彻底清洁棱镜窗；将蒸馏水滴入棱镜窗。 （DRB28-65和DRB28-65nD的标准液：30%的糖溶液或折射率为1.3812的溶液；DRB58-92和DRB58-92nD的标准液：60%的糖溶液或折射率为1.4419的溶液；其它型号的标准液为蒸馏水） 2. 按住“CAL”按钮5秒钟，直到液晶显示器上开始闪烁& ...

RHL35-80折射仪专门用来测量隐形眼镜镜片的含水量。 一、结构简图 二、使用步骤： 第一步打开盖板，滴入2至3滴饱和盐水在棱镜表面上，合上盖板，让饱和盐水满整棱镜表面，不能留有气泡和空隙，在进行第二步之前，让液体留在盖板上约30秒(这样可以使样品与折射仪周围的温度一致)。 第二步将折射仪置于光源下通过目镜，您将会看到一标有刻度的圆形区域(可通过调节焦筒使度线更清晰)， ...