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1. Run gel ...

Dige ...

Pat Brown' ...

1) Digest DNA with two restriction enzymes such that one end is ExoIII susceptible (blunt or 5' overhang) and the other is ExoIII resistant (5' recessed). The ExoIII susceptible end should be such tha ...

Analysis of Genomic DNA by Southern Hybridization Select several independent BAC clones containing the same inserts that will be used as a probe. Confirm the BAC clone integrity using by comparing Hi ...

实验步骤： 1．取 10μl DNA 于 0.8% 凝胶检测； 2．将 DNA 调节浓度至 300-400 ng/μl； 3．仔细阅读将所用的任何一种酶产品说明书，熟悉反应条件及酶切的贮存浓度（ 10U-50U/μl ）厂家配套试剂； 4．计算据反应条件所需要的各种试剂准确用量：（ 0.5 ml tube 中） DNA(3-5μg)&nb ...

http://axon.med.harvard.edu/~cepko/protocol/mike/F1.html This protocol was designed to generate directionally end-labeled probes for DNaseI footprinting but it can be used for any application that re ...

Southern Hybridization Protocols Two protocols are given here. The first one is used for BAC library screening on filters although is also suitable for Transfer hybridizations. PREPARATION OF HYBRID ...

This protocol is for Mini (up to 20 µg) preparations of high-copy plasmid DNA from cultures of E. coli . Important notes before starting New users are strongly recommended to read Appendix A (pa ...

Dear ...

DNA的重组 DNA Recombination一、同源重组 发生在同源序列间的重组称为同源重组(homologous recombination)，又称基本重组。 是最基本的DNA重组方式，通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。 二、细菌的基因转移与重组（一）接合作用(conjugation)： 当细胞或细菌通 ...

Isolation of DNA from Mouse Tail Biopsies 1. Obtain tail biopsies from 2 to 3 week old mice: Hold mouse firmly at base of tail with one hand with the other cut off 0.5 to 1.0 cm of the tail tip with ...

Preparation of Frozen Competent E. coli 1. For TG1 or DH5a cells start with a colony from a minimal plate to ensure the presence of the F ' episome. Grow in 5 mls LB o/n (see note on medium below). In ...

Hidoes any ...

一、电转化感受态细胞的制备 1.用枪头挑取单克隆菌落，投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。（同时做培养基和枪头的空白对照） 2.37℃，220rpm，培养14-16个小时。 3.第二天，以1：100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中，37度，220rpm，振摇2-3小时，每半小时测一次OD，当OD值达到0.3-0.4时，停止培养。 4.将菌液在冰上预冷30分钟 ...

一 、分子图谱的构建 分子图谱为植物基因，QTL的鉴别和定位、种质资源鉴定、物种进化等研究提供了有利的研究手段。主要包括以下步骤：根据遗传材料之间的多态性确定亲本组合，建立作图群体；群体中不同植株或品系的标记基因型分析；标记间的连锁关系。 二、品种、品系鉴定和杂交种纯度分析 指纹图谱是鉴别品种、品系的有利工具，具有快速、准确等优点。在市场经济的条件下，指纹图谱在检测良种质量（真伪、纯度），防止伪劣 ...

1．如何做酶切反应？ 该问题看似什么简单： DNA 中加上酶，然后保温一段时间就可以了。但是在实际操作过程中，我们不断听到：切不动，装不上。问题在什么地方？能系列生产限制性内切酶的公司国际上，就那么几个，位列前3 的是NEB Fermentas SibEnzyme。这些公司提供酶的品质一般都能得到保证。您可以怀疑酶的质量问题，但是更多的问题来源于模板是否合适酶切要求。下面几点对你的酶切是有帮助的 ...

人类基因 ...

一、原理 球状蛋白质一般都可以在低盐溶液或蒸馏水表面形成不溶解的变性薄膜，若浓度合适，则肽链伸展形成蛋白质单分子层。一般用碱性蛋白质包围带负电的核酸分子，当蛋白质展开时，核酸也随之展开，核酸的形态结构将保持一定的完整性。然后将核酸分子捞到支持膜上，经过负染色，就可以在电镜下观察。 二、目的 观察质粒DNA 在电镜下的形态，掌握质粒DNA 的电镜制样原理和方法。 三、材料、试剂和仪器 1、纯化的质粒 ...

准备： 1．灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶，离心瓶4-6个（250ml）。 2．试剂：YEP 1200ml（每瓶300ml 共4瓶） Kan 1;1000，Rif1:500。 1/2MS 2%蔗糖（灭菌115度20分钟），Silwet在-20℃贮存。 3．步骤： 共转化农杆菌：于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul：10ml接种。28℃，3000rpm摇过夜，约30小时，次日下午6点 ...