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高血压模型的建立可以用儿茶酚胺类或其它体液加压物质注射来形成，但是这类模型造成的高血压时间短，不适于长时间的研究。因此如果要进行长时间深入的研究则应复制慢性实验性高血压模型。除遗传性高血压动物模型较能模拟人类高血压病的自然过程外，其它各类慢性实验性高血压动物模型（如神经原型、肾型、内分泌型和饮食型等），大多要经过一定的手术、药物或其他附加因素处理，与人类高血压病的临床不完全一致，但是对于筛选有效降 ...

一个脑缺血动物模型的成功建立，对于临床前心脑血管药理的研究具有重要意义。一个理想的脑缺血及再灌流动物模型应具备以下条件： （1）血管闭塞后能引起相应区域血流量改变。（2）病理改变接近人脑急性缺血性变化。（3）大脑缺血严重，但脑干活动尚能维持，有利于缺血再灌流的连续观察。（4）闭塞动脉的方法能进行重灌注。（5）重复性好。（6）可控制缺血的时间，制成轻重不等的缺血模型。 常用方法： 1.开颅法：多数选 ...

造模原理：利用外源性化学致癌因素引起细胞遗传特性异常，呈现出异常生长和高增值活性，形成癌症。常用的致癌物质有：DEN（乙亚硝基胺）、DBA（4-二甲基氨基偶氮苯、2AAF（2-乙酰氨基酸）、OAAT（亚胺基偶氮甲苯）和黄曲霉素等。 1、DEN诱导：取体重250g左右的封闭群大鼠，雌雄不限，喂养普通饲料，随意饮水，给与0.25%的DEN水溶液0.25~1mL灌胃或稀释10倍放在饮水瓶中自由饮水，剂量 ...

目的:用氯化锂—匹鲁卡品制备Wistar 大鼠癫痫模型探讨匹鲁卡品合适的用量及用法。方法: Wistar 大鼠腹腔注射氯化锂3 mmol / kg 24 h 后给予不同剂量的匹鲁卡品腹腔注射。结果:40 mg/ kg 组和30 mg/ kg 一次注入组的持续性癫痫大发作(SE) 出现率和死亡率均为100 % 慢性复发性癫痫(SRS) 模型成功率为0 %; 30 mg/kg 分3 次 ...

一、关于如何计算IC50 1、改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4) Xm:lg 最大剂量&nb ...

聚合酶链反应即PCR技术，因为其对基因或特定核酸序列在短时间内的极大的扩增效率，已在感染性疾病、肿瘤、遗传病、寄生虫病、法医学、动植物和考古等的诊断和研究中得到了广泛的应用，并在某些方面几乎是难以替代的。但是，像自然界的任何事物一样，PCR也有其局限性，稍不注意，就很容易造成错误的判断。 感染性疾病由病原微生物引起，主要有病毒、细菌、衣原体、支原体和螺旋体等，在PCR出现以前，这些病原体通常采用培 ...

1、基本要素和扩增原理 基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。待拷贝的 DNA 称为模板，它可以是双链 DNA 也可是单链DNA，最后扩增得到的产物是双链状态的。引物是 DNA 复制的先锋，就象结晶过程中的晶核，引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。DNA 聚合酶是 DNA 复制的动力，在 dNTP 等底物存在时在引物的引导下沿着模板 DNA 合成互补的 DNA ...

PCR过程中如果没有找到最佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物，有时甚至没有目的产物；而在另一个极端，又可能没有扩增到任何产物。这时改变已知对引物－模板的忠实性和引物延伸有影响的诸多参数中的一两个，将会达到优化扩增的目的。其中最主要的优化变量包括 Mg2＋浓度、缓冲液pH值和循环条件，在循环条件中又以退火温度最为重要。 1、降落PCR 降落PCR代表了一种完全不同的PCR优化方法，它 ...

PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带　 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多 ...

PCR技术的发明 1983 Kary Mullis 发明 1985 开始有文章发表 1993 获诺贝尔奖 广泛用于分子生物学研究领域 变性--退火--延伸三个步骤 1、模板DNA的变性：93℃-95℃左右 2、模板DNA与引物的退火(复性)：Ta=Tm-3~5 ℃ 3、引物的延伸：Taq DNA聚合酶之5’-3’DNA聚合酶活 ...

问题1：无扩增产物 现象：正对照有条带，而样品则无 原因: 1、模板:含有抑制物，含量低 2、Buffer对样品不合适 3、引物设计不当或者发生降解 4、反应条件：退火温度太高，延伸时间太短 对策: 1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2、更换Buffer或调整浓度 3、重新设计引物（避免链间二聚体和链内二级结构）或者换一管新引物 4、降低退火温度、延长延伸时间 问题2：非特 ...

Troubleshooting for PCR and multiplex PCR Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles. COMPONENTVOLUMEFINA ...

目前现代肿瘤基础生命科学研究与现代肿瘤治疗医学科学研究，应用的最广最有实用价值的可移植实验动物肿瘤模型、与人类肿瘤的可移植实验动物（裸鼠）肿瘤模型，普遍存在着肿瘤生长速度快、增殖比高、体积倍增时间短、肿瘤生命性质简单，与人类肿瘤具有明显不同；特别是与人类的致死性实体恶性肿瘤生命性质、与生长发生机制差异更大。那些肿瘤生命性质简单的可移植实验动物肿瘤模型、与人类肿瘤的可移植实验动物（裸鼠）肿瘤模型，仅 ...

复制动物肿瘤的方法很多，如将实验动物用放射线照射或静脉、局部注射放射性同位素；使用各种化学致癌剂（烷化剂、多环芳香烃类、芳香胺类、氨基偶氮染料、亚硝胺类）；使用植物毒素（如苏铁素、黄樟素等）；使用金属（如铬、镍、砷、镉等）；使用RNA和DNA肿瘤病毒；使用多种致癌性霉菌毒素（其中致癌作用最强者为黄曲霉素）等，均可诱发成各种肿瘤。 诱发性肿瘤模型其数量在诱发性动物模型中占首位。一般是利用致癌物质通过 ...

一、条件性打靶 条件性基因打靶(conditional gene targeting)可定义为将某个基因的修饰限制于小鼠某些特定类型的细胞或发育的某一特定阶段的一种特殊的基因打靶方法。它实际上是在常规的基因打靶的基础上，利用重组酶介导的位点特异性重组技术，在对小鼠基因修饰的时空范围上设置一个可调控的“按钮”，从而使对小鼠基因组的修饰的范围和时间处于一种可控状态。利用Cre／ ...

1、豚鼠属哺乳纲，啮齿目，豚鼠科。又名天竺鼠、海猪、荷兰猪。 2、喜群居，头大，颈短、耳圆、无尾，全身被毛，四肢较短，前肢有四趾，后肢有三趾，有尖锐短瓜，有抓人，不喜于攀登和跳跃，故可放无盖小水泥池中进行饲养。习性温顺，胆小易惊，有时发出吱吱的尖叫声，喜干燥清洁的生活环境。 3、嗅觉、听觉较发达，对各种刺激均有极高的反应，如对音响、嗅味和气温突变等均极敏感，故在空气混浊和寒冷环境中易发生肺炎，并引 ...

（一）养荷兰猪应该有一套科学的防疫程序，做到预防为主，综合防治： 1、搞好卫生，严格消毒 相信大家对勤换垫材（木屑）、及时清理粪便这些工作都做得不错吧，但看不见的病原微生物才是荷兰猪真正的大敌！所以，家里除了准备必要的兽药的同时，消毒药物更是不可或缺的，从药店可以买到“高锰酸钾”或“新洁尔灭”按说明书稀释成需要浓度，每周至少消毒两次，这两种药物应该交 ...

1、近交品系豚鼠目前世界上有12个。由于豚鼠妊娠期较长为68（62～72）天，一胎生得少，一般2～3只，培育一个近交品系需要20～30年，所以近交品系较少。用于医学科研的近交品系纯系2号和纯系13号。 （1）近交系2：此品系1906年引自美国农业部，在1951年11代时，Wright采用兄妹交配繁殖到1933年的33代后，改为随机交配，一直到1940年。1940年Heston继续采用兄弟交配。19 ...

荷兰猪：别名彩豚、海猪。又叫荷兰猪、豚鼠、荷兰鼠、彩豚、天竺鼠，全黑的又叫黑豚，它是珍贵的皮肉兼用的草食动物。英文名：guinea pig 。 荷兰猪成年体重1～1.5kg，体长20～30cm，皮毛紧披，富有光泽，用它的皮毛经加工可制作上等的裘皮服装、披肩、手套，皮帽。 原产地是南美洲秘鲁一带，天然食物是青草，植物的根以及果实种子，是绝对的素食主义者。野生的荷兰猪身材苗条运动灵活，长期被人类当作宠 ...

PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有模板核酸的制备，引物的质量与特异性，酶的质量及，PCR循环条件。 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。 ...