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金黄色葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A，SPA）可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。 1、试剂 （1）5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配制； （2）牛血清白蛋白（BSA）缓冲液：用0.05mol/L pH 7.4PBS配制。含0.01mol ...

特异性CIC分为单特异性CIC和双特异性CIC两类。前者适用于检测已知抗原及其相应抗体组成的CIC。双特异性CIC是指对组成CIC的抗原、抗体和补体中某两种成分组合明确的CIC，常采用的检测方法为ELISA和RIA技术，需要两种特异性各异的抗体。因此，检测要求条件较高，但能较全面地反映CIC的病理意义。 在检测双特异性CIC时，由于要求有两种特异性抗体，每种抗体均可用作包被或检测抗体，故具体到检测 ...

其实是一种段片段焦磷酸测序技术，在测序引物的引导下，完成段片段（含snp）的测序，从而实现基因分型。缺点：不能检测长片段，对于重复序列没有办法。 原理简介 1.测序引物与单链，PCR扩增的DNA模板相结合。然后将其与DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶，以及底物APS和荧光素一起孵育。 2.四种dNTP之一被加入反应体系，如与模扳配对，此dNTP与引物的末端形成共价键，dNT ...

SNP 是指基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性在群体中的发生频率不小于1 %。包括单个碱基的转换、颠换、插入和缺失等。所谓转换是指同型碱基之间的转换如嘌呤与嘌呤( G2A) 、嘧啶与嘧啶( T2C) 间的替换;所谓颠换是指发生在嘌呤与嘧啶(A2T、A2C、C2G、G2T) 之间的替换。依据排列组合原理SNP 一共可以有6种替换情况即A/ G、A/ T、A/ C、C/ G、C/ ...

我最近在做人滋养细胞原代培养，先是用的胰酶消化法，percoll和不用percoll都做了，接种到培养瓶（25ml）里的细胞的覆盖率不到30%，可怜，长了n长时间，也就那么几个细胞。老板建议用组织块，不知道会怎样。 胰酶消化法： 1.标本少。由于我们取材都是6~8周的绒毛，个人感觉很少，而且那个绒毛连在妊娠囊上，很难的分开，我一般都是用镊子嵌夹下来的，不知道文献中的“取蜕膜和羊膜之间的 ...

随着生命科学迅猛的发展，与之相适应的实验技术手段越来越复杂和专业化，对于科研人员实验技能要求也越来越高。由于生物学实验高度的复杂性、使得一个科研人员往往只能精通某一方向的实验。因此许多生物技术公司应孕而生，他们提供了许多专业的服务，其中最常规的技术服务包括核酸、蛋白测序、引物合成，SNP分型动物培养及转基因动物实验。在国外，生命科学的研究已经初步形成了一个大型技术平台共享的研究形式，科 ...

很多细胞实验都要检测荧光，为方便大家选择合适的方法，在此简单说一下各种荧光检测方法的特点。不足的地方，欢迎大家补充： 1、流式，优点是速度快，非常适合做大数量统计，且样品只被检测一次，完全不用担心荧光淬灭的问题。缺点是只能检测荧光的有无、强度大小，无法提供空间定位信息，无法做荧光定位变化的实验；由于样品只被检测一次，因此无法对同一个样品进行连续观察。例如，做膜蛋白定位时会得到这么一个结果&mdas ...

从总RNA中分离mRNA 采用Promega公司的PolyATract® mRNA Isolation System III。使用该试剂盒，mRNA产量极低，因此下述方法是以Promega公司试剂盒操作手册为基础，并采用储昭晖硕士(作物遗传改良国家重点实验室植物分子生物学水稻分室)所建议的改进方法综合而成。 由使用者自备的材料 65℃水浴　　无菌的、无RNase的1.5ml塑料 ...

悬浮细胞一般几天离心一次，觉得好难养啊！求心得？ 丁香园网友goingba认为：你养的是什么细胞，原代吗？我觉得悬浮细胞最好养了，不用消化，关于几天离一次心，要看你的细胞生长状态了，我养过血液肿瘤细胞，增值比较快，我一般是第二天半量换液（加等量培养基后一分二），第三天若长得比较满，就离心换液。若你不想每天都去管它，你可以把细胞密度中的相对稀一点（不能太稀，太细了细胞不好好长），可以2-3天换一次 ...

寻找标记SNPs 的国际遗传变异图谱计划，即国际单倍型图谱计划(Haplotype Map Project)已于2002年10月正式启动，2003 年中国承担了“国际单倍型图谱计划”10% 的任务，这表明我国基因科学研究能力的提高和在国际生命科学领域学术地位的提升。该计划的启动将为人类致病基因的寻找提供一条捷径。在DNA 上位置比较接近的很多SNPs，会组成单倍型块并作为一 ...

1.实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一 ...

人类基因组中存在着广泛的多态性，最简单的多态形式是发生在基因组中的单个核苷酸的替代，即单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms SNPs）。SNP通常是一种二等位基因的（biallelic），即二态的遗传变异，SNP的数量大、分布广，在组成人类基因组的30亿个碱基中，平均每1000个就有一个SNP。SNP作为第三代遗传标记，在复杂疾病的基因定位、关联分析、个体 ...

最近，我把杂交瘤细胞复苏了，可是做了三次都死掉了。同期复苏的SP2/0却能活。1，我的细胞是在-76保存，放了半年，2，-76的冰箱温度有波动，经常打开门，3，细胞复苏后大量死亡，但是也有很少的比较圆的透亮的活细胞，4，细胞不贴壁，第二天就就死了，5，复苏的过程正常，37度速解冻。 请高手帮忙分析一下，或者遇到相同问题的朋友分析交流一下。 丁香园网友haha63认为：没按规定保存在液氮所致！细胞切 ...

家兔的生长发育与外界环境条件紧密相连。不同的环境条件对家兔的影响是不同的，而我国的自然条件，不论在气温、雨量、湿度还是饲料的品种、数量、品质都有着显著的地区性和季节性的特点。因此，四季养兔就应根据家兔的习性，生理特点和季节地区特点，酌情采取科学的饲养方法，才能确保家兔健康，促进养兔业的发展。 春季的饲养管理 我国南方春季多阴雨，湿度大，适于细菌繁殖，对养兔是最不利的季节，兔病多，死亡率在全年为最高 ...

冬季气温低、光照不足，青饲料匮乏，给家兔饲养带来不便。为此必须做好以防寒保暖为中心的饲养管理工作，其要点如下： （一）检修笼舍，防寒保暖 通常兔舍建筑应座北向南，入冬对养兔舍选行一次普遍检查，窗装玻璃或钉薄膜，门挂草（棉）帘，发现破绽，及时补修，防止冷风侵袭兔体。家兔最适宜的生长温度为10℃~25℃，据实验报道，在10℃舍温下，如有风速3m/秒的冷风吹过，其温度很快会下降至0℃。故冬季应控制室内气 ...

一、请问PCR的检验一定准确吗？ PCR检测艾滋病毒是利用截取病毒的ㄧ段RNA基因后，利用这段RNA进行复制（32次循环），得到大量相同的片段后进行检测。这个方法的最大好处是可以早期侦测是否感染，敏感性及特异性都非常的高。虽然这和每一个实验室的操作技术有关，但由于本所是采用全套全自动核酸萃取仪，及全自动核酸放大仪，也就是能将人为操作误差降到最低，是很准确的方法。 二、请问PCR的空窗期为多久？如果 ...

聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物 简要原理 　　聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）是一种无电荷的线性分子结构的多糖，为乙二醇的聚合物，有较强的脱水作用。其沉淀循环免疫复合物（circulating immune complex，CIC）的原理不太清楚，可能与CIC的分子量增大和构型的改变有关。利用3~4%的PEG可以选择性的将大分子CIC沉淀下来，将此沉淀定量溶解，用分光光度计 ...

（Rabbitoryctolagus cuniculus）属脊索动物门，脊椎动物亚门，哺乳纲，兔形目，兔科动物，穴兔属。 一、生物学特性 （一）一般特性 昼伏夜动，喜欢独居齿尖喜、磨牙有啃土扒土习惯。听觉、视觉灵敏胆小易惊。白天多处于假眠和休息状态。喜安静、清洁、干燥、凉爽的环境。耐寒不耐热，耐干不耐湿，有良好的卫生习惯。有夜间直接从肛门吃粪的食粪癖。草食性动物，喜食青粗饲料。 （二）解剖学特性 ...

高等植物在其生命活动过程中，由于基因的选择性表达，决定了高等植物生命活动的多样性和连续性。在植物的生长、发育、衰老和死亡过程中，都有不同的基因起作用。因此，研究基因的选择性表达，掌握其对植物生命活动的调控，克隆新基因，是分子生物学的重要课题。 1992年，Liang和Pardee［1］首次提出差异显示技术(DD-PCR)，并且利用这一技术克隆了几个基因。由于该技术具有快速、灵敏、简单和可分析低丰度 ...

1.主体结构 主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。 2.标准的三区分隔和气压调节 将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区， 同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩 ...