将RRBC加入正常人血清中,可使B因子活化,激活补体旁路途径致使BRBC溶解。将正常人新鲜血清加热使B因子丧失活性(简称RB),旁路途径不能激活,当加入RRBC时不发生溶血。此时再加入含有B因子的待测血清,旁路途径即被激活,RRBC发生溶血反应。根据溶血程度可测定待测血清中B因子的活性。 1、兔红细胞(rabbitredbloodcell,RRBC)悬液的制备 无菌采兔耳静脉或心脏血, ...
realtime PCR 在PCR体系中加有sybr green或者探针,普通的RT-PCR则没有。 realtime PCR上机后从电脑上直接读出结果,普通的RT-PCR需要跑胶、紫外线下观察结果或用凝胶成像系统分析。 realtime PCR一次测多种mRNA表达需要多色荧光,这就需要仪器支持多色荧光并且探针用不同荧光标记。普通的RT-PCR,可以采取双重PCR的方法同时检测2种mRNA表达。 ...
质膜(plasma membrane)包在细胞外面所以又称细胞膜。围绕各种细胞器的膜,称为细胞内膜。 质膜和内膜在起源、结构和化学组成的等方面具有相似性,故总称为生物膜(biomembrane)。生物膜是细胞进行生命活动的重要物质基础。 质膜表面寡糖链形成细胞外被( cell coat ) 或糖萼(glycocalyx)。 质膜下的表层溶胶中具有细胞骨架成分组成的网络结构,除对质膜有支持作用外,还 ...
多聚集链反应(polymerasechainreactionPCR)技术发明至今已近20年了,在这期间技术得到了不断的发展,近年来出现的实时荧光定量PCR(real-timequantitativePCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具,本文就此技术及其应用做一综述。 1 实时荧光定量PCR ...
PCR除了是一个诊断工具外,更重要的是它有广泛的运用。PCR本身可直接用来鉴定特定基因的存在与否,也可以用来侦测基因是否有异常 (Gene mutation deletion and rearrangement…)。例如,在医学上对遗传疾病或肿瘤癌症的诊断及预后的评估; 对细菌、病毒及霉菌感染的诊断。它也可成为一个生产线进而大量复制特定的基因进行基因密码的读取 (DNA sequen ...
所谓生物芯片(Biochip)即应用于生命科学和医学领域中作用类似于电子芯片的器件。它可以对生物分子进行快速并行处理,把生命科学中许多不连续的过程如样品制备、化学反应和结果检测等步骤移植到芯片上并使其连续化和微型化。其突出特点是信息量大,处理速度快。正是由于这些特点,使得生物芯片有着非常广阔的应用前景。它的应用范围涉及生命科学基础研究、疾病诊断和治疗、药物筛选和新药开发、食品卫生监督、司法鉴定、国 ...
1、在骨肿瘤发病机理研究中的应用 骨恶性肿瘤是多种癌基因多阶段多途径协同作用的结果,到目前为止,发现与骨恶性肿瘤密切相关的癌基因有K-ras、c-fos、proα-1、proα-2、c-sis、c-raf、 c-myc、met、mdm2,抗癌基因有Rb、P53、P16等。发现的癌基因已有100多个,抗癌基 因有8个,它们当中究竟还有哪些与骨恶性肿瘤发生发展有关,仍有待于进一 ...
骨肿瘤诊断需要解剖学、组织学和胚胎学等基础知识,对病变需认真观察,仔细分析,但更重要的是对临床资料及X线所见要特别重视。骨肿瘤形态变异较大,而临床X线观察较全面,病理镜检有一定局限性,而一些癌基因改变是与某一型骨肿瘤密切 相关,即为肿瘤特异性基因,因此在骨肿瘤诊断方面在坚持临床、X线及病理三结合 的诊断原则基础上,通过PCR技术对肿瘤特异性癌基因变化的检测,可以更好地辅助骨肿瘤的诊断,具有其它方法 ...
步骤一:接种 组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: ①在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。 ②在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌(无菌室照射20~50分钟,接种箱照 ...
细胞是一切生命活动的基本结构和功能单位。 1、细胞是由膜包围的原生质团,通过质膜与周围环境进行物质和信息交流; 2、是构成有机体的基本单位,具有自我复制的能力,是有机体生长发育的基础; 3、是代谢与功能的基本单位,具有完整的代谢和调节体系,不同的细胞执行不同的功能; 4、是遗传的基本单位,具有发育的全能性。 第一节真核细胞 一、基本结构 具有核膜,由膜围成的各种细胞器,如核膜、内质网、高尔基体、线 ...
癌症为基因突变造成的疾病,是由于细胞生长、分化及分裂繁殖等有关的基因产生病变所造成的。这些基因包括促进细胞分裂及繁殖的致癌基因,抑制细胞分类及繁殖或促进细胞分化的抑癌基因。当致癌基因过度活化或抑癌基因不活化而使细胞分类繁殖不受控制时,细胞就渐渐进入癌化的过程。因此癌细胞常包括有多个基因的突变,而不同的癌症又有不同的基因病变。如慢性骨髓性白血病会产生BCR-ABL的病变基因;又如以消化系肿瘤而言,大 ...
组织培养是一种利用人工培养基(液)使细胞在体外发育和繁殖的技术。除了能够为许多实验提供大量的动植物细胞材料之外,它也是一项克隆植物细胞和个体的实用技术。实际上,在日常生活中必不可少的蔬菜、花卉及粮食作物中,许多种类都是克隆植物,例如,脱病毒马铃薯和红薯、百合和兰花、水稻等等。 病毒是威胁园艺和蔬菜种植的主要问题之一。目前仍然没有特效防治药物。事实上,利用分生组织细胞克隆的方法,可以有效地防治病毒。 ...
real-timeimmuno-PCR1992年,Sano等人将免疫测定技术与PCR结合,创建了一种全新的极其敏感的抗原分子检测技术,即免疫-PCR(Immuno-PCR),随着这种技术的不断发展,2000年,Sim等使用荧光定量PCR代替普通PCR,发展了免疫定量PCR技术(real-timeimmuno-PCR)。该技术把抗原抗体反应的高特异性和聚合酶链反应的高敏感性有机结合起来, ...
头一次自己培养L929细胞,手忙脚乱的,把冷冻的细胞直接放进培养基里就结束了。过了60个小时,去显微镜下看,只能看到几个帖壁细胞。仔细想想做实验的步骤,又上网查查帖子,觉得可能是没有在第二天换新培养基的问题,导致冷冻液里的DMSO影响细胞贴壁。不知道培养皿里的细胞还有没有活下去的可能。总之第一次做实验结果不好也不应该轻易放弃。 把培养皿里的上清液转移到离心管里,离心,加入新的培养基重新放到培养箱里 ...
(广义)又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 (狭义)组培指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。植物组织培养基础理论 1、植物细胞全能性 植物细胞全能性 ...
目的 建立操作简便、成功率高、趋近真实、耗资低廉的急性血栓性肺栓塞(acute pulmonary embolism APE)动物模型。方法 首先,将兔麻醉,暴露并切开左侧颈静脉后,插入一5F导管。然后,经此导管注入2-3个自体栓子,栓子则会顺血液循环栓塞肺动脉,从而造成急性血栓性肺栓塞。待兔存活足够时间后进行尸解,并取出诸如:栓塞的和非栓塞的肺动脉、心脏、主动脉、肝脏和脂肪等器官和组织。结果 ...
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物 ...
性功能障碍模型分类: (1)去势大鼠模型 (2)大鼠交配试验 (3)小鼠交配试验 (4)重复应激性小鼠性行为低下动物模型 (5)氢化可的松肾阳虚证模型 (6)腺嘌呤肾阳虚证模型 (7)“劳倦过度,房室不节”致肾虚模型 (8)对幼年雄鼠性器官发育的影响 (9)果蝇性活力实验 观察指标:阴茎勃起、交配功能、器官重量、形态学观察与激素、生物活性因子及相关酶有关的实验指标等 附文献 ...
以宠物申请进口的猴类,大致可分为懒猴、松鼠猴、须猴3类。而黑猩猩等被称为类人猿的猴类,是华盛顿公约中的保护动物,一般人不可以当做宠物来饲养(在签定条约之前所进口饲养的除外)。 除类人猿之外,所有的猿猴的进口都受到管制,选购时务必向有输入许可证,或是国内繁殖证明书的商店购买。 根据媒体报道,经常有走私进口的情况发生,这些走私进来的动物,由于捕捉及运送的条件不良,经常有骨折的现象,最好是购买合法进口的 ...
因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到园子里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。 注:我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位战友。 一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水,或者PBS,浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。 二、其他常用包被方法比较( ...

