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        B因子溶血活性的检测

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         将RRBC加入正常人血清中,可使B因子活化,激活补体旁路途径致使BRBC溶解。将正常人新鲜血清加热使B因子丧失活性(简称RB),旁路途径不能激活,当加入RRBC时不发生溶血。此时再加入含有B因子的待测血清,旁路途径即被激活,RRBC发生溶血反应。根据溶血程度可测定待测血清中B因子的活性。

        1、兔红细胞(rabbitredbloodcell,RRBC)悬液的制备 无菌采兔耳静脉或心脏血,用阿氏液抗凝,分装,4℃保存。可用1周左右。试验时取一定量的RRBC,用EGTA—GVD2应用缓冲液洗涤3次,并用该缓冲液配制成3×108个/mL细胞悬液。

        2、RB的制备 取新鲜正常人混合血清(3人以上),56℃水浴加热15min,灭活其中B因子,新鲜使用或分装后冻干保存。

        3、取一定稀释度的受检血清与一定量的RB和1%RRBC悬液混合,置37℃水浴30min,离心,取上清用分光光度计429nm读取吸光度(A)值,以参考血清A值作为100%进行换算,低于60%者判定为B因子溶血活性降低。

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