The quality of sequencing results is directlyrelated to the quality of the template. ABI recommends a minialkaline-lysis/PEG precipitation procedure (the Core can supplyinformation on this protocol). ...
Extension/Termination Reactions The following procedure requires 75-100 fmol of plasmid templates 10-100 fmol of PCR product and 25-50 fmol of phage templates. ~undefinedNOTundefined: The amount of templ ...
DNA priming reaction x ul DNA2 ul Reaction buffer minus DTT1 ul primer (20 ng)10 ul totalHeat 90-100C 2 min. Cool room temp. 30 min. Enzyme mix 4 ul radioactive nucleotide (12 l)&nb ...
The following dye-labeled terminator reaction chemistries have been designed to balance conservation of reagents with the resulting sequence product signal strength. When coupled with BACPAC Res ...
►仪器使用和调校 1.打开电源开关（在仪器的后方）将仪器预热半小时左右。 2.把被测样品装入样品瓶中，然后放入仪器，盖好遮光罩，这时显示读数即是被测样品的浊度值，单位为NTU浊度单位。 3.若发觉仪器的数值，偏差出所允许的范围或两次定期校正间隔时间超过六个月，则应该对仪器重新校对。 4.校正仪器时，根据《零浊度水的制备》、《Formazi ...
测厚仪的工作原理是使一束自然光经起偏器变成线偏振光，再经 1/4 波长片，使它变成椭圆偏振光入射在待测的膜面上。反射时，光的偏振状态将发生变化。通过检测这种变化，便可以推算出待测膜面的某些光学参数。 《SGC-2型自动椭圆偏振测厚仪使用说明书》包括的内容有： 一、规格与主要技术指标； 二、仪器的原理和结构； 三、仪器的安装； 四、仪器校正； 五、仪器的使用和测量方法； 六、注意事项； ...
MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(45)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-35-di- phenytetrazoliumromide MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（ ...
This protocol is designed to allow the use of 96-well trays (8x12 microtiter tray format) and multi-channel devices from the initial inoculation step to the final cycle sequence reaction. It wil ...
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MATERIALS: 2-glass plates 1 sharks -tooth comb and spacers Whatman 3 mm paper 30 or 40% acrylamide-bis (19:1) 10X TBE urea 10% ammonium persulfate TEM ...
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测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序，DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板，合 ...
DGGE，CGGE及TGGE三种方法是基于相同的原理而设计的突变检测方法，它仍均是根据DNA的解链特性而设计.对于同一定序列组成或的DNA片段来说，它具有恒定的解链温度(Tm)，但若其序列发生改变时，Tm值亦发生改变，在含有变性因素(变性剂， 高温)的凝胶半进行电泳，当其比链解开形成分叉时，电泳迁移的速度就会改变.Tm值 全要取决于DNA的碱基组成，序列中出现单碱基替换时，Tm亦发生 ...
大片段DNA的测序: 通过鸟枪法 (Shot Gun Sequencing) 测序 鸟枪法测序的操作方法 1. 用限制酶切下目的片段的大片段Insert DNA 并用Agarose凝胶电泳进行回收。 2. 对回收的大片段DNA用物理方法 (如超声波等) 进行切断处理，然后用T4 DNA Polymerase对小片段 DNA进行末端平滑化。 3. 进行Agarose电泳，切胶回收1 kbp ~ 2 ...
DNA测序样品用什么溶液溶解比较好? 答：溶解DNA测序样品时用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应需要一个最佳的 酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后在进行了测序反应时DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在溶解DNA测序样品时使用TE Buffer。的确，TE Buffer能增加DNA样品保存期间的稳定性， 但TE Bu ...
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