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目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因揭示肺癌的转移机制。方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BLAST检索分析其同源性。结果:小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达具有明显差异共获得差异片段(EST表达序列标签) 24个选择差异明显的3个片段克隆测序后 ...

编码微球：分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球（Beads）染成不同的荧光色，从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原：把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应：先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合，再加入被检测物（可以是血清中的抗原、抗体或酶等，也可以是PCR产物）。 悬液中的微球与被检测 ...

PCR的假阳性问题深受重视，但我个人认为PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性却不同，它涉及了与PCR实验的几乎所有人员和技术环节，十分复杂。就临床而言，大三阳检出率低、甚至于GC ...

产品详细描述 ProteinChip SELDI系统用于从大量复杂生物学样品中快速获得蛋白质分子量图谱，发现Biomarker。它使用表面增强的激光解吸离子（Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization）技术来捕获、检测和测量复杂生物样品中的肽段和蛋白质的分子量。 蛋白质芯片所独特拥有的化学修饰表面使得该技术能够与其他基于分子量的分析系统相区别。SEL ...

在任何一项分析中，我们都可以看到用同一种方法分析，测定同一样品，虽然经过多次测定，但是测定结果总不会是完全一样，这说明测定中有误差。为此我们必须了解误差的产生原因及其表示方法，尽可能地将误差减小到最小，以提高分析结果的准确度。 一、准确度与误差 准确度是指测得值与真值之间的符合程度。准确度的高低常以误差的大小来衡量。即误差越小，准确度越高；误差越大，准确度越低。 误差有两种表示方法—& ...

一、试剂 1.　TRIzol　　2.　异丙醇　　3.　氯仿　　4.　75%乙醇（RNase-free）　　5.　Milli-Q水（RNase-free）　　6.　无水乙醇　　7.　dNTPs　　8.　Cy5-dCTP和Cy3-dCTP　　9.　杂交试剂1　　10.　标记试剂I　　11.　杂交试剂2　　12.　标记试剂II　　13.　反转录酶　　14.　标记试剂III　　15.　反转录引物　　16. ...

mRNA差异显示技术（mRNA differential display）是一种快速而有效的克隆差异性表达基因的方法。1992年Liang 和Pardee［1］首次应用差异显示技术对比人类乳腺癌细胞与正常乳腺上皮细胞所表达的mRNA，以此来克隆癌细胞所特有的基因。差异显示技术为寻找新基因开辟了捷径，是该领域的重大突破已应用于各个领域，如农业、植物、动物、医学；就医学而言，涉及了胚胎发育器官形成、遗 ...

从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面，已取得很大成绩，对产前诊断，早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。 一、分离基因进行结构分析 利用DNA离体转化，制备探针，制备基因文库进行筛检，最后鉴定载体中插入DNA片段的特性等一系列技术，可以设法分离出目的基因或某一特定的DNA顺序。然后通过DNA核苷酸顺序分析可以弄清楚某些疾病的病因。比如， ...

摘　要：　运用mRNA反转录差异显示技术可以了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况，为研究生命活动过程提供重要信息。文章对差异显示反转录聚合酶链式反应技术的基本原理优点与缺点以及近年来对该技术涉及的RT-PCR方法、引物设计、PCR反应参数、电泳及差异条带的显示方法以及杂交方式进行了论述和评价，并对其应用前景进行了简单分析。 关键词：反转录差异显示PCR；反向nort ...

管盖基因芯片是将基因探针固定在特制的管盖内表面，与内置杂交贮液池的Eppendorf管一起构建的基因检测器件。在一个全封闭的管内，完成基因扩增，荧光标记，芯片杂交及检测等一系列生物化学操作，实现多基因高通量并行检测。本文报道了一种用于管盖基因芯片的检测分析系统，它包括光学检测平台、图像采集系统、图像分析系统及结果报告系统。光学检测平台利用尼康显微镜光学系统，通过电荷耦合器件（CCD）的进行图像采集 ...

一、实验目的 观察玉米籽粒性状间的连锁遗传现象；理解连锁和交换的原理；掌握测定基因间交换值和基因定位的方法。 二、实验原理 位于同一染色体上的两非等位基因(如AB或ab)，总是有联系在一起分配到同一配子中去的倾向。若两非等位基因完全连锁，杂合体(AB//ab)只产生2种亲本型配子(AB和ab)，F2代出现与杂交亲本相同的2种表型。若两非等位基因不完全连锁，杂合体(AB//ab)仍产生4 ...

一、实验目的 学会利用所学知识，进行自主实验设计；了解染色体畸变的各种类型及原理，掌握利用微核检测技术监测环境污染的一般方法。 二、实验原理 微核（micronucleus 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主 ...

叶绿体足植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作川就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能，所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器，利用低速离心即可分离集中进行各种研究。 实验目的 一、通过植物细胞叶绿体的分离。了解细胞器分离的一般原理和方法。 二．观察叶绿体的自发荧光和次生荧光．井熟悉荧光显微镜的使用方法。 实验原理 将组织匀浆后悬浮在等渗介 ...

反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段，而常规PCR扩增的是已知序列的两引物之间DNA片段.实验时选择已知序列内部没有切点的限制性内切酶对该段DNA进行酶切，然后用连接酶使带有粘性末端的靶序列环化连接，再用一对反向的引物进行PCR，其扩增产物将含有两引物外未知序列，从而对未知序进行分析研究. 反向PCR的目的在于扩增一段已知 ...

根据孟德尔的颗粒遗传学理论，基因是一个独立的结构与功能单位．在杂合状态时不发生混淆，完整地从一代传递到下一代．由该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出，一对杂合状态的等位基因保持相对的独立性，其自交后代中表型分离比为 3 ： l 。本实验将观察果蝇单因子杂交后代的表型及其分离情况。 一、实验目的 1、 通过实验深刻理解孟德尔分离定律。 2 ...

微卫星（microsatellite analysis）即短串联重复序列(Short tandem repeat，STR)，它是由2-6bp重复单位构成的DNA序列，通常扩增获得的多态性长度片段范围在100-400bp之间。STR基因座广泛地存在于哺乳动物基因组中，以人类基因组为例，平均每15-20kb就存在1个STR座位，据此估计整个人类基因组中大约有50000-100000个STR ...

目前微流控芯片主要采用激光诱导荧光作为检测器。此检测器具有较强的专一性，检测灵敏度高，但是通常需要对样品进行衍生。紫外检测器是通用型检测器，也是液相色谱和毛细管电泳中普遍应用的检测器。然而，在微流控芯片中大多采用的玻璃和PMMA在紫外区都有吸收，因此只能采用成本较高的石英基质芯片。日本的岛津公司研制出采用石英芯片、紫外检测的MCE-2010型微芯片电泳系统，由于石英芯片上带4个电极并与光学狭缝一体 ...

1、凝胶电泳分析 PCR产物电泳，EB溴乙锭染色紫外仪下观察，初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致，特别是多重PCR，应用多对引物，其产物片断都应符合预讦的大小，这是起码条件。琼脂糖凝胶电泳通常应用1～2%的琼脂糖凝胶，供检测用；聚丙烯酰胺凝胶电泳时，6～10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好，条带比较集中，可用于科研及检测分 ...

一、实验目的 1、 掌握皮纹分析的基本知识和方法。 2 、了解皮纹分析在遗传学中的应用。 二、实验原理 人体的手、脚字面具有特定的纹理表现，简称皮纹。人类的皮肤出表皮和真皮构成。真皮乳头向表皮突起，形成许多排列整齐、平行的乳头线，此线又称嵴纹。嵴纹上有许多汗腺的开口。突起的嵴纹相互又形成凹陷的沟。这些凹凸的纹理就构成了人体的指 ( 趾 ) 纹和掌纹。目前，皮纹学的知识和技术．广泛应用于人类学、遗传 ...

摘要：以作者所在课题组近年来的研究工作为基础，就芯片实验室平台建设及相应的以系统生物学为最终目标的功能化研究作一说明，对在分子和细胞层面，甚至是单分子、单细胞水平上实现以规模集成为特征的临床诊断和药物筛选的努力予以特别的关注。 微流控芯片实验室又称芯片实验室（lab-on-a-chip）或微流控芯片（microfluidicchip），指的是把生物和化学等领域中所涉及的样品制备、反应、分离、检测等 ...