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随着医学科学的发展及人们对深部真菌感染的重视，越来越多的新技术用于临床真菌的检测和鉴定，随机扩增DNA 多态性（RAPD）是在PCR基础上发展起来的一种新的基因分型方法。本文综述了假丝酵母菌RAPD分析技术应用的研究进展及前景。近年来，随着肿瘤、自身免疫病、器官移植、糖尿病、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）等患者的不断增多，侵入性诊断治疗手段的广泛实施，各类免疫抑制剂和广谱、超广谱抗生素的 ...

人类基因组计划的核心内容之一是基因组测序。随着人类基因组图谱趋于完成，人类基因的 定位克隆、鉴定分析直至全基因组测序取得了突破性进展，测序策略的成熟、测序方法的改进、自动测序仪的广泛应用、计算机数据分析系统的扩展以及测序分析能力的提高， 大大推进了大规模DNA测序的进程。 第一节 DNA测序的基本方法 一、Maxam-Gilbert的化学降解测序法①先用限制性 ...

一、荧光PCR原理 1．荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRET。 2．荧光化学： 荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种：荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团 ...

项目 单位 X±SD 样本数 ...

自1987年秋以来，PCR技术的应用开创性地推动了产前单基因缺陷者及携带者的 诊断。目前PCR还不能用于诊断所有已知缺陷疾病，但极大地扩大了实验诊断学家对 诊断方法的选择。JohnHopkins大学的研究人员表明，在诊断基因缺陷疾病方面PCR技 术具有快速、准确、操作灵活等特点。每项进展的实例在以后描述。在1987年10月 前，我们用Southern印迹法产前诊断镰刀红细胞贫血症通常需要两周或更长 ...

多聚酶链式反应( PCR) 是在模板DNA、引物和4 种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖DNA 聚合酶的酶促反应 。在实验室日常工作中经常出现两种情况:一种是因未找到最佳扩增条件导致产生大量非特异性产物另一种情况是未扩增出任何产物。影响PCR 的因素很多除了受 PCR 仪器性能的制约外也取决于反应体系和反应条件的设置其中Mg2+ 浓度、缓冲液pH 值、循环条件等因素尤为重要而循环条件中的退火温度又是 ...

猕猴在自然环境生活时，可根据自身的需要摄取各种食物，在质和量方面均能满足其不同年龄、季节和生理条件的需要，一旦转人室内饲养，就失去了自由摄食的机会，完全依赖饲养人员的供给，因此室内饲养称猴，必须给其提供充足的营养物质。 猴子所需的营养成分为：蛋白质15 ％～ 20 % ，碳水化合物52 ％～ 62 % ，脂肪5 ％左右，粗纤维4 ％～ 6 % ，热能12 . 5 ～ 14 . 67 兆焦/千克，钙 ...

各位先生，各位女士，各位来宾，各位领导，各位海外侨胞，港澳同胞， 欢迎参加两位新人的结婚晚会 哦 啊 拿错了， 这是我明天参加婚礼的发言 这个才是 各位战友 我们来聊聊PCR ：） PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去，到现在各种先进的PCR仪， 到REAL TIME PCR。 设备是越来越先进，方法是越来越多，但基本的原理还是那套。然而实 ...

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)简称PCR技术，是近年来发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术，由于其可使特定DNA片段在数量上呈指数增加至可检测范围，故成为基因诊断的重要方法。在PCR基础上衍生的一些扩增技术已用于基因突变的诊断。目前单基因疾病PGD所用的方法主要是基于PCR技术通过检测单细胞靶基因的数目及结构有无异常加以诊断。 一、聚合酶链式反应 ...

猕猴：别名黄猴、恒河猴、广西猴，属于猴科，学名为Macaca mulatta。 猕猴是我国常见的一种猴类，体长43～55厘米，尾长15～24厘米。头部呈棕色，背上部棕灰或棕黄色，下部橙黄或橙红色，腹面谈灰黄色。鼻孔向下，具颊囔。臀部的胼胝明显。 营半树栖生活，多栖息在石山峭壁、溪旁沟谷和江河岸边的密林中或疏林岩山上，群居，一般30～50只为一群，大群可达200只左右。善于攀援跳跃，会游泳和模仿人的 ...

反向PCR是一种多聚合酶链式反应（PCR）应用的方法，可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA，以产生适合于PCR扩增大小的片段，然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区的末端序列，但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开引物的核心区。这种反向PCR方法可用于扩增本来就在核心区旁边的序列，还可应用于制备未知序列探针或测定 ...

细胞分离技术 一、离心技术 离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段。一般认为，转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kｇ者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min，离心力超过500Kg。 （一）、差速离心（differential centrifugation） 在密度均一的介质中 ...

丁香园网友jiangql的观点为： 1、尽量用早期的细胞，传代太多状态不好，产毒也不好，贴壁困难。 2、塑料的瓶子，DMEM+10%的小牛血清即可，要求并不高，ATCC上有详细的培养方法。 3、主要是传代，胰酶消化点到即止，不能和其它成纤维细胞一样。 最近的体会是：不用胰酶，轻轻吹打使细胞脱壁，然后将滴管前端插一个200ul的枪头，再吹打1min左右（有点费力），肉眼看不见大的细胞团即可，此时显微 ...

real-time PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程。

1、实时PCR原理 对扩增产物进行可重复性的定量长期以来一直是科学家和研究者的目标。传统的方法需要对终产物进行凝胶电泳分析。这种方法可以确定目的产物和竞争产物的大小，估算纯度，计算条带强度。然而，所用扩增试剂和体系的变动会造成扩增的终产物的重复性有较大的变动，成为这种方法的主要弊端。 扩增过程的指数期提供给我们最有用的，可重复的数据。在起始的目的DNA量与循环过程的指数期的扩增产物量之间存在着定量 ...

一、工具： 1：血糖检测仪 2：弹射式扎指针 3：血糖接触用芯片 二、方法： 先用酒精擦拭手指，用弹射式扎指针扎中指或无名指，用接触芯片粘手指上的血，插入检测仪中，一会仪器会自动检测出血糖，等稳定不变时就是所测的血糖值。 三、注意： 餐前和餐后：餐前可做，餐后1-2小时可做，否则测定值不准确。 ...

动物种类 猴 狗 猫 家兔 豚鼠 大鼠 小鼠 生理特征 ...

一、糖度计的工作原理 光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象，且入射角正弦之比恒为定值，此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下（同一温度、压力）成正比例，故测定果蔬汁液的折光率，可求出果蔬汁液的浓度（含糖量的多少）。 常用仪器是手持式折光仪，也称糖镜、手持式糖度计，通过测定果蔬可溶性固形物含量（含糖量），可 ...

动物种类 猴 狗 猫 ...

A. Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions (26) are modified from those presented earlier (25) by altering the absolute amount ...