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光合作用的基础试验操作系列四：红外线C02分析法测定光合速率

一 ：引物的设计引物的设计对于这个实验至关重要，因为real time pcr的检测灵敏度比较高，所以相应的对引物设计的要求就很高。普通的要求规则大家都知道，还有几点必须注意：1，引物的错配率（引物错配形成引物二聚体，但是SYBR照样能嵌入进去，结果导致实验结果的误差很大，重复性也不好）。2，引物的特异性一定要高（不像常规PCR，引物同源性不高，只要两条产物的片段长度相差足够大，在电泳的时候能够区 ...

光合作用的基础试验操作系列一：用叶圆片沉浮法观察环境因素对光合作用的影响

一、细胞凋亡的形态学检测 1、光学显微镜和倒置显微镜 （1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 （2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋 ...

植物叶片光合速率的测定(改良半叶法）的操作

从海水中如何分离一种噬菌体？这是一道以前的研究生考题希望大家help me！ I hope this could solve your problem：Marine phage genomics-review.pdf (345.3k) ...

Procedure Add the following to a sterile microcentrifuge tube: Labeled target DNA (3-6ng) 1-8ul Calf Thymus DNA (0.5ug/ul) ...

第一部分RNA 提取策略一、提取原理1、RNA降解的原因：内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因，因为人体细胞自身就是几十分钟（20min？）mRNA被降解一轮，所以不管是组织还是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。外源性RNA酶也是一个需要注意的因素，最常见的就是毛发尤其头发，灰尘，唾液，塑料手套这四个兄弟。针对它们我们应该戴帽子，口罩，橡胶 ...

A modified abbreviated version of the Maxam-Gilbert sequencing is described. A complete description including the methods to prepare and isolate asymmetrically labeled fragments of DNA and to prepare ...

实时定量PCR以其精确、快速、方便，越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验，实验的条件对实验结果的影响非常大。在此谈谈体系优化的问题，希望对做相关试验研究的战友有所帮助1.基本参数的优化： 1）MgCl2的浓度：在PCR反应中，MgCl2的浓度对酶的活性是至关重要的，不仅如此，合适的MgCl2的浓度还能在反应中得到较低的Cp(crossingpoin ...

叶绿体色素的提取、分离、理化性质的鉴定以及叶绿素含量的测定的试验操作

The method below works well for Sequencing of DNA of greater than ~40 bp. Typically about 150 bases of sequence can be read from analysis on a 6-8% urea acrylamide gel. For sequencing of short oligonu ...

A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these additives may have beneficial effects on some ampl ...

SSH是一项可以快速获取两个不同生物材料中差异表达基因的分子生物学技术，是快速筛选差异表达基因的有效方法，也是寻找新基因的重要手段。该技术尤其适合以genome尚不完全清晰的物种或者以特殊材料为研究对象的科研工作者。是基因芯片技术的有效补充。 基本流程:通过差减文库构建，文库验证和筛选（逆向斑点杂交），获得阳性克隆，对阳性克隆测序及生物信息分析，可判定差异基因的情况。另外结合RACE技术可进一步克 ...

请教有关噬菌体分离扩增测滴度纯化等的相关问题，首先是如何从污水或标本中获取，可能这些问题比较傻，但是本人是新手，敬请指教，不要取笑！谢谢！ 下面这篇文章是讲如何从污水中分离噬菌体的，肯定会对你有帮助http://highered.mcgraw-hill.com/sites/dl/free/0072487445/92720/Exercise37.pdf 我们实验室的噬菌体扩增及测滴度方法： 第一 ...

方法简介所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线。RT-qPCR是由 ...

mRNA差异显示技术是由美国波斯顿Dena-Farber癌症研究所的Liang Peng博士和Arthur Pardee博士在1992年创立的。它也称为差示反转录PCR（differential display of reverse transcriptional PCR）简称DDRT-PCR。mRNA差异显示技术是将mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术，具有 ...

简介了光合作用的研究历史

简介了叶绿体和光合色素

碘化物缓冲液： 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 1 mM EDTA 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的？我怎么没有提出DNA来，不知道是为什么？用的是NEB手册上写的方法。 1. 按上述方法进行噬菌斑扩增，在第一步离心后，将500 µl含噬菌体上清转入一新鲜离心管。 2. 加200 µl PEG/NaCl，颠倒混匀，室温放置10 ...