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一、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 二、操作流程 （一）原位PCR步骤 1、预处理：　　（1）切片常规脱蜡；　　（2）0.2mol/L HCl处理10min；　　（3）5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min；　　（4）Nase消化组织37℃ 30min；　　（5）梯度酒精脱水，室温干燥。 2、原位扩增：　　（1）切片滴加特异性序列引物30μLPCR扩增反 ...

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA，然后才进行自动热循环，最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行，临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作，PCR自动热循环中影响因素很多，对不同的DNA样品，PCR反应中各种成份加入量和温度循环参数均不一致。现将几种主要影响因素介绍如下。 一、温度循环参数 在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退 ...

(一)细胞培养板的密闭和污染问题： 细胞培养板的加样和操作：细胞培养板在进行细胞操作时同样遵循严格无菌的原则，各项操作要保证规范、科学，不对细胞的生长造成额外的影响。这其中最常见的问题就是如何保证加样后细胞的均匀和尽量减少换液对细胞生长状态的影响。 问：96，24孔培养板或培养皿的盖子都很松，这样是方便了透气，但是细菌、霉菌等污染物会不会也随着溜进去呢？答：1.盖子很松，属于半开放培养 ...

实验动物的种类繁多，各种指标的检测方法往往各不相同，而且每个人在做动物试验时所需要检测的指标也各不相同，每个人掌握的测定方法也各不相同。 能到本版来的各位战友相信都做过动物试验，也检测过实验动物的指标，希望各位战友能将自己检测实验动物的各种指标时所使用的方法拿出来与大家分享。以至于dxy能够将各位的实用方法系统的组织起来，形成一个比较完善的实验动物常用指标的检测方法！ 一。体重的测量方法 动物体重 ...

南美洲是小型猴类松鼠猴的家，松鼠猴即容易饲养又能繁殖，正逐渐成为宠物化的动物。 松鼠猴有很多不同的种类，彩图中出现的种类是最常见的，这就是松鼠猴，其它种类的松鼠猴就很好区分了，可在前面加上特征，如黑冠红背松鼠猴、红背松鼠猴等。 食物 和懒猴类的饲养相同，主要以狗食为主食，并在里面添加一些水果和植物性食物。也可以给它们喂食一些昆虫。 笼子 选择笼子的大小和大型猫狗所用的笼子大小相同就可以了，由于它们 ...

从生物学的角度看，猴子是树栖动物，它们大部分时间都停留在高高的树上，也正因如此猴群的个体之间可以保持一定距离。如果在地面遇到了食肉动物，它们会爬上最近的树，因此栖于高枝可以给猴子相当多的安全感。 17年来，我们在一处大型户外围栏中饲养了一群食蟹猴，并充分保证了它们的生物与行为需求，因此它们没有表现出任何不正常的行为。猴子的笼舍由一块木板隔成了上下两层，木板上有很多洞孔，这样可以使猴群中处于较低级别 ...

懒猴可分为包括懒猴科及HU猴科两大科。 懒猴科包括懒猴、波特懒猴等，行动非常缓慢，HU猴的动作非常活波，是这两大科的最大特征。 饮食习惯等并无重大不同，但猴需要较多的活动，请记住让它有 足够的活动空间。 食物 １）懒猴、HU猴等懒猴类的动物，在大自然中是以果实，树叶、树脂等作为食物居多。灰HU则以昆虫为主食。 ２）人工饲养时，虽有专门的猴类用人工饲料，但因取得不易，可用狗食、九官鸟的饲料、果物等混 ...

ABSTRACT Use of PCR in the field of molecular diagnostics has increased to the point where it is now accepted as the standard method for detecting nucleic acids from a number of sample and microbial types. However, conventional PCR was already an essential tool in the research laboratory. Real-time PCR has catalysed wider acceptance of PCR because it is more rapid, sensitive and reproducible, while the risk of carryover contamination is minimised. There is an increasing number of chemistrie

项目 单位 正常分布范围 样本数 ...

项目 单位 X±SD 样本数 ...

项目 单位 X±SD 样本数 ...

荧光定量PCR（也称TaqMan PCR以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简要叙述。 一、特点 FQ-PCR不仅具有普通PCR的高灵敏性，而且由于荧光探针的应用，可以通过光电传导 ...

随着医学科学的发展及人们对深部真菌感染的重视，越来越多的新技术用于临床真菌的检测和鉴定，随机扩增DNA 多态性（RAPD）是在PCR基础上发展起来的一种新的基因分型方法。本文综述了假丝酵母菌RAPD分析技术应用的研究进展及前景。近年来，随着肿瘤、自身免疫病、器官移植、糖尿病、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）等患者的不断增多，侵入性诊断治疗手段的广泛实施，各类免疫抑制剂和广谱、超广谱抗生素的 ...

人类基因组计划的核心内容之一是基因组测序。随着人类基因组图谱趋于完成，人类基因的 定位克隆、鉴定分析直至全基因组测序取得了突破性进展，测序策略的成熟、测序方法的改进、自动测序仪的广泛应用、计算机数据分析系统的扩展以及测序分析能力的提高， 大大推进了大规模DNA测序的进程。 第一节 DNA测序的基本方法 一、Maxam-Gilbert的化学降解测序法①先用限制性 ...

一、荧光PCR原理 1．荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRET。 2．荧光化学： 荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种：荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团 ...

项目 单位 X±SD 样本数 ...

自1987年秋以来，PCR技术的应用开创性地推动了产前单基因缺陷者及携带者的 诊断。目前PCR还不能用于诊断所有已知缺陷疾病，但极大地扩大了实验诊断学家对 诊断方法的选择。JohnHopkins大学的研究人员表明，在诊断基因缺陷疾病方面PCR技 术具有快速、准确、操作灵活等特点。每项进展的实例在以后描述。在1987年10月 前，我们用Southern印迹法产前诊断镰刀红细胞贫血症通常需要两周或更长 ...

多聚酶链式反应( PCR) 是在模板DNA、引物和4 种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖DNA 聚合酶的酶促反应 。在实验室日常工作中经常出现两种情况:一种是因未找到最佳扩增条件导致产生大量非特异性产物另一种情况是未扩增出任何产物。影响PCR 的因素很多除了受 PCR 仪器性能的制约外也取决于反应体系和反应条件的设置其中Mg2+ 浓度、缓冲液pH 值、循环条件等因素尤为重要而循环条件中的退火温度又是 ...

猕猴在自然环境生活时，可根据自身的需要摄取各种食物，在质和量方面均能满足其不同年龄、季节和生理条件的需要，一旦转人室内饲养，就失去了自由摄食的机会，完全依赖饲养人员的供给，因此室内饲养称猴，必须给其提供充足的营养物质。 猴子所需的营养成分为：蛋白质15 ％～ 20 % ，碳水化合物52 ％～ 62 % ，脂肪5 ％左右，粗纤维4 ％～ 6 % ，热能12 . 5 ～ 14 . 67 兆焦/千克，钙 ...

各位先生，各位女士，各位来宾，各位领导，各位海外侨胞，港澳同胞， 欢迎参加两位新人的结婚晚会 哦 啊 拿错了， 这是我明天参加婚礼的发言 这个才是 各位战友 我们来聊聊PCR ：） PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去，到现在各种先进的PCR仪， 到REAL TIME PCR。 设备是越来越先进，方法是越来越多，但基本的原理还是那套。然而实 ...