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The human and bovine 14-3-3 eta protein mRNAs are highly conserved Evolutionary conservation of the 14-3-3 protein Expression and structural analysis of 14-3-3 proteins Crystal structure of the zeta i ...

Purification of GST fusion proteins in E.coli GST Sugden labMcArdle Laboratory for Cancer ResearchUniversity of Wisconsin-Madison Medical School Screen of GST-Fusion Protein Expression (pGEX system by ...

Research Tools: Synthetic Biology and Protein Engineering Research Goals: (1)Improve the performance the key proteinssuch as turn-over numberKmsubstrate promiscuitythermostabilityinhibitionetc.by prot ...

9M Urea2.5mM EDTA2.5mM EGTA1% DTE4% CHAPS make 10ml and aliquot 10x1mlfreeze at -70℃ Lysate preparation wash the cells 2x with PBS wash the cells 1x with 10mM Tris250mM Sucrose lyse the cells with 100 ...

References: Watterson et al.(1980)J Biol Chem 255:962-75. Charbonneau et al.(1979)Biochem Biophys Res Commun 90:1039-47. Extraction of Calmodulin Solutions: 1.1 N NH4OH stored at room temperature. 2.1 ...

Preparation of Dialysis tubing 1)Boil the tubing on a sitr plate (preferably in the hood)in a 4L volume of 2% (w/v)sodium bicarbonate and 1mM EDTA pH 8.0 2)Rise the tubing in distilled water thoroughl ...

Proteome Research: ConceptsTechnology and Application (Principles and Practice) By Marc R.Wilkins (Editor)Ron D.Appel (Editor)Keith L.Williams (Editor)Denis F.Hochstrasser (Editor) Publisher: Springer ...

型号 排阻的下限 （ Mr ） 分级分离的范围 ...

Italics indicate optional steps especially useful for the analysis of untested proteins. GROWTH AND HARVESTING OF BACTERIA Add 100μl ampicillin to 100 ml LB.Inoculate and grow overnight. In the mo ...

Solutions 1.1 M Acetic Acid 2.Buffer A Homogenization 10 mM MOPS- 40 ml of 2M stock solution 8 liters 4 mM EDTA- 160ml of 0.2M stock solution 1 mM DTundefined - 8ml of 1M stock solution 0.1 mM PMSundefined - 14ml o ...

This sample preparation method is a direct replacement for the dried droplet technique. It produces more uniform samples than the dried-droplet technique and the crystals are better adhered to the sam ...

1. Wash adherent cells twice in the dish or flask with ice-cold PBS and drain off PBS. Wash non-adherent cells in PBS and centrifuge at 800 to 1000 rpm in a table-top centrifuge for 5 minutes to pelle ...

蛋白质 等电点 鲑精蛋白 鲱精蛋白 鲟精蛋白 胸腺组蛋白 ...

本文根据华东理工大学生物工程学院的酶工程课件整理而成 一、实验流程 二、实验安排 第1次菌体超声破壁、离心、包涵体复性、装离子交换柱 第2次测酶活、定蛋白离子交换层析 层析样品进行浓缩、透析 第3次 ...

在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂： 1．盐析法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2．有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。 3．等电点沉淀法 用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少，多与其它方法结合使用。 4．非离子多聚体沉淀法 用于分离生 ...

人们合成与生物相关的物质是从尿素开始的，1828年，德国化学家维勒人工合成了存在于生物体的这种有机物。在1960年我国科学家采用化学方法首次成功地合成了具有生物活性的蛋白质――胰岛素。随着内切酶的发现和基因工程技术的发展，人们发现用各种不同的载体在原核、真核系统中进行蛋白表达更为行之有效。而这其中大肠杆菌表达系统发展得最为迅速、成熟。原核表达具有操作方便、快捷，需时较短，表达量大，适合工业化生产等 ...

1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？ 在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp，接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板，在30℃下温浴，直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆，并收集到一管中，这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应。 ...

凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多，如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广，商品名是sephadex型号很多，从G10到G200，它的主要应用范围是：①分级分离各种抗原与抗体；②去掉复合物中的小分子物质。如除盐、荧光素和游离的放射性同位素以及水解的蛋白质碎片；③分析血清中的免疫复合物；④分子量的测定。 （一）原理 凝胶是一种多孔性的 ...

来自上海某研究所的易博士的研究课题是寻找导致某种疾病的相关基因，最近他获得了这一疾病的微卫星家族标记图谱，但是这种串联重复的微卫星位点并不能完全满足他的分析要求，因此他决定转向作单核苷酸多态性SNPs（single nucleotide polymorphism，发音为“snips”）基因分型。 确实，如果你的研究课题也是寻找易感基因，那么SNPs是一种比较而言可行而且高效 ...

一、生物大分子色谱纯化方法的选择思路 通常在做纯化前对自己的目标物质特性了解越多对纯化将会越有利，如果不太了解，也可以通过电泳知道目标物质和杂质的情况，找到一种简单的鉴定方法，此外在纯化前必须先建立可靠的活性测定的方法。如果是未知的蛋白，那么通常可以有几种简单的摸索： 1.凝胶过滤色谱。这个方法很常用，但是效率不高，对低浓度的样品没有富集作用，上样量小。 2.离子交换色谱。此法很常用，但是样品必须 ...