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AtlasTM cDNA表达距阵(Expression Array) 同时对588种/1176种关键基因做全景表达图谱分析 同时对大量已知基因的表达进行大规模高通量(High-htroughput)分析 检测关键基因在细胞关键功能中的角色 只需简单的杂交步骤 就在数年前，核酸矩阵技术只能在资金雄厚的大实验室开展。但两年前(1997)，随着Clontech公司推出AtlasTM cDNA矩阵，情况大 ...

蛋白质是一种生物大分子，基本上是由20种氨基酸以肽键连接成肽链。肽键连接成肽链称为蛋白质的一级结构。不同蛋白质其肽链的长度不同，肽链中不同氨基酸的组成和排列顺序也各不相同。肽链在空间卷曲折叠成为特定的三维空间结构，包括二级结构和三级结构二个主要层次。有的蛋白质由多条肽链组成，每条肽链称为亚基，亚基之间又有特定的空间关系，称为蛋白质的四级结构。所以蛋白质分子有非常特定的复杂的空间结构。一般认为，蛋白 ...

色谱法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱，以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同，以使组分分离。其中一相为液体，涂布或使之键合在固体载体上，称固定相；另一相为液体或气体，称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土 ...

High-throughput protein analysis integrating bioinformatics and experimental assays. Nucleic Acids Res. 2004 Feb 3;32(2):742-8 The wealth of transcript information that has been made publicly availa ...

Kyle Coachman/Linda Warfield/Steve Hahn Last modified 5/13/02 To concentrate proteins for analysis by SDS PAGE: If a small amount of protein is to be precipitated (less than a few micrograms)add In ...

James MoviusHahn Lab 1.Proteins are TCA precipitated and washed with acetonethen dried. 2.The CNBr should be brought to room temperature in the hood and used ONLY in the hood.Extremely toxic! 3.Dissol ...

METHOD for Western Blots: 1.While your SDS-PAGE gel is runningmake your transfer buffer and chill to 4℃.Check that you have a frozen buffer dam is ready (stored in freezer next to Shikhatop shelf to t ...

TCA-DOC For precipitation of very low protein concentration 1)To one volume of protein solutionadd 1/100 vol.of 2% DOC (Na deoxycholatedetergent). 2)Vortex and let sit for 30min at 4ºC. 3)Add 1 ...

Protocol for Silver Staining Silver staining is less compatible with the mass spectrometric analysis.Thereforewe don't recommend using silver staining for any samples that will subsequently be submitt ...

ChIP（染色质免疫沉淀）方法是研究活体“蛋白质－DNA”相互反应的一种非常强大的工具。目前，这种方法用于染色质结构的动力学研究、转录因子的调节和辅助调节因子及其他表观遗传变化的研究。 ChIP的使用过程分为三个主要步骤：第一步，在甲醛固定后分离和破碎染色质；第二步，使用感兴趣的蛋白的抗体完成特定染色质片段的免疫沉淀；第三步，分析免疫沉淀片段以确定出靶标DNA是否与感兴趣的 ...

醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体有以下优点：①电泳后区带界限清晰；②通电时间较短（二十分钟至一小时）；③它对各种蛋白质（包括血清白蛋白，溶菌酶及核糖核酸酶）都几乎完全不吸附，因此无拖尾现象；④对染料也没有吸附，因此不结合的染料能完全洗掉，无样品处几乎完全无色。它的电渗作用虽高但很均一，不影响样品的分离效果，由于醋酸纤维素薄膜吸水量较低，因此必需在密闭的容器中进 ...

一、原理 细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。 二、试剂准备 1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29. ...

蛋白质的检测与分析――Western blot 操作步骤 一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质（或酶）。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸称为Western（西）印迹法，该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血 ...

稳定蛋白质三维结构的作用力主要是一些所谓弱的相互作用或称非共价键或次级键，包括氢键，范德华力，疏水作用和盐键（离子键）。此外共价二硫键在稳定某些蛋白质的构象方面也起着重要作用。 氢键(hydrogen bond)在稳定蛋白质的结构中起着极其重要的作用。多肽主链上的羰基氧和酰胺氢之间形成的氢键是稳定蛋白质二 级结构的主要作用力。此外，还可在侧链与侧链，侧链与介质水，主链肽基与侧链或主链肽基与水之间形 ...

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构，端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列，这一序列在生物进化中有高度的保守性（人重复序列为TTAGGG）。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合（如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失）中起重要作用。 由于DNA聚合酶不能复制线性DNA的最末端，多数正常体细胞的端粒末端每经一个复制循环就进行性缩短。这一现象在体内和体外都 ...

New England Biolabs，在实验室工作时间较长的人都不会陌生，特别是海归派。成立于上个世纪七十年代中期，NEB是当今全球限制性内切酶最重要的供应商，超过30%已知的限制性内切酶是首先在NEB发现的。NEB供应的限制型内切酶种类足有210多种，也是最多的（目前仅有少数几个被其他公司专利的内切酶NEB不提供，比如Stratagene独家的的DpnI），其中有130 多种重组酶――通过重组 ...

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相，以蛋白质等样品为移动相，分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 （一）原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团，当结合阳离子基团时，可换出阴离子，则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基（Dicthylaminoethyl，DEAE）纤维素。在纤维素上结合了DEAE，含有带正电荷的阳离子纤维素―O―C6H14 N+ ...

快速方便的染色步骤 SimplyBlue™ SafeStain的实验步骤易于操作，在不到3个小时的时间内就能完成，条带在染色液中马上可以显现，不需要脱色，但是为了达到最佳灵敏度，可以使用基于水的脱色步骤。 灵敏的染色结果 SimplyBlue™ SafeStain融合了独特的胶体状考马斯G－250染色液和一种优化的染色步骤，达到纳克级的灵敏度，1微克蛋白在染液中5分钟就可以 ...

433 A多肽合成系统 ―― 公认的经典高效全自动合成系统 l 合成规模0.1- 1.0 mmol可采用Fmoc和tBoc两种方法 l 特有的涡流混合式反应腔和NMP溶剂系统:活化氨基酸与肽充分反应偶联率高达99%以上 l 专利的零死体积阀门设计:去除交叉污染减少试剂消耗 l 全套完备的试剂和树脂 l 全自动电脑控制程序编辑快速简便 l 特有回馈监控功能自动强化脱保护和偶联保证高得率 491型蛋白 ...

蛋白质提取与制备蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的，大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、丙酮及丁醇等有机溶剂中。因此可采用不同溶剂提取、分离及纯化蛋白质和酶。 蛋白质与酶在不同溶剂中溶解度 ...