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PCR产物的电泳检测时间

PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。常见问题如下: 一、假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中 ...

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Preparation of Antibiotic Stock Solutions and Agar Plates

Antibiotic Stock Solutions Ampicillin Beta-lactam-antibiotics are not very stable when dissolved. Slow but steady degradation happens even when frozen to -20°C. Therefore commercial b ...

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试剂配制注意事项

请问各位前辈们,在配制细胞培养液(主要是胚胎培养液)时,哪些成分需要分开溶解(分成A、B液),最后才混合到一起?配制试剂时有没有个大体的原则,哪些情况下得分开配制呢,原因是什么? 不同的培养液在配制的时候其成分不同,要注意的事项也不同。一、配制首先要保证每种成分都是合格的。1 水的质量很关键,最少是三蒸,电阻率在0.1-1.0×10-6Ω•cm 以上。2 血清等其 ...

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Folin-酚试剂配制

方法: 试剂试剂甲:A液:Na2CO3 10.00gNaOH 2.00g酒石酸钾钠(或钾盐钠盐) 0.25g混合、溶于500ml蒸馏水中。B液:CuSO4·5H2O 0.5gH2O 100.00ml用前将A液50份与B液1份混合即为试剂甲。试剂乙:于磨口回流瓶加入下列试剂Na2WO4·2H2O 100.00gNaMoO4·2H2O 25.00gH2O 70 ...

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SCGE中的试剂配制问题

(1)xinglinzi 提到PBS的配制是用:NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4•H2O 1.56g,KH2PO4 0.2g,pH7.4 灭菌。我查到其他文献用的是:NaCl 160g,KCl 4g, Na2HPO4•12H2O 58g,KH2PO4 48g, pH7.4 灭菌。对比起来,就是终液量不同,差20倍而已,但两组中的不同处是一个用的Na2HPO4 ...

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关于2D试剂配制

2D中有很多要现配或者现加的东西,非常烦人,不知道各位是怎么处理这种情况的,比如水化液中现加DTT每次只有几毫克,或者1-2毫克,称量起来难度很大,可不可以配成储存液呢?但是配成储存液后不是和直接分装前就加到水化液中不是一样吗?欢迎大家提宝贵意见! 可以,水化液你可以先配成储液,即不加dtt及两性电解质的溶液,分装好1毫升每管,储存在-20的冰箱里对于dtt ,可以先配成1M的储液,配大约1ml ...

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煮沸法快速提取质粒以及琼脂糖电泳与DNA酶解

一. 实验目的: 1、 掌握质粒DNA 分离,纯化的原理 2、 学习煮沸法快速提取质粒DNA 的方法 3、 学习DNA的限制性酶切的基本技术 4 、 学习利用琼脂糖电泳测定DNA片段的长度 二、 实验原理 在基因工程中,DNA分子的切割是由限制性内切酶来完成的。限制性内切酶能识别特定的DNA 序列,在一定的条件下切 ...

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固液试剂配制

有的试剂需要60%浓度,如葡萄糖等,这么高的度是质量体积比(w/v)还是什么,是不是就是加60g葡萄糖然后用水补足至100ml啊? 固液的百分比一般是质量体积比(w/v).60%的葡萄糖=60g葡萄糖用水补足定容至100ml. ...

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电泳技术(electrophoretic techniques)的应用

电泳技术(electrophoretic techniques)的应用

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兔的品系与生理学特性

中国白兔 ...

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豚鼠正常生理生化指标

心跳频率280(200-360)次/min,呼吸频率90(69-104)次/min,潮气量1.8(1.0-3.9)ml,通气率16(10-28)ml/min,好氧量816mm3/g活体重,血压10-16kPa,红细胞总数5.6(4.5-7.0)×1012/L,血红蛋白144(110-165)g/L,白细胞总数(5-6)×109/L,血小板116×109/L,血浆 ...

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大鼠的生理值

项目 正常值 体温(℃) 38.2(37.8-38.7 ...

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天麻蛋白质的双向电泳和肽质量指纹谱分析与鉴定

摘要: 采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱技术对天麻染菌球茎皮层和不染菌的新生球茎皮层进行了比较蛋白质组分析与鉴定。双向电泳后在分子量12~97 kD、等电点3~10 范围内 每块胶分离到约900 个蛋白质点。对新生球茎中表达量明显增加的5 个蛋白质点用基质辅助激光解吸P电离飞行时间质谱(MALDI2TOF MS) 进行肽质量指纹谱的分析 并通过检索不同的数据库进行蛋白质鉴定与功能预测 初步认为第4 ...

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急性脊髓损伤蛋白质的双向电泳分析和质谱鉴定

摘要:目的 建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础。方法 采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白银染显色Image Master图象分析系统分析从胶中选取分离蛋白质点基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI2TOF2MS) 分析获取肽质量指纹图谱(PMF) Mascot 软件搜索MSDP、SWISS2PROT数据库鉴 ...

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双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞HCL-H520蛋白质组成份

双向凝胶电泳_飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI_H520蛋白质组成分.pdf ...

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双向凝胶电泳分析小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁组织蛋白质组

摘要 目的:研究小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁蛋白质表达图谱及其差异。方法:用固相pH 梯度双向凝胶电泳分离5d. p. c. (days postcoitum) 小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁总蛋白同时分离同龄未交配小鼠子宫内膜总蛋白银染显色PDQuest 2DE 软件分析。结果:图像分析测得三块胶的匹配率达7415 %以上在等电点pI 3~10 、分子量1414~7514kDa 范围内分离得未 ...

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抑郁大鼠海马的双向凝胶电泳图谱分析

背景及目的 抑郁症发病机制不清。结构影像、遗传、神经生化的研究都从不同角度阐述了抑郁症的发病机制,种种证据也显示抑郁症的发病在脑代谢层面是有其器质性基础的,但至今还无明确、统一的结论。蛋白质组学技术为抑郁症发病机制的研究提供了新的手段。本研究通过建立抑郁症的动物模型,利用双向电泳和质谱鉴定技术,分析海马组织差异蛋白质表达,旨在探索抑郁症新的治疗靶点,为建立客观的诊断、治疗、停药指标提供 ...

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CELLULAR ELECTRON MICROSCOPY

Description Recent advances in the imaging technique electron microscopy (EM)have improved the methodmaking it more reliable and rewardingparticularly in its description of three-dimensional detail。T ...

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Protocol for Real-Time RT-PCR

This protocol describes the detailed experimental procedure for real-time RT-PCR using SYBR Green I as mentioned in Xiaowei Wang and Brian Seed (2003) A PCR primer bank for quantitative gene expressio ...

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定量PCR技术

定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量。  广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型:(1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。这种类型没有对样本进行质控监测,易出现 ...

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