胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物,它不仅参与血浆蛋白的组成,而且也是细胞的必要结构成分,还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等。胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式存在,统称总胆固醇。总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。本实验采用前一方法。 胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质,此物质在550nm波长处有最大吸收,可用比色法作总胆固醇的定量测定。胆固醇含量在400m ...
基因芯片(gene chip)是近年发展起来的一种新型实用的高新生物技术,已成为目前国际上生命科学研究的热点之一。其突出特点是具有高度的并行性、多样性、微型性和自动化,已成为高效、快速、大规模获取相关生物信息的重要手段。利用该技术可在数分钟至几小时内完成传统分子生物学方法要数月甚至数年才能完成的几万次至几十万次的基因分析实验。目前基因芯片技术已在疾病诊断、发病机制及疾病易感性研究、药物设计与筛选、 ...
一、目的 脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法。通过本实验的学习掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法。 二、原&nbs ...
脂类测定标准化十分重要。心脑血管病的临床和流行病学研究,高脂血症的诊断或治疗过程中血脂变化的监测,以及冠心病危险性的估计都需要准确、精密和实验间可比的测定结果。 一、国外标准化工作的回顾和现状 早在1958年,美国疾病控制与预防中心(CDC)即提出脂类[胆固醇(chol)和甘油三酯(TG)]测定的标准化计划,并和世界卫生组织(WHO)合作,对美国和国际实验室进行脂类测定的质量评价。当时有800多 ...
脂蛋白和脂质测定方法学评价血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:早期发现与诊断高脂蛋白血症;协助诊断动脉粥样硬化症;评价动脉粥样硬化疾患如冠心病和脑梗塞等危险度;监测评价饮食与药物治疗效果。 一、血浆脂蛋白测定 1、超速离心分离纯化法超速离心法是根据血浆中各种脂蛋白的比重(密度)的差异,在强大离心力作用下进行分离纯化的一种方法。血浆在不同密度盐溶液中经过超速离心,各种 ...
丁香园网友xxxdada的观点为: 1、我取脑的时候是用双镊,先用一把夹住头部,另一把在人状缝下面撕开,要特别小心,别弄出血来,因为出血的话取出的脑组织含血块就会比较多,离心的时候可以看出来,不知各位同仁有没有更好的方法。 2、尽量去除脑膜和血管,PBS清洗干净,胰酶消化37度10-15分钟消化中止按每10ml胰酶加1ml血清。 3、玻璃培养瓶差速30-40min过滤75-100um滤网,种植,其 ...
脂蛋白和脂质测定方法学评价血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:早期发现与诊断高脂蛋白血症;协助诊断动脉粥样硬化症;评价动脉粥样硬化疾患如冠心病和脑梗塞等危险度;监测评价饮食与药物治疗效果。 详细内容请下载: ...
丁香园网友clellwei的观点为: 原代椎间盘细胞培养其实并不太难,但培养时间相对较长,所以容易出问题。 1、选材很关键 选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些,可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时(一般选择手术摘除的椎间盘),患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大,间盘退变很严重,培养的难度相应增大。20-50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行 ...
REFERENCES: Nikaido and Roseenberg (1983) J.Bact 153: 241-252; Yoshimura et al. (1983) J.Bact 258: 2308-2314. METHOD: 1、6.2 ?moles of lipid (ideally egg phophatidylcholine or dipalmitoyl phosphorylcho ...
Preparation of chambers: Immediately after use rinse with distilled water a couple of times and then with 70% or 100% ethanol (can repeat this rinsing) then invert the cells and let them air-dried. Th ...
食品中的脂类主要包括脂肪(甘油三酯)和一些类脂质,如脂肪酸、脂、糖脂和固醇类k食物中的脂类 95%是甘油三酯,5%是其他脂类。人体贮存的脂类中,甘油三酯高达 99%。脂类的共同特点是具有脂溶性,不仅易溶解于有机溶剂,还可溶解其他脂溶性物质如脂溶性维生素等。人类膳食脂肪主要来源于动物的脂肪组织和肉类以及植物的种子。动物脂肪相对饱和脂肪酸和单个不饱和脂肪酸多,而多不饱和脂肪酸含量较少。植物油主要不饱和 ...
脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏 ...
一、脂类概述 脂类物质在人体中占有相当大的部分,通常它们在人体内以两种形式存在,第一种为脂肪,主要为中性脂肪,储存的部位如皮下,大网膜,肌间肾周围组织等部位,另外一种为结构脂肪,如磷脂,胆固醇等它们与蛋白,糖类结合在一起存在于细胞内,构成细胞的组成成分。 1、单纯脂质:由脂肪酸各醇化合的酯,如中性脂肪,油及蜡等,苏丹染料可染为黑色或红色。 2、复合物质,脂肪酸的酯经水解后生成醇类,脂肪酸,磷酸和含 ...
问:小试的时候用预装柱摸索好的纯化方法:缓冲液(1):上样平衡缓冲液,PBS+0.8M 硫酸铵缓冲液(2):清洗杂蛋白缓冲液,PBS+0.3M 硫酸铵缓冲液(3):Tris-HCl pH9.0 0.1Mphenyl FF(high sub)疏水柱,收率与蛋白质性质都可以达到要求。在放大时候,就发现用Tris-HCl pH9.0 0.1M洗脱不下来我的目的蛋白,然后我改成用水洗脱,可以洗脱下我的蛋白 ...
问:目前我正在做正丁醇部位的分离,好难啊现在接了许多流份,在合并一些流份之后,发现有些上面漂了一层白色的物质,有点像蜡状,问了下同学说是可能是油脂类的东西,但是我觉得正丁醇部位的东西怎么会含有这类东西呢?有谁见过类似的情况啊?帮忙分析下,谢谢诸位了!另有一个问题,我想请教一下,得到的样品不纯,有哪些纯化方法呀? 答:萃取不完全有可能出现少量的油脂。你提到流份,那就不是油脂,我也碰到过,应该是样品 ...
问:我要检测ER的膜蛋白,从心脏组织中提取,采用了超速离心的方法,具体就是首先组织匀浆,20000G离心15分钟,取上清,再100000G离心,得到的沉淀应该是还有ER的,但是我试了不同的buffer去重悬,效果都不是很好,甚至2X的电泳buffer(含有1%SDS)都无法使得沉淀充分的溶解,可以看到有一块状的,几乎不可溶解,我开始是觉得离心力太大部好溶解了。后来换了一种方法,组织匀浆之后, 65 ...
问:最近萃取的脂类用正己烷定容好后放冰箱(ependorff管中),结果溶剂都挥发掉了,请问大家我再次用溶剂溶解一下,里面的脂类含量会改变吗? 答:朋友你指的是浓度改变吧?也就是质量发生变化。我配过的溶液放冰箱都会发生改变,时间越长变化越大!你要是指多种成分的百分比发生改变那就用你挥发光的样重新定容,用封口膜封口,测下它的稳定性!呵呵要是稳定就恭喜你拉,萃取完不用浓缩就自己挥发,呵呵工艺不错,就是 ...
与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。 色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:最经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。 一、基质的特点: 1、 硅胶 硅胶是陶瓷性质的无机物基质 ...
基因芯片(Gene Chip)是随着人类基因组计划(Human Genome Project,HGF)创建并发展起来的,1996年世界上第一块商品化基因芯片问世,由此掀起了基因芯片研究热潮,并相继出现了多种类型的基因芯片技术,并己在生物医学领域广泛应用。 《基因芯片技术及其在眼科的应用进展》下载 点击这里下载 ...
摘要: 基因芯片(gene chip)是分子生物学实验技术的一个新突破,利用该技术可以对成千上万个基因的表达进行平行分析。基因芯片技术的出现改变了生物医学研究的前景,是后基因组时代功能基因组研究的主要工具。本文将基因芯片技术在皮肤科学领域研究中的应用进行综述。 随着大量原核和真核生物基因组全序列测序的完成,特别是人类基因组序列的获得,人类已经步入后基因组时代,人们研究的重点由发现基因转向探索基因的 ...

