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问：谁有a一醋酸萘酯酶（ANAE)染色法的具体步骤，我们这里查不到，还望各位大侠不吝赐教！ 答：中性非特异性脂酶(α—NAE)染色 酯酶染色的方法很多，根据与pH底物等不同作用，将常用的酯酶染色法分为两大类，即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。后者又可分为3类：①中性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D酯酶。②酸性 ...

问：请教肝酯酶的生理功能及其测定方法？ 答：肝脂酶（hepaticlipase或hepatiltriglyceridase或hepaticendothelaillipase，HL或HTGL）属于与血液循环中内源性TG代谢有关的酶之一，与LPL在功能上有相似之处，然而却是两种不同性质的酶。 其特点是：①HL活性不需要ApoCⅡ作为激活剂；②SDS可抑制HL活性，而不受高盐浓度及鱼精蛋白的抑制；③主要 ...

问：磷酸二酯酶（phosphodiesterase，PDE）。请教：目前发现的PDE有多少个类型，共多少个亚型。其中阴茎海绵体组织中的PDE主要存在那几种类型及亚型。各种类型主要参与调节cGMP还是cAMP含量？（并给出出处－参考文献） 答：目前磷酸二酯酶可分类为11型，PDE1至PDE11。具体请参考下面文献： ...

问：本人想写一篇关于有机磷中毒的文章，可是胆碱酯酶的测定是用KU/ml来表达，而有机磷中毒的分级却用百分比来表示，其中有换算公式吗？ 答：中毒分级 a. 轻度中毒: 有头晕、头痛、恶心、呕吐、多汗、胸闷、视物模糊、无力等症状瞳孔可能缩小。全血胆碱酯酶活性一般为50%～70% 。 b. 中度中毒: 上述症状加重尚有肌束颤动、瞳孔缩小、轻度呼吸困难、流涎、腹痛、腹泻、步态蹒跚、意识清或模糊。全血胆碱酯 ...

通过对乳汁中孕酮含量的测定，了解酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked-Immuno-Sorbent-Assay，ELISA)的基本原理与检测技术。 与RIA法相似，利用被测抗原与酶标记抗原对特异性抗体进行竞争结合，测试(加入的)标记在抗原上的酶催化底物所产生的颜色反应。当特异性抗体量一定时，且小于被测和标记抗原时，未标记抗原浓度越高，标记抗原和抗体的结合就越受到抑制，显色愈浅 ...

Purpose The protocol describes how to prepare human tonsil lysate for use in purification of ICAM-1LFA-1and PNAd. Materials Safety Equipments Lab Coat Latex Gloves Face Mask Bench Paper Fresh human to ...

选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的 ...

一个经典的《细胞生物学》教程 细胞生物学》教程ＰＰＴ下载连接 网址： 第一章 历史与展望 http://www.cella.cn/jxck/01.pdf 第二章 实验技术 http://www.cella.cn/jxck/02.pdf 第三章 细胞基本结构 http://www.cella.cn/jxck/03.pdf 第四章 质膜及其表面结构 http://www.cella.cn/jxck/0 ...

1983年Warren和Marshall从人胃粘膜成功地分离出幽门螺杆菌（Hp）之后，Hp与胃炎、消化性溃疡的相关性引起人们极大的兴趣。人们推测其可能成为这类疾病的致病因素之一。许多研究者正进一步探索其致病机理，并从不同角度寻找快速、可靠的检测方法。迄今为止，检测Hp的方法包括组织标本培养，切片染色，细菌直接涂片染色，快速尿素酶测定及13C尿素呼吸试验和14C尿素呼吸试验等。除尿素呼吸试验外其余方 ...

Bacterial Protein Extraction (mini-scale)Using B-Per B-Per (PierceCat number: 78248)Extraction of 1.5ml bact.culture OD600nm 1.5-3.5 A useful procedure for initial screening of expression conditions i ...

Hattoti's protocol adapted to cell culture: Hattori MTugores AVeloz LKarin MBrenner D (1990)A simplified method for the preparation of transcrip-tionally active liver nuclear extracts.DNA Cell Biol.Vo ...

Publisher: Blackwell Publishing Limited Number Of Pages: 488 Publication Date: 2006-06-01 Sales Rank: 62710 ISBN / ASIN: 1405142650 EAN: 9781405142656 Binding: Hardcover Manufacturer: Blackwell Publi ...

Yeast Nuclear Extract (Small Scale) Hahn Lab (adapted from J.LeatherwoodPtashne lab) last modified MonAug 272001 Cell Growth 3 liters of cells are grown in YPD (3% glucose)to A600 of 3-5.Antifoam A (t ...

酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体（或SPA）检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高，特异性强。常用的是ELISA方法，间接法，双抗体法和抗原法。本次试验介绍，酶联葡萄球菌蛋白A免疫分析法。ELISA法原理如下，见图9 1.加抗原使之吸附于固相载体（如塑料反应板） 2.洗涤加待测血清 3.洗涤加酶标记SpA& ...

These protocols should yield enough cytosol and organelles for 1-200 MT/Organelle motility assays. Solutions and Reagents • Freshly removed or flash frozen rat liver • PBS •Homogeniz ...

Preparation of cell lysates from E.coli by enzymatic lysis Materials Chemicals lysosyme Lysis buffer 50 mM Tris-HCl pH 7.5 50-200 mM NaCundefined 5% glycerol (v/v) 1 mM DTT 1 mM PMSF~undefinedThe NaCl concentration ...

1.Wash adherent cells twice in the dish or flask with ice-cold PBS and drain off PBS.Wash non-adherent cells in PBS and centrifuge at 800 to 1000 rpm in a table-top centrifuge for 5 minutes to pellet ...

一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉，然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确，或因折叠效率低下，结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此，真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工，例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的形成或者由特异性蛋白酶进行的裂解等等，而这些加工原核细胞则无能为力。需要表达具有生物学功能的膜蛋白或分泌性蛋白，例如位于细胞膜表面的受体或细胞外的激素 ...

以已知抗体(抗HBs)包被载体，然后将含有抗原的待检标本加入，共同孵育后，抗原结合于包被抗体上，再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs)，酶标抗体连接到抗原上，最后加入底物溶液，根据颜色反应来判定抗原含量。 一、材料 HBsAg试剂盒，本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条 ...

将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活 ...