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许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题，标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果，甚至是关系到实验的成败，那么究竟如何绘制或制作标准曲线呢？ 一、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意： 1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验 ...

一、基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗 ...

Pulsed Field Gel Electrophoresis Preparation of Chromosome-sized Yeast DNA Molecules in Solid Agarose (Modified from Schwartz and Cantor CELL 37:67 1984 ) 1.Grow 5 ml yeast culture in YPD Broth to &qu ...

Northern Blot Preparation of Formaldehyde Agarose Gel The gel conditions (1% agarose 1X MOPS 6.3% formaldehyde) are designed for ~4 hours of electrophoresis. If longer times are necessary the formalde ...

Preparation of gel for Posi blot transfer 1、Cut gel to size of preexisting mask or cut new mask. 2、For depurination: put gel in pyrex dish add 500ml .25N HCl (10mL conc. HCl+450ml H2O) and shake 15min ...

We found that both formaldehyde and glyoxal gels work very well for electrophoresis of RNA; we only prefer glyoxal gels because the fumes from the formaldehyde gels are unpleasant. Most protocols sugg ...

薄层色谱是化学的一种分离和分析方法。 （1）定性鉴别 化学上经典的定性鉴别，例如经典的有机定性分析或经典的毒物分析，是利用各种化合物的溶解度不同和所含功能基的不同，用溶剂提取或用试剂处理，把它们分组或分为单一组分，然后作试管反应或点滴反应（颜色反应），或根据它们衍生物的理化性质进行定性鉴别.这种方法的缺点是样品用量较大，分离手续麻烦，分析时间较长（几小时或几十个小时），并可能有杂质干扰.，现采用合 ...

毛细管电泳技术（Capillary Electrophoresis CE）又称高效毛细管电泳（HPCE）或毛细管分离法（CESM），毛细管电泳方法虽新工艺，但历史悠久，它是在电泳技术的基础上发展的一种分离技术。电泳作为一种技术出现，已有近百年的历史，但真正被视为一种在生物化学中有重要意义的技术，是由1937年A. Tiselius 首先提出。传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热，196 ...

要跑琼脂糖凝胶电泳， 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗？能够照相的清楚的条带，至少需要多少量呢？ 参考见解：5ng 已经可以了，但是或许20ng50ng-200ng效果好，在此范围内呈线性。 把210bp的pcr产物进行酶切得到190+20bp的两个片段请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大浓度的胶和多大的电压呢? 参考见解：可以用琼脂糖凝胶电泳分开电压不变可用1.5%到2%的胶20bp得 ...

影响电泳分离的主要因素： 1. 待分离生物大分子的性质：待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说，子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快。 2. 缓冲液的性质：缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度，从而对其带电性质产生影响，溶液pH值距离其等电点愈远，其所带净电荷量就越大，电泳的速度也就越大，尤其对于蛋白质等两性分子，缓冲液pH还 ...

实验基本原理 RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中，可以分离混合物中不同分子量的RNA分子，凡是无法确定分子量。只有在变性情况下，RNA分子完全伸展，其泳动率才与分子量成正比。 判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带，且28s rRNA的亮度应为18s rRNA ...

各种浓度PAGE胶的配制（DNA电泳用） 50ml体系： 丙烯酰胺 有效分离（bp） 二甲苯青 溴酚蓝 丙烯酰胺30%（ml） 10×TBE（ml） ...

实验试剂： 试剂贮备液： 1、 1mol/L HCl48ml，Tris36.6g，TEMED0.23ml，加蒸馏水配成100ml，pH8.9。 2、 1mol/L HCl48ml，Tris5.98g，TEMED0.46ml，加蒸馏水配成100ml，pH6.7。 3、 Acr28g，Bis0.735g，加蒸馏水配成100ml。 4、 Acr10g，Bis2.5g，加蒸馏水配成100ml。 5、 核黄 ...

Electrophoresis through agarose or polyacrylamide gels is the standard way to separate identify and purify nucleic acid fragments. The location of the nucleic acid within the gel can be determined by ...

What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. DNA is a negatively charged molecule and is moved by electric curre ...

Definition Amino acids nucleotides polypeptides and other compounds in a colloidal state can be separated by the application of external voltages which cause charged colloid particles to move toward a ...

What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we are separating molecules of DNA that we got from ...

凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性的 ...

胶回收 1. 提高胶回收量的办法： 1) 增加电泳时的上样量。 2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。 3) 切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。 4) 把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。 5) 溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750μl。 6) 胶回收的关键是通过柱子的 ...

一些注意事项 1.电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3.关于防护，在一般有机玻璃后就足够了，戴上防护面具以保护眼睛，如果你戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者对于 ...