蛋白酶解肽段的纯化

问：蛋白酶解肽段的纯化，去除杂质，去除，即可，不需要分离！请问怎么设计色谱条件呢？柱子，填料，流动相，流速？？谢谢！！ 问题比较菜！

答：要看你的蛋白和酶解以后片断的大小了，楼主是要保留蛋白片断去除酶解buffer 里的东西么？一般根据样品中蛋白的大小和疏水性选择不同的柱子。常用的是反相疏水柱，几千的蛋白可以用C18硅胶键合柱，上万的要用C3的了。流动相主要是乙氰和水，流速要根据你的柱子大小而定，一般4.5mm直径的柱子1ml/min。体积在大的柱子可以相应提高流速。

园子里的讨论很多，最主要的是根据你的样品摸条件，别人的色谱条件可能不适合你，祝你好运！

答：load:A，10min；wash：50%B,20min，收集；wash 。