全部

薄层色谱（TLC）是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大（标准）或者是非极性的（反相）。流动相则是一种极性待选的溶剂。在大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂（或混合溶剂）沿板向上移动进行展开。根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。极性强 ...

一、目的： 学习醋酸纤维薄膜电泳的操作，了解电泳技术的一般原理。 二、原理： 带电质点在电场中移动的现象称为电泳。电泳现象早在19世纪初期就被人们发现了，并用于胶体化学中，但是电泳技术的广泛应用则在20世纪40年代左右。近年来各种类型的电泳技术发展十分迅速。例如，纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、纤维素或淀粉粉末电泳、淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。在电泳形式上更是丰富多样，有在 ...

RNA Marker ( RL1000; RL6000; RL10000) 可以进行一般琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。 以RL10000为例，具体使用方法如下： 普通琼脂糖凝胶电泳时 1.按下列组份配置RNA Marker样品。 2.均匀混合后65℃加热10分钟，迅速冷却至室温（最好用PCR仪)。 3.使用高质量的琼脂糖，用1×TAE Buffer制备3%凝胶，制胶时凝胶中请 ...

A. Process gel 1. Electrophorese sample in agarose gel 0.5 to 1 cm thick 0.5-1.2%. 2. Expose gel to UV light for 1 min on 265 nM light box (or depurinate in 2 vol of 0.25M HCl for 2X15' and rinse in d ...

淀粉酶属于水解酶的一种，是淀粉水解的生物催化剂。按降解方式分为α—淀粉酶、β—淀粉酶、糖化酶、异淀粉酶和环糊精生成酶。α—淀粉酶将淀粉长链分子水解成短链分子时，以无规则的方式切断淀粉大分子内部的α—1，4甙键而使淀粉生成糊精、低聚糖等，因产物的末端葡萄糖残基中C，碳原子为α—构形， ...

果胶酶，适用于果汁榨取，浓缩过滤，果汁澄清，果内衣，膜组织分离。 果胶酶活力单位：果胶酶 10万单位 酶催化特性： 最适温度：45-55℃ 最适PH：3-4 例：样品果汁-温州柑，国光苹果，远天34用量：100克/吨果汁，PH=3.5，50℃水浴，以不加酶果汁相同处理作对照，60分钟检定，果胶物质水解为100%，蛋白质水解率为60%（已经恒定） 注：果胶酶无蛋白质水解能力。 适用范围：葡萄 梨 草 ...

问：我最近想测量果汁中果胶酶的活性，通过查资料发现比较常用的方法为PH-stat法，但该方法要用自动电位滴定仪，该仪器很贵，各位有没有更好的方法，或者谁有这个仪器，我现在和着急，恳请各位的 帮助，多谢！ 答：果胶酶包含的酶组分为： 果胶质解聚酶： 对果胶作用的解聚酶分为a：聚甲基半乳糖醛酸酶（PMG），有内切、外切两种酶系（EC.3.2.1.41）； b：聚甲基半乳糖醛酸裂解酶（PMGL），分内切 ...

问：请问Cellulase“Onozuka R-10”酶溶液可以用0.22微米滤膜灭菌吗？ 答：应该可以的，做过这个实验的，这样足够了，不过就是比较麻烦，必须在超净工作台上来进行。 答：酶液一般都是过滤灭菌，买个一次性的滤器就可以，便宜好用。 ...

问：我现在急求里氏木霉透明圈筛选纤维素酶的做法，试过七八种配方都没有成功，哪位能提供可行的配方，在下不胜感激！ 答：双层平板法:下层倒琼脂水2.5%，上层用球磨纤维素粉1.2%，添加磷酸二氢钾0.4%，蛋白胨0.3%，酵母粉0.05%，有圈的就是纤维素酶了。 ...

问：最近在从一种植物中提取黄酮苷元，但是植物中苷元是与葡萄糖成苷而存在，现考虑使用纤维素酶进行酶解，却苦于总是酶解不够完全，也找不到相关的参考资料。请问大家有没有做过相关的工作，操作中要注意哪些事项呢？ 答：我们实验室做苷的水解，都是制备特定的苷的平板。再筛选能够转化水解的菌种，并且测酶活，薄层层析鉴定活得菌种和酶液。虽然都是糖苷键，但是不同的苷类化合物，它还是有特异性，不是所有的都可以用纤维素酶 ...

问：我现在做高产纤维素酶菌株的筛选工作，筛选过程中我发现有一部分菌株发酵的第一天就出现峰值，随后第二天就会迅速下降，没有通常所说的逐渐上升和逐渐下降的过程，我想请教各位前辈像这样较早的就出现产酶高峰，但又不能维持的菌是好还是不好啊？ 答：那说明这个菌株生长周期短。在产酶高峰时就停止培养，去提取酶就好，产酶高峰出现越早越好处啊。 ...

问：我那天看了一篇文章，在测纤维素酶的酶活时，除了测了C1CX酶的酶活，还测了一个淀粉酶的酶活，但好象纤维素酶只含3种：C1CX和β葡萄糖苷酶啊，这样测合理吗？ 答：纤维素酶一般不包含淀粉酶。我看了很多文献，纤维素酶应该只含有你说的三种酶，不过不同的菌含有的酶不同，比如真菌和细菌包含的酶就是不一样的。 此外我还看到有些学者采用滤纸酶活来检测总的纤维素酶的活力，具体的试验步骤和测定纤维素酶 ...

问：现在想进行纤维素酶的纯化，不知道从哪里下手，请大家指教一下，非常感谢。 答：主要还是看你研究纤维素酶的目的是什么，是了解它的功能还是应用特点，还是研究它的发酵工艺，如果在发酵这块，没必要搞纯化，以提高酶活和优化工艺为主，也有很多东西可以做。 至于纯化，要先了解青霉产纤维素酶的现有报道，掌握酶系构成、提取、粗酶制备、检测方法等等，再考虑如何分离纯化不同组分。一般还是离子交换为主，先了解蛋白的分 ...

问：因我做的是非淀粉多糖酶制剂方面的课题，中间要测纤维素酶的活性，我用了两种方法测，但测的结果还是与标定的酶活性有很大的差距，不知道问题出在那里？？请高人指点哦！ 答：酶活性可分为全活性和比活性两种。酶的全活性为每克干物质每分钟释放的相应糖的微摩尔（µmol)数 单位为µmol/gDM min。酶的比活性为每毫克蛋白每分钟释放的相应糖的微摩尔（µmol)数，单 ...

问：本人要做纤维素酶的分离纯化，请高手传授方法。 答：纤维素酶并不是单一的蛋白酶，而是一个酶系，其中包括至少3种组分。如果你用重组菌表达其中的一个片段或者产酶基因，那么要看你的载体是什么？如果有亲和标签可以用亲和层析，如果没有，那就只能考虑疏水或离子交换等方法了。不过工业上制备纤维素酶一般是不用纯化的，中试以上规模的酶制剂生产大多采用真菌发酵，纤维素酶会直接分泌到培养基中，然后通过结晶就可以得到粗 ...

问：大看了个筛选纤维素酶的实验，要用CMC-NA ，可实验室没有，有可以代替的吗？ 答：当然有很多代替品了，比如说滤纸、稻草粉等。纤维素酶应该是一个比较复杂的酶系，如果单一的用CMC作为底物进行筛选，得到的酶不一定就是纤维素酶，建议使用稻草粉，这样能够比较真实地模拟自然环境，筛选得到的纤维素酶比较实用！ 答：我也做过这方面工作，有几个筛选配方可以给你，在附件里。 ...

问：我先后做了两批纤维素刚果红培养基筛选菌种，接种后，发现第一批能产生红色水解圈，而第二批能产透明圈．这两批培养基的配方完全相同，我想请教一下，到底应该产生什么效果？ 答：利用纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理是： 1、刚果红可以跟大分子多糖牢固结合。 2、纤维素是大分子多糖，跟刚果红牢固结合。 3、纤维素酶降解平板中的纤维素成小分子糖，那么刚果红无法与小分子糖结合，就被洗脱下来，呈现透明圈。 4 ...

纤维素是地球上最丰富的可再生有机资源，其生物降解完全是微生物--细菌和真菌完成的。 1、真菌：分泌胞外游离的纤维素酶，以水解酶机制和氧化酶机制降解纤维素。 2、细菌纤维素酶则是以形成多酶复合体结构而起作用，能更加彻底有效地降解天然纤维素。 纤维素完全降解需要三类酶的协同作用：内切葡聚糖酶、外切葡聚糖纤维二糖水解酶、B-葡萄糖苷酶。目前、纤维素酶的研究热点有： 1、以纤维素为添加剂 生产可完全降解的 ...

内容简介： We developed a competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to analyze brevetoxinsusing goat anti-brevetoxin antibodies obtained after immunization with keyhole limpet hemocyanin-brevet ...

内容提要： 一、ELISA 标准操作要点 1、 标本的采取和保存 2、加样 3、保温 4、洗涤 5、 显色和比色 二、本底及假阳性产生的原因分析 1、 基因工程抗原与合成肽抗原的区别 2、假阳性本底产生的原因 三、cut off 值附近血清的处理 1、cut off 值附近的值是客观存在的 2、怎样对待cutoff 值附近的血清 ...