Mouse embryos staining including: in vitro transcription of riboprobe embryo fixation and permeabilization hybridization and post-hybridization washes immunodetection and development of signal. 完整的实验 ...
FGFR-AP-FGF Binding Assay PCR Assays for Knockout Mice RNase Protection Assay:The bound receptor was quantified by measuring the initial rate of substrate hydrolysis at 405 nm and same amount of prote ...
The purity of the transgene DNA used for microinjection is critical for the successful production of transgenic founder mice. DNA impurities in the form of bacterial endotoxins or organic contaminants ...
1.Restrict DNA and gel purify Cut 100ug DNA removing as much plasmid sequence as possible from the insert. Run on an agarose gel. Cut out band and electroelute in 0.5X TBE. Add an equal volume of ...
一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平 ...
The success of DNA purification can have profound consequences on the success or failure of any injection effort. This summary of techniques from several different sources was compiled by Brad Preston ...
问:想知道肝素如何影响a-l-岩藻糖苷酶的测定,原理是什么,哪位专家可否告知? 答:常用抗凝剂中肝素对反应有正基质效应,分析原因可能为肝素系多聚阴离子,表面带有大量的负电荷;在弱酸性条件下(pH=4.8,AFU酶催化最适pH),反应体系中蛋白质、脂蛋白等多带正电荷,易与肝素作用形成不溶性复合物。枸橼酸盐对该反应有负基质效应,可能与其和PNP/CPNP类底物有反应,具体原因尚需进一步的证实,终点法类 ...
We have found the UltraClean™ GelSpin™ Kit (available from Mo Bio Laboratories Catalog number 12400-250) is a simple and fast way to obtain microinjection quality DNA. This is not to exclu ...
问:有人提到一种酶缓冲液提供酶反应条件,酶蛋白即催化底物明胶,不知道是怎么回事情。我要测定活性和分泌。我知道是要使用聚丙烯酰胺凝胶电泳的,请教具体的实验方法很所需要的试剂。谢谢! 答:Type IV collagenase 72-kD is officially designated matrix metalloproteinase-2 (MMP2). It is also known as g ...
1. Purify plasmid from bacteria. We recommend the Qiagen EndoFree Plasmid Maxi kit for the purification of the targeting vector plasmid from bacteria. Please follow the directions in the kit. Electro ...
Buffer composition is 10 mM Tris-HCl pH 7.5 0.1 mM EDTA 30 microM spermine 70 microM spermidine 100 mM NaCl. This buffer is more likely to produce transgenic mice with intact unfragmented DNA molecule ...
问:检验科常用的碱性磷酸酶测定方法的精确度是多少? 答:精密度常以变异系数CV表示,包括批内和批间两种。国内有报道碱性磷酸酶的批内CV%为2.06--2.36%,批间为2.74%。江苏推荐的碱性磷酸酶RCV为7.5%。另外值得注意的是:血清置于室温或冰箱贮存,碱性磷酸酶活性会慢慢增高。 问:血清置于室温或冰箱贮存,碱性磷酸酶活性会慢慢增高?为什么啊,应该是酶会降解导致活性下降啊? 答:&ldquo ...
问:求3-磷酸甘油醛脱氢酶测定方法及材料,感谢! 答:楼上说的就是GAPDH,主要用来做内参的,我现在就是用这个 做内参,你可以上网找这方面的信息,就是在结合二抗的时候按照一定的比例加到二抗里面,一起结合,效果很好。 ...
完整的实验方法请点击下面的链接下载:
问:哪位大侠做过测定土壤脱氢酶活性的实验,请指点迷津啊,先谢谢了。我在做标准曲线时,加入萃取剂(甲醇或丙酮)后,各管的上部出现沉淀,红色溶液位于管的下部,上下颠倒摇匀后各管都变混浊。放置一段时间后各管都变澄清,但均为无色,如果不上下颠倒而只是振荡最终也会都变成为色的澄清溶液,这是为什么啊? 1 标准曲线的制作 1.1配制不同浓度的TTC液:从1mg/mlTTC溶液分别吸取1,2,3,4,5,6,7 ...
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问:试验做5脂氧酶的体外酶活试验,用于对药物的筛选,但是测定方法如果采用试剂盒的话,价格很贵,请教各位有谁做过比较方便的测定方法,希望大家给予帮助,谢谢! 答:酶活的测定:0.2mL酶液移入20℃,0.8mL底物(底物配制:0.25mL吐温20分散于10mLpH9.0的0.2M硼酸盐缓冲液中,摇动下逐滴加入0.27mL的亚油酸,充分混匀使亚油酸的微细状体分散于液体中,加入1N氢氧化钠1.0mL摇 ...
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问:有关测定醛糖还原酶活性时的反应体系有以下几个疑问: 1、67mmol/l钠钾磷酸盐缓冲液如何配置?也有人 用50mmol/l的磷酸钾缓冲液二者哪一种更好。 2、整个反映体系配置须注意哪些问题?最后加DL-甘油醛还是NADPH。 3、NADPH标准曲线绘制分别用多大浓度?请各位指教,谢谢。 答:在测定酶的活性时,有时由于酶的纯化不足,导致影响结果,在检测醛糖还原酶活性时要注意以下几点: (一) ...