问:我做几丁质酶已经有一年多了,现在也积累了一些经验,希望和做相关课题的同仁们相互交流一下经验,有问题的也可以问,我会尽量给大家回答,也希望知道的朋友尽量给予帮助。谢谢! 问:我真是太激动了,现在正准备做几丁质酶的分离、纯化;查了很多资料,但还是不太清楚其活性测定方法(一般都是用sigma公司的,有一种试剂500mg就30美金),肯请你为我介绍实用的方法,谢谢! 答:测几丁质酶活一般都用DNS ...
问:各位大虾,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌能产生几丁质酶么? 答:自从1905年Benecke首次报道了溶几丁质芽孢杆菌(Bacillus chitinovirous)能产生几丁质酶以来,已发现了许多产几丁质酶的微生物,包括细菌、放线菌、真菌等。在细菌中,已知的产几丁质酶的有气单胞菌属、交替单胞菌属、杆状菌属、肠球菌属、紫色杆菌属、假单胞菌属、交替假单胞菌属、沙雷氏菌属、弧菌属、黄单胞菌属、小球菌属、 ...
近期的NEJM发表了一篇哮喘方面的文章——探讨几丁质/壳多糖酶与哮喘严重度的关系。是一个横断面(cross-sectional)研究,设计简单但严谨。有兴趣的朋友可以看看。下面是园子里的该文摘要: ttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=116&id=10442258&sty=1&tpg=3&age=0 ...
The manipulation of embryonic stem (ES) cells to generate targeted mutations via homologous recombination has proved an invaluable resource for researchers from fields as diverse as embryology immunol ...
问:我想请教一下各位,18家族几丁质酶与19家族几丁质酶是怎样进行分类的。究竟怎样对几丁质酶进行分类的?谢谢! 答:你好,根据几丁质酶催化区氨基酸序列的同源性,可以把几丁质酶分为18,19,20家族。18家族的几丁质酶来源于细菌,真菌,病毒及一些植物。19家族的几丁质酶主要包括植物几丁质酶和部分链霉菌属的几丁质酶。20家族包括链霉菌属和人类的几丁质酶。 ...
问:大家有测蔗糖转化酶,蔗糖合成酶,淀粉酶类的实验的吗?我的一个同学现在正测这三个酶,有谁知道怎麽测吗?先提前谢谢了! 答:粉酶好测,它降解淀粉生成葡萄糖,可以使用DNS还原糖法测定。蔗糖转化酶应该是水解蔗糖生成葡萄糖和果糖,那么可以通过测定果糖含量来测定酶。果糖测定在有机化学书上有,很简单的。也可以通过测定还原糖的含量来测定,蔗糖合成酶那么可以使用测定低物量减少的方法测定,既测定作为低物的葡萄糖 ...
问:我记得半年前见习时用的是PNP-G7法测α-淀粉酶,现在又改进为EPS-G7法,二者有何区别?哪个方法更好?再有二者的英文全称及汉语全文又是怎样的? 我想:EPS-G7应该是 46-ethylidene-(G7)-1,4-nitrophenyl-(G1)-α,D-maltoheptaoside46-亚乙基-α,D-麦芽7糖苷-对硝基酚。参考自:上海申能-德赛 ...
溶液以及器材: 1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml 2、配三抗: 青霉素:100ku/L 链霉素:100ku/L 庆大霉素:100ku/L 3、培养液(M199+ECGS+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml 4、大瓶生理盐水 5、广口瓶(脐带数+1) 6、止血钳(脐带数×2+2) 7、大针头数个(用于吸取生理盐水,胶原酶) 8、手术剪刀数把 使 ...
问:看到有文献将β-环糊精交联后作柱材料,用于从水溶液中吸附α-淀粉酶,吸附上去后再用溶剂把α-淀粉酶洗下来,也有人在α-淀粉酶的水溶液中加入β-环糊精或羟丙化β-环糊精来提高α-淀粉酶的稳定性。疑问: β-环糊精与淀粉都是多糖(β-环糊精是7个葡萄糖围成的筒状结构),用β-环糊精作柱材料, ...
软骨细胞的原代培养 龄新西兰乳兔(雌雄不限,共18只,分6次处理)溺死,置于75%酒精溶液中10分钟,拿入超净工作台,自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织,再次严格消毒,自外眦外将颧弓由根部剪断,暴露髁状突,去净髁状突表面软组织及软骨膜,以眼科剪剪取髁状突表面的透明软骨,以磷酸缓冲液(PBS含青霉素、链霉素各100U/L)冲洗2遍,将软骨剪切成1-3mm3 左右碎块,0.25%胰蛋白酶先消化30- ...
问:请教各位老师 :一病人两次尿检胰淀粉酶都比总淀粉酶高 正常吗? 答:1、检测原理:免疫抑制连续监测法。底物46-亚乙基-a-D-麦芽七糖苷-对硝基苯酚(EPS-G7)被α-淀粉酶裂解为多种片段在第二步反应中它们被a-葡萄糖苷酶进一步水解生成葡萄糖和对硝基苯酚。由于在预孵育阶段,唾液淀粉同工酶被两种单克隆抗体的复合体选择性抑制,所以吸光度的上升速率与样品中胰淀粉酶的活力成正比。 2 ...
问:小孩淀粉酶测定:血AMY正常,尿AMY为1881(尿AMY<600) ,第二天再测定尿淀粉酶为172,结果为正常,临床医生认为我们结果不准,可是将两天的尿标本重新测定,结果仍是如此。各位高手前辈遇到这种情况过吗?为什么? 答:血中的AMY升高达高峰后一般要2~5天降至正常。AMY在尿中下降要比血中的AMY还慢,象楼主所说的情况,一般出现的可能性不大,我认为很有可能是第一天的标本被唾液污染 ...
问:现在我发现了一个GB 8275-87,不过我现在用的是诺维信的α淀粉酶,他们的标准不是8275-87 两个标准就有一项酶活力这个指标值不同,我也不知道怎么转换,求教哪位可提供另一个标准(GB 2760)给我参考一下。 答:GB 2760是食品添加剂使用卫生标准,对你有用吗? ...
收集足月顺产或剖腹产新生儿脐带,保存于5%糖盐水中,4℃。(脐带在4℃ 5%糖盐水中保存时间不超过24h)。在超净工作台上将脐带取出,置灭菌弯盘中,用生理盐水冲洗脐静脉至冲出的液体不含红细胞。钳闭脐带一端,从另一端向脐静脉内注入37℃预热的0.25%胰蛋白酶,钳闭另一端。置37℃的生理盐水中10~15min。取出脐带,松开一端钳子,放出消化液,加入含15%新生小牛血清的M199培养基以终止反应。离 ...
1.材料和方法 1.1 DMEM/F12条件培养液(亚硒酸钠40μg·L-1,腐胺16.2 mg·L-1,转铁蛋白100 mg·L-1,胰岛素234U·L-1,甲状腺素0.4μg·L-1,黄体酮0.62 mg·L-1,谷氨酰胺3g·L-1)。DMEM/F12培养基、小牛血清购自Hyclon ...
一周龄Wistar大鼠,断颈处死,于75%乙醇浸泡15分钟,无菌取出胰脏,于冰冷无菌D-Hanks液中漂洗,用眼科剪仔细清除脂肪、包膜、血管等胰外组织,转入青霉素小瓶中,加入少量无菌D-Hanks液,用眼科剪剪成0.1-1.0mm3大小的碎片,用滴管轻轻吸出上层细小脂肪碎块和油滴,再用无菌D-Hanks液反复清洗8~10次,加入10倍体积无菌消化酶液,38℃±1℃消化,消化过程中不断 ...
一、毛细管电泳的兴起与发展 毛细管电泳(capillaryelectrophoresisCE),又称高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展最快的分析化学研究领域之一。1981年Jorgenson等在75μm内径的毛细管内用高电压进行分离,创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等发展了毛细管胶束电动色谱(MECC)。1987年比Hjerten建立了毛细管等电聚焦(CIEF),Cohen ...
放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。 一、竞争性RIA,又称传统RIA 主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag +已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物AgAb+未知抗原与抗体复合物Ag Ab+游离标记抗原Ag (去除)(未知抗原多,标记抗原与定量抗体结合的复合物就少,表现为负相 ...
磁性微粒子固相RIA是最近发展起来的一类新型RIA,它克服了目前市售常规试剂检测程序多,流程长的缺点,已列为第五代RIA技术。本文就试剂制备,免疫反应模式、技术特征和对比分析及应用前景等方面作简要 评述。
HP4890D气相色谱仪系统通过了各种严格的测试和检验,以保证其符合各项安全和电磁性能方面的工业标准。另外,它还通过了一项测试,即确保在电压波动、温度、湿度和震动等超出规定范围时,系统可保持正常的运行。HP4890D GC是由在现代气相色谱发展史上曾享誉全球的HP5890 GC发展创新而推出的。HP4890D GC继承并发展了HP5890 GC杰出的色谱性能和可靠耐用的特点,是实验室日常分析的理想 ...