一、原理 淀粉酶(amylase)包括几种催化特点不同的成员,其中α-淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端,生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉浆的粘度下降,因此又称为液化酶;β-淀粉酶每次从淀粉的非还端切下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶;葡萄糖淀粉酶则从淀粉的非还原端每次切下一个葡萄糖。淀粉酶产生的这些还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕红色的3-氨基-5-硝基 ...
一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2,从而抑制了甲腙的形成。于是 ...
你制作的胶体金试纸保质期有多长,1年,2年?难道我要将试纸放置两年以后才知道质量是否过关? 为了解决保质期的问题,我们设计了将试纸放置于高温环境下烘烤的加速老化试验。然而这个实验到目前为止都没有明确的技术资料,大多数文献资料里面只有"37度2个月=常温下2年","45度一个 ...
过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中,其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系,故常加以测定。 一、原理 过氧化氢酶(catalase)属于血红蛋白酶,含有铁,它能催化过氧化氢分解为水和分子氧,在此过程中起传递电子的作用,过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。在反应系统中加入一定量(反应过量)的过氧化氢溶液,经酶促反应后,用标准高锰酸钾溶 ...
一、原理 植物进行呼吸时放出CO2,计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量,即为该样品的呼吸速率。呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收,实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液,从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量。 二、材料、设备仪器及试剂 (一)材料:发芽的小麦种子或其它萌发的种子。 (二)仪器设备:1.呼吸测定装置;2.天平;3.钟表;4.酸式 ...
一、原理 微量检压计不仅用来研究有机体或部分组织的呼吸作用和发酵作用,而且也可以研究有关O2与CO2及其它气体交换的反应。如光合作用,酶的活性等。测压法的原理是在固定体积并保持恒温的密闭系统中,气体产生或消失的总量,可以利用气体定律计算求得。 二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料:待测的小麦、水稻萌发种子。 (二)仪器设备:1. 瓦布格呼吸计(微量呼吸检质计);2. 移液管;3. 量筒;4 ...
一、原理 叶绿体色素在照光时能辐射出荧光。研究叶绿体色素荧光性质,有助于了解它的分子激发态,分子之间的能量传递以及分子在活体内的排列。叶绿体光诱导荧光强度的变化(以下简称可变荧光)是由于叶绿体吸收光能后,光能在转化和电子传递过程中受阻,能量不能正常的传递下去,而以荧光的形式释放出来,使荧光的强度增加。如果这种变化是由光的影响引起的,就叫光诱导的可变荧光。 当然,也可由其它条件诱导的可变荧光。在室 ...
1、Q:金标试纸条包被单抗,检测线上包被多抗来检测抗原是否可行呢,用饱和硫酸铵纯化多抗能达到要求吗?A:多抗不是很合适,有条件还是多用单抗。确实要用,多抗一般要过纯化柱纯化,以提高抗体的特异性。 2、Q:我需要流速为135s的NC膜,可厂家都是孔径,而且0.45微米的多,请问大家我的应该买多大孔径的?A:NC膜大都是以每4cm膜水的层析流速多少秒来定义孔径的,根据流速的快慢常用的有90,120,1 ...
近日有许多朋友询问胶体金试纸如何记录和分析试验结果,每次试验面对的都是使用肉眼判断条带颜色深浅,不同的人对结果的判断都不相同,容易出现误判,平行试验结果无法对比。且试验结果无法直接记录,不能留下有说服力的试验结果证明,就这个问题,我将谈我的一些看法。以下讨论仅针对普通胶体金试纸,荧光,化学发光,磁粒子等特殊标记物必然需要读条仪器。 一、现状 很多学术论文中对胶体金试验的结果记录通常是罗列简单的阴性 ...
红外线CO2气体分析仪(IRGA)工作原理:许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处,其吸收峰分别在2.69μm、2.77μm、4.26μm和14.99μm处,其中只有4.26μm的吸收带不与H2O的吸收带重叠,红外仪内设置仅让4.26μm红外光通过的滤光片,当该波长的红外光经过含有CO2的气体时,能量就因CO2的吸收而降低, ...
核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(ribulose-1,5-bisphosphatecarboxylase,RuBPCase)是光合作用碳代谢中的重要的调节酶,是植物中最丰富的蛋白质,主要存在于叶绿体的可溶部分,总量约占叶绿体可溶蛋白50%~60%。本实验用分光光度法测定酶的羧化能力。 一、原理: 在RuBPCase的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分 ...
一、原理 希尔反应(Hill reaction)是绿色植物的离体叶绿体,在光下分解水放出氧气同时还原电子受体的反应。氧化剂2,6-二氯酚靛酚是一种蓝色染料,接受电子和H+后被还成无色,可以直接观察颜色的变化也可用分光光度计还可以对还原量进行精确测定。 二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料:菠菜或其它绿色植物新鲜叶片。 (二)仪器设备:1. 研钵;2. 石英砂;3. 小试管;4. 试管架;5. ...
一、原理 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测 ...
绿色植物的叶绿体是光合作用进行的场所,叶绿体色素是进行光合作用光能吸收、传递与转换的主要物质,与作物光合作用及产量形成关系密切。不同作用作物叶绿素的含量与组成有差异,栽培措施、营养状况等条件的改变都会通过影响叶绿体色素的状况而影响光合。了解叶绿体色素的组成与含量,无论对于深入理解光合作用的本质,还是对于作物育种与制定合理的栽培措施都具有重要意义。 一、原理 真空渗入法可使叶肉细胞间隙充满水分而下 ...
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。 一、 原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱 ...
一、 原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时,则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的,可以根据公式算出其渗透压,取其负值,为溶液的渗透势(ψπ),即代表植物的水势(ψw)(waterpotential)。 ψw=ψπ=-P=-CRT(大气压) 二、材料、仪器设备及 ...
植物组织中的水分以自由水和束缚水两种不同的状态存在。自由水与束缚水含量的高低与植物的生长及抗性有密切关系。自由水/束缚水比值高时,植物组织或器官的代谢活动旺盛,生长也较快,抗逆性较弱;反之,则生长较缓慢,但抗性较强。因此,自由水和束缚水的相对含量可以作为植物组织代谢活动及抗逆性强弱的重要指标。 一、原理: 自由水未被细胞原生质胶体颗粒吸附而可以自由移动、蒸发和结冰,也可以作为溶剂。束缚水则被细 ...
序 胶体金快速诊断试剂是近年来的生物产业化最成功的产品之一,现在很多生物学者纷纷抛弃分子基因等艰涩的基础性理论研究,而转向该应用领域,利用自己实验室的设施人员开始开发胶体金快速诊断产品,为自己在创业初期淘得第一桶金。 我在该行业工作了比较长的一段时间,和很多的同行都有过接触,在此写一点自己对该行业的感受。个人观点不对之处,希望DX指正。 前言 目前生物领域内基本上是以研究为目的的基础理论工作。能顺 ...
1、标记时pH对标记的影响。 根据标记物的性质,可以将标记物划分为三类。 其一为pH非依赖型,即标记时无论pH如何,您都能得到良好的标记结果,前提是您不能破坏胶体金的胶体状态。此类标记物仅仅是通过疏水相互作用与胶体金相结合,如PEG.这也是调节pH时首先要采用PEG保护电极的原因,当然,如果您使用的是充胶的电极,那您就不必这样麻烦了。呵呵,真希望所有的标记物都象P ...
斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA),又名滴金免疫测定法(简 ...

