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核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶活性的测定

核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(ribulose-1,5-bisphosphatecarboxylase,RuBPCase)是光合作用碳代谢中的重要的调节酶,是植物中最丰富的蛋白质,主要存在于叶绿体的可溶部分,总量约占叶绿体可溶蛋白50%~60%。本实验用分光光度法测定酶的羧化能力。 一、原理: 在RuBPCase的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分 ...

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希尔反应的观察

一、原理 希尔反应(Hill reaction)是绿色植物的离体叶绿体,在光下分解水放出氧气同时还原电子受体的反应。氧化剂2,6-二氯酚靛酚是一种蓝色染料,接受电子和H+后被还成无色,可以直接观察颜色的变化也可用分光光度计还可以对还原量进行精确测定。 二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料:菠菜或其它绿色植物新鲜叶片。 (二)仪器设备:1. 研钵;2. 石英砂;3. 小试管;4. 试管架;5. ...

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叶绿素含量的测定

一、原理 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测 ...

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用真空渗入法测定环境因子对光合作用的影响

绿色植物的叶绿体是光合作用进行的场所,叶绿体色素是进行光合作用光能吸收、传递与转换的主要物质,与作物光合作用及产量形成关系密切。不同作用作物叶绿素的含量与组成有差异,栽培措施、营养状况等条件的改变都会通过影响叶绿体色素的状况而影响光合。了解叶绿体色素的组成与含量,无论对于深入理解光合作用的本质,还是对于作物育种与制定合理的栽培措施都具有重要意义。 一、原理 真空渗入法可使叶肉细胞间隙充满水分而下 ...

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根系活力的测定[TTC法]

植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水本。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。 一、 原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲腙,生成的三苯甲腙比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱 ...

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植物组织水势的测定(小液流法)

一、 原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时,则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的,可以根据公式算出其渗透压,取其负值,为溶液的渗透势(ψπ),即代表植物的水势(ψw)(waterpotential)。 ψw=ψπ=-P=-CRT(大气压) 二、材料、仪器设备及 ...

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植物组织中自由水和束缚水含量的测定

植物组织中的水分以自由水和束缚水两种不同的状态存在。自由水与束缚水含量的高低与植物的生长及抗性有密切关系。自由水/束缚水比值高时,植物组织或器官的代谢活动旺盛,生长也较快,抗逆性较弱;反之,则生长较缓慢,但抗性较强。因此,自由水和束缚水的相对含量可以作为植物组织代谢活动及抗逆性强弱的重要指标。 一、原理: 自由水未被细胞原生质胶体颗粒吸附而可以自由移动、蒸发和结冰,也可以作为溶剂。束缚水则被细 ...

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胶体金快速诊断试剂的市场情况略谈

序 胶体金快速诊断试剂是近年来的生物产业化最成功的产品之一,现在很多生物学者纷纷抛弃分子基因等艰涩的基础性理论研究,而转向该应用领域,利用自己实验室的设施人员开始开发胶体金快速诊断产品,为自己在创业初期淘得第一桶金。 我在该行业工作了比较长的一段时间,和很多的同行都有过接触,在此写一点自己对该行业的感受。个人观点不对之处,希望DX指正。 前言 目前生物领域内基本上是以研究为目的的基础理论工作。能顺 ...

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胶体金标记的影响因素

1、标记时pH对标记的影响。 根据标记物的性质,可以将标记物划分为三类。 其一为pH非依赖型,即标记时无论pH如何,您都能得到良好的标记结果,前提是您不能破坏胶体金的胶体状态。此类标记物仅仅是通过疏水相互作用与胶体金相结合,如PEG.这也是调节pH时首先要采用PEG保护电极的原因,当然,如果您使用的是充胶的电极,那您就不必这样麻烦了。呵呵,真希望所有的标记物都象P ...

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斑点金免疫渗滤试验

斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA),又名滴金免疫测定法(简 ...

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FIXATION OF PLANT METAPHASE CHROMOSOMES

Reagents (a) Metaphase arresting agents: Choose one of the following (Note 2) and shake vigorously to aerate before putting in living plant material; except for ice water the solution should be ...

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Measurement of Carbon Fixation Rates in Leaf Samples

Generation of a Light Curve To address the hypothesis concerning photosynthetic efficiency it is necessary to expose sun and shade leaves to a range of light intensities long enough for them to fix s ...

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蛋白质组学在植物科学研究中的应用

1 植物群体遗传蛋白质组学 1.l 遗传多样性蛋白质研究 基于基因组学的一些遗传标记,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequence Repeat)、ISSR(Inter-Simple Sequence Repeat)等,已经广泛 ...

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植物病毒病检测方法

植物病毒病是农业生产上一种重要病害,严重影响农作物的产量和质量 目前还没有1种治疗效果较理想的药剂,对发病植株做到早期诊断及提前检测就显得尤为重要。植物病毒学历经近百年的发展,植物病毒的检测方法与手段也在不断发展与改进。常用的方法有侵染力测定法、血清学方法、电子显微镜计数和分子生物学法等。 1.4.1侵染力测定法 侵染力测定法是将病毒样本接种在植物上,根据侵染力的大小定量。它的灵敏度在所有定量 ...

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线粒体的提取与观察

线粒体是细胞中重要的细胞器,存在于绝大多数生活细胞中,它的主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。正由于这样,对线粒体膜,呼吸链酶及线粒体DNA等成分的结构,功能以及物理化学性质的研究已经成为细胞生物学研究中的重要课题,所以提取线粒体的技术已经成为线粒体研究中必不可少的手段,线粒体大量存在于代谢旺盛的细胞中,如动物的心肌,肝,肾等器官和组织的细胞中,大量置备线粒体就是从这些器官组织中提取,当 ...

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植物营养器官外部形态与内部结构的观察

一、实验目的 1.掌握根、根尖的结构,并对根的初生和次生结构进行比较。 2.掌握茎的结构,并对单子叶植物茎的初生结构、以及双子叶植物茎的初生和次生结构进行比较。 3.掌握叶的结构,并对单子叶和双子叶植物叶的结构进行比较。 二、试剂与器材 1.材料:砂培向日葵幼苗、砂培小麦幼苗、葱根横切永久制片、蚕豆根及叶的横切永久制片、棉花根横切永久制片、向日葵茎的横切永久制片、玉米茎横切永久制片、椴树茎 ...

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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)

一、目的: 1.学习SDS—PAGE测定蛋白质分子量的基本原理。   2.掌握垂直板型电泳的基本操作技术。 二、原理: 由实验十五中已知,蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。 1967年,Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺凝胶系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate, ...

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气相色谱仪检测器的维护

在色谱操作过程中,检测器有时受固定相流失及样品中的高沸点成分、易分解及腐蚀性物质的作用而被沾污,以至不能正常进行工作,因而提出了如何清洗检测器的问题。若沾污的物质仅限于高沸点成分,通常可将检检器加热至最高使用温度后,再通入载气,就可清除。使用有放射源的检定器时加热要多加小心,例如通常以氚源作成的电子捕获检定器一般都不能超过200度,此外还应注意加热的温度不能损坏检测器的绝缘材料。如用加热法不适宜, ...

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气相色谱常见故障检查诊断

气相色谱种类很多,性能也各有差别。主要包括两个系统。即气路系统和电路系统。气路系统主要有压力表、净化器、稳压阀、稳流阀、转子流量计、六通进样阀、进样器、色谱柱、检测器等;电子系统包括各用电部件的稳压电源、温控装置、放大线路、自动进样和收集装置、数据处理机和记录仪等电子器件。 要分析和判断色谱仪的故障所在,就必须要熟悉气相色谱的流程和气、电路这两大系统,特别是构成这两个系统部件的结构、功能。色谱仪的 ...

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气相色谱常识问答

一、气相色谱法有哪些特点? 答:气相色谱是色谱中的一种,就是用气体做为流动相的色谱法,在分离分析方面,具有如下一些特点:1、高灵敏度:可检出10-10克的物质,可作超纯气体、高分子单体的痕迹量杂质分析和空气中微量毒物的分析。  2、高选择性:可有效地分离性质极为相近的各种同分异构体和各种同位素。  3、高效能:可把组分复杂的样品分离成单组分。  4、速度快:一般分析、只需几分钟即可完成 ...

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