一、原理 DNA在碱性的溶液中带有负电荷,因此,在电场作用下朝正极移动。在琼脂糖凝胶中电泳时,由于琼脂糖凝胶具有一定孔径,长度不同的DNA分子由于所受凝胶的阻遏作用大小不一,迁移的速度不同,从而可以按照分子量大小得到有效分离。溴化乙锭可插入到DNA分子的双链中。在紫外光的照射下,插入溴化乙锭的DNA呈橙红色荧光,所以溴化乙锭可以作荧光指示剂指示DNA含量和位置。 二、材料、仪器设备及试剂 (一 ...
1.用不同方法诱导细胞调亡后,取106调亡细胞,置1.5ml离心管中,用PBS洗涤一次。在微量离心机上全速离心5秒钟,去上清液。加入100μl含5mol/L异硫氰酸胍,100mmol/L 2-巯基乙醇的25mmol/L枸橼酸钠缓冲液pH7.0,在旋涡混悬器上混悬20秒钟,破坏细胞,变性蛋白质。 2.加入50μl含7.5mol/L醋酸氨和0.8mg/ml糖原的水溶液,混匀;加入300& ...
1、【仪器名称】:16通道多导生理记录仪。 2、【仪器型号】:MP150型。 3、【生产厂家】:美国BIOPAC公司生产。 4、【检测适用范围 】:选购放大器及相应换能器可以完成以下生理信号测量:心电、脑电、肌电、眼电、胃肠电、诱发电位、神经电位、细胞电位、有创血压、无创血压、dP/dt、体温、肌张力、呼吸波、呼吸流速、组织血流速度、血管血流量、氧气含量、二氧化碳含量、血氧饱和度、无创心输出量、光 ...
制备电泳与普通的分析电泳在原理上没有什么不同,只是用的凝胶厚些、加的样品量大些罢了。因为制备电泳的胶厚,电泳时有个散热问题,电泳后还有把所要分离的蛋白从胶中洗脱下来的问题。为了提高制备电泳的效率,有些公司(如BIO-RAD)生产了专为制备电泳设计的电泳槽。我们的实验用非变性条件下的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备GFP,在整个的电泳过程中GFP始终维持其天然活性。电泳结束后,不用染色处理,在紫光照射下可以 ...
一、目的 1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程 3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程 二、实验原理 1、电泳原理及影响电泳的主要因素 带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动,这种现象称为电泳。用电泳技术分离、分析蛋白质、酶、核酸等生物大分子,有较高的分辨率,目前已成为生物科学研究中必不可少的手段之一。 带电离子在电场中的泳动速度(1)和迁移率(泳动度)( ...
摘要: 分析粉状食品结块的机理,利用核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)技术研究食品的结块与玻璃态转变温度、化学组成之间的关系,为延长食品的保质期提供理论基础。 食品结块问题在食品保藏中是一个急待解决的重要课题,而且在相关行业如:饲料、医药等,结块问题也普遍存在,它是影响产品质量和使用价值的一个重要因素。食品结块会产生很多不良现象,如:溶解度下降、油脂氧化程度提 ...
本文叙述了目前免疫分析技术的发展趋势,酶、荧光以及化学发光等免疫分析的发展及最新技。 Yalow和Berson建立了RIA为生物医学分析开创了一个新的领域,从而使体内超微量活性物质的分析获得了飞跃发展,在医学和生物学领域得到广泛应用。由于RIA具有灵敏度高,特异性强,测量简单,成本低等优点,RIA具有一定的生命力。但因为它必须使用放射性核素,需要防护和防止污染;标记物有效使用时间短;难以实现操作和 ...
摘要: 介绍了核磁共振(NMR)测试技术进展,着重介绍固体高分辨核磁共振和二维核磁共振技术的进展及它们在高分子材料领域的主要应用举例。 引言 核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)现象是1946年由哈佛大学的E.M.Purcell和斯坦福大学的F.Bloch所领导的两个小组,用不同的方法观察到的。他们二人由于这项重大发现,共同分享了1952年诺贝尔物理学奖。 最初 ...
主要内容 第一篇 电化学发光免疫测定 一、化学发光反应 (一)氨基苯二酰肼类参加的CL反应 (二)口丫啶酯参加的CL反应 (三)Dioxatene参加的CL反应 (四)电化学发光反应 二、电化学发光免疫测定 (一)试管内的化学反应 (二)流动池中的电化学发光反应 三、Elecsys系列全自动电化学发光免疫分析 ...
摘要: 本文就NMR与化学应用有密切关系的若干前沿新进展进行述评,内容包括NMR灵敏度的超增强,固体或表面化学反应的NMR跟踪以及简单分子体系中的超常NMR信号。这些方面分别涉及到NMR谱学技术的发展,新的应用领域的开拓及新的实验现象的阐明。 1995年是凝聚态核磁共振(NMR)发现50周年。NMR半个世纪的发展历史,向世人雄辩地证明了NMR在当代科学研究中不可替代的重要地位。NMR之所以能在当代 ...
【摘要】电致化学发光作为一种分析技术,不仅可用于化学分析,而且正在被越来越多地用于生物检测和传感技术中。随着该分析技术与免疫检测技术生化固定化技术和微细加工技术等的相互融合,电致化学发光生物检测技术具有了更高的精度、分辨率和更广的应用范围。 【关键词】电致化学发光 生物检测 固定 免疫分析 微细加工 评述 一、引 言 电致化学发光生物分析是最近发展起来的一种新型的分析方法,是化学发光、电化学、生物 ...
摘要: 核磁共振(NMR)技术近年来发展突飞猛进,令人目不暇接。本文避开深奥的理论和技术,着重于新技术所能解决的问题。力争为应用工作者描绘一幅NMR发展现状的粗略轮廓。 前言 如果有人问最近几年在分析测试领域哪种技术发展最快的话,应首推NMR。假如有兴趣跟踪世界上该领域的进展,那么每一天几乎都有激动人心的事发生,新技术就象魔术一样不断涌现,来解决当今化学、医学和生物学等领域遇到的难题,去开拓原先难 ...
1968年Miles和Hales建立了利用核素标记的抗体检测抗原的放射分析法,为了与放射免疫分析区别,故称免疫放射分析技术(immunoradiometric assay,IRMA)。由于它应用核素标记抗体作为示踪剂,在反应体系中加入过量的抗体,待测抗原(或标准品)与和核素标记抗体进行全量反应,故亦称非竞争性免疫分析法。IRMA与RIA相比较有以下特点 1、IRMA反应系统中应用的标记物为免疫球蛋 ...
摘要: 核磁测井与实验室NMR研究的条件显著不同,要使核磁测井有足够的信噪比,关键问题是选择合适的设计及测量方案。核磁测井仪中多采用预极化方式或自旋回波法,所用的磁场已从最初的地磁场演变到现在的各种人工磁场,所用的测量方式要与采用的磁场设计相适应。现代核磁测井的测量技术已基本与实验室技术一致,核磁测井仪获取信息的能力也有了很大发展。 引言 石油测井中,到目前为止人们一直为不能直接获得束缚水饱和度、 ...
一、原理 在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。 二、材料与方法 1、材料 (1)动物腹水 (2)辛酸(caprylic acid CA),化学纯 (3)硫酸钱,分析纯 (4)SPA Sepharose 4FF亲 ...
应用硫酸铵盐析及DEAE-纤维素层析法提纯化的IgG,不仅操作复杂、需时较长,处理过程中样品体积大大增加,而且透析时变性严重,容易引起抗体效价降低等。为了克服这一不足,特别是当大量提取IgG时,则往往采取下列的简易办法。 一、DEAE-纤维素直接提取法 取样品直接过DEAE-纤维素柱。下面介绍的是最为简单的烧杯法。 1、以一定数量的DEAE52放入烧杯中,加入0.01Mol/L pH8.0PB缓冲 ...
一般情况下健康动物对药物的耐受量比有病的动物要大,所以有病动物比较易于中毒死亡。 动物潜在性感染,对实验结果的影响也很大。如观察肝功能在实验前后变化时,必须要排除实验用的家兔是否患有球虫病,不然家兔的肝脏上已有很多球虫囊,肝功能必然发生变化,所测结果波动很大。 健康动物对各种刺激的耐受性一般比不健康、有病的动物要大,实验结果稳定,因此一定要选用健康动物进行实验,患有疾病或处于衰竭、饥饿、寒冷、炎热 ...
摘要: 从应用mq-20核磁谱仪测定聚丙烯等规指数的步骤开始,展开一系列试验,并将试验结果与国标(GB/T 2412-1980)测试下的结果作对比,找出影响其测试准确性的主要因素。 在聚丙烯的生产过程中,等规指数是一常用且重要的物性指标,是表征其加工性能及应用的重要指标。一般等规指数高的聚丙烯,其结晶度亦高。 传统的化学溶剂法(GB/T 2412-1980)测定等规指数,仅限于对聚丙烯粉料的测定, ...
以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必须高度纯化并具有特异性,不应含有非抗体的血清蛋白。因此,为了浓缩和提高抗体的效价,或为制备免疫球蛋白特异性抗体时,通常也需要分离和纯化免疫球蛋白。γ球蛋白(IgG)是血清免疫球蛋白的主要成分,约占全部免疫球蛋白的7 ...
色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特(Tswett)在1906 年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的,色谱法(Chromatography)因 ...