一、流式细胞仪的检测范围 1.流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、R NA 含量、蛋白质含量。 2.流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。 二、流式细胞仪的临床应用 1.流式细胞术在肿瘤学中的应用:流式细胞术可以检测肿瘤细胞增殖周期、检测肿瘤细胞 ...
流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点: ①标本只要是单细胞即可用于分析,如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等,实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也 ...
流式细胞术(Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机技术的发展,大大提高了检测速度与统计精确性,而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数,为生物医学与临床检 ...
垂体前叶分泌的促甲状腺激素(Thyroid Stimulating Hormone TSH)的相对分子质量约为25000–28000,与腺垂体分泌的卵泡刺激激素(Follicle Stimulating Hormone FSH)、黄体生成素(Luteinizing Hormone LH)以及胎盘分泌的人绒毛膜促性腺激素(human Chorionic Gonadotropin hCG) ...
时间分辨荧光免疫分析(Timeresolved FluoroimmunoassayTRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。 解离增强镧系元素荧光免疫分析 解离增强镧系元素荧光免疫分析(Dissociation Enhance ...
【摘要】本文研究时间因素对应用CharmⅡ放射免疫分析方法测趸磺赣类药物残留试验的影响,试验结果说明如果延长或缩短操作时间,将影响检测结果,因此在操作中要快速,保证检测的准确性。 【关键词】放射免疫分析 磺胺类测定 时间 【中图分类号】R155.51&nb ...
1、放射性核素衰变表 3 H 35 S 32 P 125 I ...
(一)原理 IRMA是采用过量的标记抗体与待测抗原的非竞争性结合反应,然后加入固相的抗原吸附剂以结合游离的标记抗体,离心去沉淀,测定上清液中的放射性强度,从而推算出待测样品的抗原含量。 (二)放射免疫检测与免疫放射检测(即IRMA与RIA)的区别 见表13-4。 表13-4 IRMA与RIA的区别 ...
放射免疫分析是由Yalow和Berson于1960年创建的标记免疫分析技术。由于标记物放射性核素的检测灵敏性,本法的灵敏度高达ng甚至pg水平。测定的准确性良好,ng量的回收率接近100%。本法特别适用于微量蛋白质、激素和多肽的定量测定。 一、基本原理 放射免疫分析的基本原理是标记抗原(Aundefined)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)的竞争结合反应。它的反应式为: 在一反应系统中,作 ...
凝胶过滤实验方法 1.凝胶的选择 根据层析物质分子量的大小选择不同型号的凝胶,如除盐和除游离的荧光素,则可选用粗、中粒度的G25或G50,G250多用于分离蛋白质单体,G200多用于分离蛋白质凝胶聚合体等。 2.凝胶的预处理 称取适量的凝胶加入过量的缓冲液在冰箱(或室温)中充分膨胀,或在沸水中煮,膨胀时间应根据不同型号的凝胶而定。 凝胶量与型号和层析柱大小与规格及凝胶用量 ...
1.凝胶层析操作简便,所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。 2.分离效果较好,重复性高。最突出的是样品回收率高,接近100%。 3.分离条件缓和。凝胶骨架亲水,分离过程又不涉及化学键的变化,所以对分离物的活性没有不良影响。 4.应用广泛。适用于各种生化物质,如肽类、激素、蛋白质、多糖、核酸的分离纯化、脱盐、 ...
凝胶是一种多孔性的不带表面电荷的物质,当带有多种成分的样品溶液在凝胶内运动时,由于它们的分子量不同而表现出速度的快慢,在缓冲液洗脱时,分子量大的物质不能进入凝胶孔内,而在凝胶间几乎是垂直的向下运动,而分子量小的物质则进入凝胶孔内进行“绕道”运行,这样就可以按分子量的大小,先后流出凝胶柱,达到分离的目的。 具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、 ...
1,透析袋浓缩法 利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后,可放入温箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。 主要用于更换蛋白质的缓冲液,有透析袋即可,不需要特 ...
由于所含营养物质的限制,单一的饲料原料无法全面满足动物的营养需求,这就应选取不同的饲料原料,按各种动物的营养要求及每种原料的营养物质含量互相搭配,使其所提供的各种营养素均符合饲养标准所规定的数量,这样的设计步骤称为日粮配合。但在实际运用中是按日粮的饲料百分比配制出大量混合饲料,即按生产目的相同的动物群体配制大批混合饲料,这样的饲料称为饲粮。 在畜牧业及实验动物行业,习惯上将动物所用的饲粮称为配合饲 ...
动物所需营养素的种类及影响营养需要量的因素 实验动物和其他动物一样所需的营养物质根据化学组成的不同共有约50种,就其主要功能可大略分为以下三大类: 作为能量来源:脂肪、碳水化合物、蛋白质; 作为身体构成成分:蛋白质、矿物质; 调节身体功能:维生素、矿物质。 各种实验动物对以上所提到的营养素的需要量是不同的,除受到遗传因素影响而有存在的明显的种间差异外,还因性别、年龄、生理状况而不同。 1、动物维持 ...
1、玉米 玉米具有适口性好、价格低廉的特点,属于能量饲料,是饲料业的首选原料。黄色玉米籽实中还含有维生素A元的色素即隐黄素,数量虽然不多(约1PPm)但与其他籽实类饲料相比较,仍不失为优点。由于玉米含有较高的淀粉,故能值较高。玉米的蛋白质中赖氨酸和色氨酸等几种必需氨基酸含量较低,蛋白品质稍差,在实际使用当中应与其他含蛋白质较高的原料(如豆饼)相混合,而不能单独使用。 玉米含有较多脂肪,且其中不饱和 ...
饲料的分类 实验动物的饲料原料以植物为主,为了弥补蛋白质的不足,也采用少量的动物性饲料。 1、粗饲料 包括干草类及绝干物质中粗纤维含量≥18%的糟渣类、农副产品类树叶类等。 2、青绿饲料 天然水分含量≥60%的青绿饲料类、树叶类及非淀粉质的块根、 块茎瓜果类。 3、青贮饲料 用新鲜的天然植物性饲料调制成的青贮饲料及加有适量糠麸或其他添加物的青贮饲料。 ...
人们把生物从外界摄取维持自身生命所必需的物质及其消化、吸收和排泄过程称为营养(nutrition)。而人类饲喂给的营养物质称为饲料(feedstuff)对食物或饲料中所包含的各种营养物质则统称为营养素(nutrients)。 自然界中的各种物质均由化学元素所组成,在已知的一百多种元素中,至少有26种为动物所必需,这些元素绝大部分以化合物的形式存在。目前已清楚了解到,动物需要的营养物质达数十种,可以 ...
1.毕赤酵母表达常用溶液及缓冲液的配制 1.1 各种母液的配制 1undefinedYNB:(含有硫酸铵、无氨基酸的13.4%酵母基础氮源培养基) 4℃保存。34g酵母基础氮源培养基(无硫酸铵)+100g硫酸铵,溶于1000ml水中,过滤除菌。 50undefinedB:(0.02%生物素 Biotin) 4℃保存 保存期为1年。20mg的生物素溶于100ml水中,过滤除菌。 10undefinedH:(0.4%Histidi ...
1、在病原生物学领域中的应用 甲醇酵母表达系统经过20多年的发展,已成为较完善的外源基因表达系统。应用该系统已高效分泌表达了乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、肿瘤坏死因子(TNF)、表皮生长因子(EGF)、人血清白蛋白、蛋白酶抑制剂、膜蛋白等。。。在国内,甲醇营养型酵母表达系统主要应用在病 原生物学领域,如:SMAD4 (肿瘤抑制基因)蛋白、痘苗病毒生长因子(VGF)戊型肝炎病毒结 构区ORF2蛋 ...