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问：BAF cell的来源是什么？有什么特性和用途呢？ 答：ATCC上没有你所谓的BAF cell，DSMZ上有两种BAF cell，如下： Cell line:BA-F8 Cell type:mouse hybridoma(anti-rat fiber/myosin) Origin:this hybridoma cell line was described to secrete a mouse ...

问：我打算检测线粒体膜电位，大鼠肺移植后，如何分离肺泡上皮细胞呢？ 答：步骤如下： 1、取得完全无血液残留的肺脏： 实验前将大鼠全身血液放净，取得完全无血液残留的肺脏。 2、消化肺组织： 常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶，现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定，有效作用时间短暂，容易自我降解等问题。Dobbs ...

显微镜按工作媒介可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。本编介绍这两类显微镜的工作原理和适用的样品制作方法。 第一节 光学显微镜工作原理 1.1 人眼睛的分辨率 人的眼睛是目视光学仪器的最终接收器，这里仅研究与我们有关的内容人眼睛的分辨率。眼睛能分辨开两个很靠近点的能力称为“眼睛分辨率”，这与眼睛的结构有关。以下从三个方面来讨论人 ...

1.DMSO DMSO是二甲基亚砜， 用途广泛。用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对皮肤有极强的渗透性，有助于药物向人体渗透。也可作为农药的添加剂。也是一种十分重要的化学试剂; DMSO也是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性; ...

显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。 —、光学显微镜 （一）、普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便（图 ...

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Introductory Concepts When specimens living or non-living organic or inorganic absorb and subsequently re-radiate light we describe the process as photoluminescence. If the light emission persists for ...

共聚焦显微镜的优势： 1、高分辨率 16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光，共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及，这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。 2、断层扫描 共聚焦采取电动马达自动控制步距，使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴上成像的XZt、YZt的操作变得简单易行。而且断层扫描的优势明白人一想就 ...

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低，传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构（细胞或亚细胞结构）产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细微结构的成像不够清晰。激光共聚焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源，在荧光标记标本的焦平面 ...

初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱（37℃ ...

原核生物基因表达的调控主要在转录水平上进行，而真核生物由于RNA较为稳定，所以除了存在转录水平的调控以外，在翻译水平上也进行各种形式的调控。 在蛋白质生物合成的起始反应中主要涉及到细胞中的四种装置这就是:1.核糖体它是蛋白质生物合成的场所;2.蛋白质合成的模板mRNA它是传递基因信息的媒介;3.可溶性蛋白因子这是蛋白质生物合成起始物形成所必需的因子;4.tRNA它是氨基酸的携带者。只有这些装置和谐 ...

近几年来，随着分子生物学、遗传学及其新技术的迅速发展，真核生物基因表达(geexprc~ioB)的问题已有了突破性的进展。认为真核细胞基因的表达，受到多层次的调控，诸如转录，转录后，翻译、翻译后等水平。而不同基因的表达受到不同水平的调控，其中最为主要的就是转录水平的调控。 转录水平的调控涉及到顺式作用元件(cls acting elemeat)、反式作用因子(t rans acting facto ...

1、真核基因组的复杂性 与原核生物比较，真核生物的基因组更为复杂，可列举如下。 （1）真核基因组比原核基因组大得多，大肠杆菌基因组约4×106bp，哺乳类基因组在109bp数量级，比细菌大千倍；大肠杆菌约有4000个基因，人则约有10万个基因。 （2）真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质，被包裹在核膜内，核外还有遗传成分(如线粒体DNA等)，这就增加了基因表达调控的层次和复杂性。 ...

1、pCMVp-NEO-BAN载体 特点: 该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对，主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成， 在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。更重要的是，由于该真核细胞表达载体中抗neo基因存在，转染细胞后，用G418筛选，可建立稳定的、高表达目的基因的细胞株。 插入外源基因的克 ...

本篇中主要介绍生化方法及物理方法（电穿孔法） 一、生化方法 1、磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 （1）转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%～7% CO2的37℃温箱孵育20～24 h。转染前1 h换液。 （2）按照下属方法制备磷酸钙-DNA沉淀：于5 ml灭 ...