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显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。 —、光学显微镜 （一）、普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便（图 ...

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Introductory Concepts When specimens living or non-living organic or inorganic absorb and subsequently re-radiate light we describe the process as photoluminescence. If the light emission persists for ...

共聚焦显微镜的优势： 1、高分辨率 16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光，共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及，这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。 2、断层扫描 共聚焦采取电动马达自动控制步距，使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴上成像的XZt、YZt的操作变得简单易行。而且断层扫描的优势明白人一想就 ...

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低，传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构（细胞或亚细胞结构）产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细微结构的成像不够清晰。激光共聚焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源，在荧光标记标本的焦平面 ...

初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱（37℃ ...

原核生物基因表达的调控主要在转录水平上进行，而真核生物由于RNA较为稳定，所以除了存在转录水平的调控以外，在翻译水平上也进行各种形式的调控。 在蛋白质生物合成的起始反应中主要涉及到细胞中的四种装置这就是:1.核糖体它是蛋白质生物合成的场所;2.蛋白质合成的模板mRNA它是传递基因信息的媒介;3.可溶性蛋白因子这是蛋白质生物合成起始物形成所必需的因子;4.tRNA它是氨基酸的携带者。只有这些装置和谐 ...

近几年来，随着分子生物学、遗传学及其新技术的迅速发展，真核生物基因表达(geexprc~ioB)的问题已有了突破性的进展。认为真核细胞基因的表达，受到多层次的调控，诸如转录，转录后，翻译、翻译后等水平。而不同基因的表达受到不同水平的调控，其中最为主要的就是转录水平的调控。 转录水平的调控涉及到顺式作用元件(cls acting elemeat)、反式作用因子(t rans acting facto ...

1、真核基因组的复杂性 与原核生物比较，真核生物的基因组更为复杂，可列举如下。 （1）真核基因组比原核基因组大得多，大肠杆菌基因组约4×106bp，哺乳类基因组在109bp数量级，比细菌大千倍；大肠杆菌约有4000个基因，人则约有10万个基因。 （2）真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质，被包裹在核膜内，核外还有遗传成分(如线粒体DNA等)，这就增加了基因表达调控的层次和复杂性。 ...

1、pCMVp-NEO-BAN载体 特点: 该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对，主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成， 在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。更重要的是，由于该真核细胞表达载体中抗neo基因存在，转染细胞后，用G418筛选，可建立稳定的、高表达目的基因的细胞株。 插入外源基因的克 ...

本篇中主要介绍生化方法及物理方法（电穿孔法） 一、生化方法 1、磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 （1）转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%～7% CO2的37℃温箱孵育20～24 h。转染前1 h换液。 （2）按照下属方法制备磷酸钙-DNA沉淀：于5 ml灭 ...

在真核细胞中表达蛋白的步骤比大肠杆菌复杂得多。首先要考虑选用什么载体。一般人们趋向于使用分泌表达载体，以便于蛋白的纯化。但有的蛋白并不适合于分泌表达，如一些胞质蛋白，非糖基化蛋白等。此外分泌表达的蛋白信号肽存在一个效率问题。有的蛋白即使存在信号肽，也不能分泌。并且有的分泌蛋白较易受到蛋白酶的降解。所有这些因素都需综合考虑。 1、克隆 选用合适 的内切酶把外源基因克隆于表达载体的多克隆位点。如果 ...

CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统，为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识，特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较，从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解 一、CHO细胞表达系统 1、优点 CHO细胞属于成纤维细胞，既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来，为降 ...

体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞，它操作简便、周期短收益大及表达产物稳定，但是表达基因的相对分子质量有限，不宜过大，且不能对表达产物进行一些翻译后加工 、修饰。真核细胞系统包括 CHO等哺乳动物细胞、酵母细胞和昆虫细胞等。昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)具有独特的生物学特性，日益受到人们的重视。 1、杆状病毒的生物学特性 杆状病毒只来源于无脊 ...

按照宿主细胞的类型，可将基因表达系统大致分为原核、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞表达系统。与其它系统相比，哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。从最开始以裸露DNA直接转染哺乳动物细胞至今的30余年间，哺乳动物细胞表达系统不仅已成为多种基因 ...

自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成，越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。 在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是原核表达系统，这也是目前掌握最为成熟 ...

Humana Press | ISBN: 1588293955 | 2 Edition - March 15 2006 | PDF | 496 pages | 6.7 MB This collection of readily reproducible Arabidopsis protocols has been updated to reflect recent advances in plan ...

The Handbook of Plant Nutrition provides a readily accessible source of current information on the nutritional requirements of significant crops. The editors provide an overview of plant nutrients and ...

基本信息 ·作者：江纪武 ·出版社：天津科学技术出版社 ·页码：1244 页码 ·出版日：2005年 ·格式：PDF ·大小：50.34M ·版次：1 ·装帧：精装 ·开本：16开 内容简介 本辞典共收载国内药用植物22450种，其中我国药用植物12000多种，国外药用植物 ...

代谢综合征以胰岛素抵抗为核心，高血压、高胰岛素血症、脂代谢紊乱为其主要表现，要想将这些病理因素加至动物体内制作经典的X综合征模型确实有难度。关于代谢综合征的动物模型的报道少之又少，更不要谈重复性和可操作性了。 1）模型建立方法：清洁级雄性ＳＤ大鼠20只，普通饲料喂养1周后，于清醒状态下(上午10～12ｈ)用尾套法(尾动脉血压计与心电图机相连)测大鼠的收缩压(ＳＢＰ)。术前禁食过夜，自由饮水用4%戊 ...