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The Solexa sequencing platform comprises all hardware software procedures and kitted reagents for DNA sequencing at the whole genome or repetitive regional scale. a) Preparation of full diversity libr ...

DNA测序原理和方法 DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。本实验介绍的是ABI PRISM 310型DNA测序仪的测序原理和操作规 ...

在分子生物学研究中，DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A，T，C，G四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从 ...

Introduction For over 25 years Applied Biosystems has been a pioneer in the field of genetic analysis by offering systems to address the expansion of genetic analysis applications and the evolving ne ...

ABI SOLiD sequencing is a form of DNA sequencing. DNA sequencing encompasses biochemical methods for determining the order of the nucleotide bases adenine guanine cytosine 5-methyl cytosine and thymin ...

ABI SOLiD sequencing is a form of DNA sequencing. DNA sequencing encompasses biochemical methods for determining the order of the nucleotide bases adenine guanine cytosine 5-methyl cytosine and thymin ...

technology: illumina sequencing technology This breakthrough platform is based on massively parallel sequencing of millions of fragments using our proprietary reversible terminator-based sequencing ch ...

One Fragment = One Bead = One ReadThe complete sequencing workflow of the Genome Sequencer FLX System comprises four main steps leading from purified DNA to analyzed results. These basic steps include ...

454 Life Sciences is a biotechnology company based in Branford Connecticut specializing in high-throughput DNA sequencing using a novel massively parallel sequencing-by-synthesis approach. 454 has exp ...

一、测序的基本原理： 测序的基本原理是Sanger末端终止法，在酶的作用下将原本是一条长达数百碱基的片断扩增成数百条片断，彼此间相差一个碱基。用电泳分离这些片断后，再通过测序仪将这些信号转变成峰图，从而最终形成客户所看到的测序序列和测序的峰图。 目前通用的扩增方式是通过PCR的方式进行的起源；其原理简述如下：PCR类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变 ...

DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物，4种dNTP（dATP、dGTP、dTTP和dCTP）。聚合酶用模板作指导，不断地将dNTP加到引物的3'-OH末端，使引物延伸，合成出新的互补DNA链。如果加入一种特殊核苷酸，双脱氧核苷三磷酸（ddNTP），因它在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键。如，存在ddCT ...

丁香园网友doctorwyz： 你们好。在我发这份帖子的时候我还在犹豫，是否应该将我的经验如实地告诉给大家，因为所谓的黑胶虫污染十分普遍，难以消除，很多人谈黑色变，我究竟有怎样的方法消灭黑胶虫，我的观点和方法是否能得到大家的认可，无论怎样，我相信我的经验绝对值得大家借鉴，会对那些困扰于所谓的黑胶虫污染的战友们有所帮助。 首先，世界上根本就没有什么黑胶虫，没有人知道黑胶虫的英文名字是什么，没有哪个权 ...

细胞培养中常见的污染情况总结如下: 常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应 ...

丁香园网友simon的观点： 支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物．约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性．可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构．其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似，但微绒毛电子密度比支原体小，且中央 ...

丁香园网友ronghong_2000的观点： 我们实验室最近一次的情况: 我们前后从上海细胞中心买了三批细胞，细胞刚到的时候，观察均生长良好，密度适中，培养液清亮，也没有见小黑点，但是对细胞传代以后就陆续出现多少不等的小黑点，有时候在一夜之间暴长，给培养液加庆大霉素，也无济于事，对贴壁细胞用生理盐水及D-hanks液冲洗七遍后见减少，但是随后几天又出现，刚开始怀疑操作有问题，但是由有经验的老师操作 ...

丁香园网友juventus2004的观点： 最近帮同学养细胞系，也看到以前有人发关于黑胶虫的贴，我是养心肌和海马神经元，感觉应该没有黑胶虫，有的话，请问有相关抗体或荧光标记吗？！ 个人认为，可能大家用得血清，而且没有处理好，导致的，我这里一直用国产血清，胎牛的，只要用得好，我就猛要求多买几瓶，虽然老师还是不让多买，如果大家用得进口的，当然好。 解冻血清，要先放入4度冰箱，而且要不时地摇晃，均匀的， ...

概述 凡混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染，细胞污染不能完全被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性。细胞污染根据污染源主要可以分为物理性，化学性和生物性污染。 物理性污染的来源、危害及预防：物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染。物理性污染通过影响细胞培养体系中的生化成分，从而影响细胞的代谢。培养环境中的物理因素，如温 度、放射线、振动、辐射(紫 ...

取一个注射器针头， 针头头部都会有一个斜面，把针尖背对斜面的一方弯曲成90度，记住只是针尖部位，形成一个小倒刺状。取爬片的时候把培养板放倾斜，可在板子下支一个东西，左手拿小镊子，右手拿针头。用针头头部弯好的倒刺，去勾爬片，很容易就会勾起来，而且不会伤片子。再用镊子把片子夹出来。速度比原来提高很多，取一个板子的爬片只要一分钟。 说的不是很清楚 画张图给大家吧 ...

丁香园网友kj7156084的培养方法： 本室的PC－3来自上海细胞生物所，种是ATCC的。 以10％FBS＋1640或F12培养，0.25%胰酶消化。塑料瓶或玻璃瓶都可以，当然，前者效果较好。复苏时最好用塑料瓶。 5－7天传一次（1：2），2－3天换一次液。尽量高密度传，因为PC－3细胞喜欢扎堆长，如果过了两三天细胞长得不均匀，可以消化离心一下。 传代后一到两天不要动它，要有耐心。 人前列腺癌 ...

丁香园网友yql1977的问题： 各位朋友，今天跟我师弟讨论一个问题，神经元OGD时是否要将缺氧液配成酸性的，我认为酸中毒和高钾血症等并发症是机体缺血后造成的后果，因此不必人为制造酸中毒，而且关于神经元OGD的大量文献也没有特意提及缺氧液的PH值。而我师弟认为在体情况下缺血时会伴有酸中毒及高钾血症，因此造模时应该造成酸中毒甚至高钾的环境，不过他做的是心肌，关于心肌的文献大部分都说明缺氧液PH在6. ...