全部

凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性，细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L,培养基可用Eagle（MEM）或DNEM培养，小牛血清浓度为10%~80%。在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮。

细胞档案要记录好，如组织来源、生物学特性（由形态、生长繁殖曲线、染色体核型情况、代谢特性、分化特性、病毒敏感性、致瘤特性、有无支原体和潜存病毒等）、培养基的要求、传代换液时间、扩增时间（分裂指数），细胞的特殊遗传标志（标记染色体）等。

消化培养法是采用前述的消化分散法，将妨碍细胞生长的细胞间质（包括基质、纤维等）去除，使细胞分散形成细胞悬液，然后分瓶培养。

新鲜组织易于培养成功，取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞，尽快入箱培养，若不能即时培养，应将组织浸泡于培养液内，于4℃存放。若组织块较大，应在清除表面血块、坏死组织、脂肪和结缔组织后，切碎于培养液内4℃存放，但时间不能超过24h。

病原检测方法及仪器是人感染猪流感防控的关键环节。实时荧光定量PCR分子诊断核酸检测技术在以往禽流感检测中被采用为国家标准并广泛使用。最新发布的美国CDC和我国卫生部法规都将实时荧光定量PCR确定为人感染猪流感实验室检测的确诊方法。

海洋微生物的培养基：Marine Ameba Medium

海洋微生物的培养基：Marine Agar with Sulfur(ATCC Medium 1922)

海洋微生物的培养基：Marine Agar with Naphthalene

海洋微生物的培养基：Marine Agar with κ- and λ-Carrageenan

海洋微生物的培养基：Marine Agar with l-Carrageenan

海洋微生物的培养基：Marine Agar with Biphenyl

海洋微生物的培养基：Marine Agar 2216(DSMZ Medium 604)

海洋微生物的培养基：Marine Agar (DSMZ Medium 123)

免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（western blot），它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。

Bradford 方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量。

定点诱变(DpnI法)：每条引物都要携带有所需的突变位点，引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。

链霉菌质粒DNA的小量提取：1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液（2%）中，37℃温育1hr 左右至完全溶菌，2、加入500μl碱性SDS溶液（0.3mol/L NaOH 2%SDS），立即振荡混合完全，

silica回收DNA片段：在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶， 用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量。

片段凝胶回收之试剂盒回收(离心法)：在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量，该重量作为一个凝胶体积。

氯化锂抽提质粒法：前四部同苯酚/氯仿溶液抽提法（用Solution I II III处理），加等体积的异丙醇，混匀，沉淀DNA，12000rpm离心7min.去上清，尽量去干净。