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A major impediment in the treatment of neurological diseases is the presence of the blood–brain barrier which precludes the entry of therapeutic molecules from blood to brain. Here we show that a shor ...

Reuven AgamiDivision of Tumor Biology - The Netherlands Cancer Institute - Amsterdam (TheNetherlands)r.agami@nki.nlWebpage: http://research.nki.nl/agamilab/Philippe BastinTrypanosome Cell Biology Unit ...

DEPC有致癌性，不能处理Tris溶液等这些事项大家都知道，所以不谈。谈一些实验室中的操作误区。误区一：重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。由于DEPC较贵，而且书上说DEPC要用高压灭菌处理去除，于是有些人就萌发了重复使用DEPC的想法，即对含有DEPC的水不进行高压灭菌，从而重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。节约本是好事，但这样的节约是无效的。为什么不能重复使用含DEPC的水，因 ...

刚涉及RNA抽提的新手都会听到别人说RNase很顽固，用高压灭菌都无法去除其活性。于是在配制tris缓冲液时就遇到了两难的境地。tris缓冲液不能用DEPC处理，只能用DEPC处理过的水配制，那么在药品称量、调pH值等过程中tris缓冲液会造到RNase的再次污染，所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是RNase并不顽固，高压灭菌可以去除其大量活性。下面的实验照片（照片来自ambion）很清楚的 ...

Argonaute - A family of proteins containing multiple domains and involved in RNA interference (RNAi). Argonatue is the main component of RNAi effector complex the so called siRNA induced silencing com ...

不少的文献都说，用LiCl 沉淀RNA有很多好处，比如只沉淀RNA，不会沉淀DNA、蛋白和多糖等。但就是操作比较麻烦，比如，过夜沉淀，不能沉淀小分子RNA等。下面就LiCl 沉淀方法的误区进行探讨。误区一：LiCl 不能沉淀小分子RNA。很多文献都说LiCl 沉淀的RNA不含小分子的5s rRNA和tRNA。但，事实是这样吗？至少在我的实验中发现LiCl 可以沉淀小分子RNA。下面的图片更能说明L ...

Note: This protocol has been optimized for Cos-1 cells. Successful transfection of each cell type requires optimization of the basic protocol. Variables to consider for optimization include but are no ...

The BAC clone from glycerol culture sublibrary is innoculated into 3 ml of LB with 20µg/ml chloramphenicol and cultured at 37°C with shaking for 16hrs. The liquid bacterial culture is transferred into ...

细胞内的核酸多以核蛋白的形式存在，其中脱氧核糖核蛋白主要存在于细胞核中，核糖核蛋白主要存在于细胞质中。这两类核蛋白在0.14mol／L氯化钠溶液中的溶解度相差很大。核糖核蛋白在此溶液中具有很高的溶解度、脱氧核糖核蛋白的溶解度却相当低。制成肝匀浆后，用0.14mol／L氯化钠溶液抽提，可将两种核蛋白分离。分离过程中加入少量柠檬酸钠，可抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的水解作用。 在含有核糖核 ...

I. NEBULIZATION of DNA 1. 0.5 - 5 ug DNA in TE (10mM/1mM) 25% glycerol final volume 500 ul 2. nebulize for 90-100 sec at 5-10 psi (for a medium size of about 1.5kbp) 3. Precipitate with Et ...

BackgroundThis is the method for indirect immunofluorescence labeling; that is the antibodies do not have the fluorescent dye attached. Indirect labeling is more involved than direct labeling. If you ...

Rat liver is an ideal source for functional intact mitochondria for a number of reasons. We use Sprague-Dawley albino male rats for our studies. Female rats can be used however for serious studies we ...

AbstractGene expression and regulation are mediated by DNA sequences in most instances directly upstream to the coding sequences by recruiting transcription factors regulators and a RNA polymerase in ...

) Culture 400 mls of bacteria harboring transposon overnight at 37oC. 2) Harvest cells at 7000xg for 5 min. (pellet can be frozen at -80oC for several weeks) 3) Resuspend pellet thoroughly in 14 mls: ...

　　在真菌学研究中，传统的菌物分类以形态特征和生理生化指标为分类基础，但大部分菌物的种类多、分布广、形态特征复杂，而且少数形态特征和生理生化指标随着环境的变化而不稳定，因此，传统的菌物分类常引起分类系统的不稳定或意见分歧。近年来随着分子生物学的发展，同时也是真菌学自身发展的客观需求，分子生物学技术在真菌学研究中得到了广泛而深入地应用。一些分类地位不明确、亲缘关系不清楚的物种通过该技术得到了验证。一 ...

IntroductionNorthern blotting nuclease protection assays and RT-PCR are frequently used to analyze gene expression. While qualitative results from these assays are sometimes sufficient most researcher ...

做分子生物学实验，核酸纯化、酶切、克隆算是最基本的步骤了。因为要做定向克隆，通常要作双酶切。为了省时省事儿，我们常常想方设法把两个酶放在一起切。可是事情并非总那么称心如意――两个酶经常在一起闹别扭，不是反应温度不同啦，就是Buffer不同，有时候两个酶切位点连在一起，必须先切一个再切另一个，否则就切不动――因为有的酶除了识别位点之外还需要旁边留有几个碱基，如果正好被切掉了就出问题。于是有人 ...

一、什么是克隆技术 　　克隆，是Clone 的译音，意为无性繁殖。 英语"Clone"一词起源于希腊文"Klone"，原意是用"嫩枝"或"插条"繁殖。 现在"克隆"的含义已不仅仅是简单的"无性繁殖"，凡来自一个祖先，经过无性繁殖出的一群个体，也叫"克隆"。这种来自一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫"无性繁殖系"，简称无性系。在自然界，有不少植物具有先天的克隆本能，如番薯、马铃薯、玫瑰等插枝繁殖的植物 ...

Note: The pointers in this technical bulletin presuppose the use of standard 50% formamide hybridization solutions. However if ULTRAhyb™ Ambion's ultrasensitive hybridization buffer is used the differ ...

Northern assays require RNA (total- or poly(A)- selected) to be resolved on a agarose gel under denaturing conditions transferred to a membrane and immobilized for subsequent hybridization. Various in ...