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物种的遗传多样性在本质上是DNA 一级序列的多样性。近年来，随着DNA 测序技术的迅速发展和日益普及，DNA 测序在遗传多样性的研究中正在起着越来越大的作用。本章将介绍目前在遗传多样性研究中常用的一种手动和一种全自动双链DNA 测序方法。1 DNA 模板的制备在遗传多样性的研究中，由于样本量一般都较庞大，因而DNA 测序的速度就成了很关键的因素。因此，这类研究中常常直接测定纯化的PCR 双链产物而 ...

实验目的了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义；学习外源DNA转化入受体菌细胞并筛选转化子的方法。实验原理转化（transformation）是将异源DNA分子导入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段。其原理是细菌处于0℃， CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA ...

1. 实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 ...

将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，使该基因能在受体细胞内复制、转录、翻译和表达，整个操作称为基因重组技术。要实施该技术必须具备四大要素：工具酶、载体、基因和受体（宿主）细胞。

质粒DNA的提纯是基因工程实验中最常用的试验方法之一，质粒DNA提纯效率和质量与其后续实验步骤（如PCR扩增、酶切、连接、转化大肠杆菌和转染真核细胞等）的成功与否有着直接的关系，因此高效快速地从细菌细胞中提纯质粒DNA 具有重要的意义，本文主要介绍了由QIAGEN plasmid Midi试剂盒方法提取质粒的方法。

掌握DNA重组技术的基本原理和基本方法和熟悉质粒DNA的小量制备及酶切鉴定方法

UV shadowing is a technique for visualizing nucleic acids separated on acrylamide/urea gels. The technique utilizes shortwave UV light (254 nm) and a fluor-coated TLC plate. We recommend UV shadowing ...

Restriction enzyme digestions are performed by incubating double-stranded DNA molecules with an appropriate amount of restriction enzyme in its respective buffer as recommended by the supplier and at ...

Restriction enzymes are expensive ($40 to $200 a vial): keep the enzymes at -20℃. Plan your digests to be small and convenient. The digest is composed of DNA sample (volume should not be more than abo ...

This is a question asked quite a bit most recently (late September 1995) in the newsgroup. Here are two methods and who submitted them. ...

本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创，我在其基础上进行了一些改动，主要是DNA回收上采取了更简单的方法。（本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆 的情况。对于分步酶切制作片断，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）

(一) 鼠肝DNA的制备

I usually use Linear polyacrylamide as a carrier for DNA precipitation by EtOH. I have read about using glycogen as a carrier I would like to know if anyone knows a method avoiding not to use acrylami ...

真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程，因此mRNA的3'末端都带有一段Poly A，这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。但是由于cDNA的5'端的序列各不相同，如何获得全长的cDNA，如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA（即RACE），曾经是一个令人困扰的问题。

I have read some books but cannot find the answer.I think NaAc may increase the ionic strength to stabilize DNA duplexes.Is it right?

Core protocol for both mouse and chick embryos Cepko/Tabin lab Embryo preparationFix embryos in fresh 4% paraformaldehyde (or a thawed frozen aliquot) in PBS at 4° C overnight. Dissect embryos (as nee ...

IntroductionNorthern blotting nuclease protection assays and RT-PCR are frequently used to analyze gene expression. While qualitative results from these assays are sometimes sufficient most researcher ...

目的：了解ATP生物合成的意义；掌握无机磷的测定方法；掌握DEAE-纤维素薄板层析法测ATP的形成。原理：在适当条件下，酿酒酵母分解发酵液中的葡萄糖，释出能量，同时还利用无机磷，使AMP转变成ATP，一部分能量即贮存于ATP分子中。因此，在发酵过程中，可测得发酵液中的无机磷含量降低和ATP含量的上升。

RNA Marker ( RL1000; RL6000; RL10000) 可以进行一般琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。以RL10000为例，具体使用方法如下：普通琼脂糖凝胶电泳时1.按下列组份配置RNA Marker样品。2.均匀混合后65℃加热10分钟，迅速冷却至室温（最好用PCR仪)。3.使用高质量的琼脂糖，用1×TAE Buffer制备3%凝胶，制胶时凝胶中请加入溴乙锭(最终浓度：1 ...

Northern BlotPreparation of Formaldehyde Agarose Gel The gel conditions (1% agarose 1X MOPS 6.3% formaldehyde) are designed for ~4 hours of electrophoresis. If longer times are necessary the formaldeh ...