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一、前言 多细胞生物能够维持机体的动态平衡（Homeostasis），器官的功能单位--上皮细胞和周围间质细胞间的相互作用对于维持动态平衡起了重要作用。在一些生理过程中，尤其在发育，细胞的增殖分化、肿瘤的浸润转移和创伤治愈过程中组织基因的表达调节，都是由细胞周围的组织微环境进行调节的。进行再生医疗时，分化的胚胎干细胞（ES细胞）、诱导性多功能干细胞（iPS细胞）和骨髓间充质干细胞等形成器官，再移 ...

质谱多反应监测(multiple reaction monitoring MRM)技术作为一种质谱检测的分析方法，具有特异性强、灵敏度高、准确度高、重现性好、线性动态范围宽、自动化高通量的突出优点，这些特质能够满足今天很多研究领域的迫切需要。通过MRM技术进行实时的定量监测可以进行药代动力学研究、临床诊断、违禁药物检查、食品化妆品等工业质量控制、环境检测、农业植物学研究以及代谢组学和蛋白质组学B ...

磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至关重要。在实验中使用的每种试剂都必须小心校准，保证质量，因为甚至偏离最优条件十分之一个pH都会导致磷酸钙转染的失败。

1. 实验所需试剂 1.1 RAT IFN-GMA CBA FLEX SET （558305） 规格：100TST 组成：Rat IFN-γ 标准品（4ml稀释TOP浓度10000pg/ml），Rat IFN-γ PE 检测二抗试剂，Rat IFN-γ捕捉微球（定位：A6） 1.2 RAT IL-10 CBA FLEX SET （558306） 规格：100T ...

转染 ，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。

一、对于感受态细菌效率的测定或连接产物的转化(其它如基因突变产物的转化等参考连接产物进行)： 1. 在冰上缓慢融解感受态细菌(对于新鲜制备的感受态就可以直接使用了)，如果检测感受态细菌的效率，加入100pg-10ng质粒，但质粒的体积不宜超过感受态细菌量的10%。如果转化连接产物，每100微升感受态细菌加入10微升连接产物。 2. 轻轻用手指弹动离心管，以混匀细菌和质粒或连接产物。冰浴或冰水浴放 ...

当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候，如何选择适合我们实验需要的抗体，并恰当保存使用，是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多，品牌众 多，技术参数不一，价格和质量更是相差甚大，如何购买到高质量价格合适的抗体，并准确地做出我们想要的结果，其中有很多细节需要注意。

生物标志物与早期临床药物研发抗-TWEAK复合物研发举例TWEAK（肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子）是一种多功能细胞因子，可控制包括细胞增殖、迁移、分化、凋亡、血管生成，以及炎症在内的多种细胞活动。TWEAK通过与Fn14结合发挥作用，Fn14 是一种具有高度诱导性的细胞表面受体，与包括细胞核因子- kB（NF-kB）途径在内的多种细胞内信号途径具有相关性。

由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队从2006年开始进行植物源替代血浆来源的医药蛋白的研究与开发，现已取得突破性进展并已跨入规模化生产的阶段，填补了国际上此项技术空白。相关论文“Large-scale production of functional human serum albumin from transgenic rice seeds ...

稀释计数法 滴度单位：TU/ml，指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。”TU”为”transducing units”的缩写，中文为“转导单位”，表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。 第一天 细胞准备 将生长状态良好的293T细胞消化计数后稀释至1×105/ml，加入96孔板，100?l/孔，为每个 ...

方法一 超速离心沉淀法 F取6个Ultra-clear SW28离心管，用70%乙醇消毒后，放在超净工作台中打开紫外灯继续消毒30分钟。 F每个Ultra-clear SW28离心管中加入约32ml的预先处理的病毒上清液。 F取一支10ml的移液管，吸取12 ml 20%的蔗糖溶液。将移液管一直插入到离心管的底部，缓慢将蔗糖溶液打出4 ml。同样地，将剩下8 ...

一、293T细胞的冻存1. 随着传代的次数增加，293T细胞会出现生长状态下降，出现突变等。所以要在细胞购进时就进行大量冻存，以保证实验的稳定性和持续性。2. 在细胞对数生长期进行冻存，增加细胞复苏成活率。& ...

1、慢病毒载体概况 慢病毒是逆转录病毒科亚科之一，分为两类：灵长类和非灵长类慢病毒。灵长类慢病毒包括HIV-1、HIV-2、猴免疫缺陷病毒( SIV)，非灵长类慢病毒包括猫免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒(BIV)、马免疫缺陷病毒(EIAV)等。 多项研究表明慢病毒载体具有可感染非分裂期细胞、可长期表达、而且宿主细胞免疫反应小、细胞毒性小等优点。因其自身结构特点，可包装8～lOkb，适用于 ...

以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。1、取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血清培养基。轻柔混匀，室温孵育5min。 ...

慢病毒使用操作手册 1、慢病毒使用操作手册 1.1慢病毒的储存与稀释: 1.1.1病毒的储存：收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验，可以将病毒暂时放置于4 ℃保存；如需长期保存请放置于-80℃（病毒置于冻存管，并使用封口膜封口） A．病毒可以存放于-80℃ 6个月以上；但如果病毒储存时间超过6个月，建议在使用前需要重新滴定病毒滴度 B．反复冻融会降低病毒滴度：每次冻融会降低 ...

在人体肠道中生活着数以万亿的共生菌群，它们的种类繁多，可达上千种，数量也很惊人，是人体细胞总量的10倍以上，迄今为止，仍有80%以上的微生物不为人知。这些肠道微生物和人体存在着互利共生的关系，对于维持人类的健康发挥着重要的作用。它们在肠道中保持着一种动态的平衡，能够合成维生素、帮助人体从食物中吸收营养、维持肠道免疫系统功能、抵挡有害微生物的侵害，但是当这种平衡因某些因素被打破致使肠道菌群发生紊乱 ...

在陆地生态系统中，在土壤中生活有数量庞大的微生物种群，包括原核微生物如细菌、蓝细菌、放线菌及超显微结构微生物 以及真核生物如真菌、藻类( 蓝藻除外) 、地衣等。它们与植物和动物有着明确的分工，主要扮演“分解者”的角色，几乎参与土壤中一切生物和生物化学反应，担负着地球C、N、P、S 等物质循环的“调节器”、土壤养分植物有效性的“转化器&r ...

稻穗籽粒灌浆过程不是同步的，一个圆锥花序中颖花开花迟早与灌浆速率和粒充实率密切相关。先开的颖花（强势颖花）灌浆速率和粒充实率高；后开的颖花(弱势颖花)灌浆速率低，甚至不结颖果，因此弱势颖花低的灌浆速率严重影响和限制了“超级”水稻产量。水稻灌浆过程实际上是一个淀粉积累的过程，受脱落酸(ABA)和乙烯等激素的影响，然而强弱势颖花之间灌浆差异的出现是否与淀粉和激素合成相关基因的 ...

在生命科学的不同研究中，需要观察的基因并不完全相同，因此许多研究者往往需要针对自己感兴趣的一些基因进行表达分析。定制芯片服务的目的，就在于满足不同研究者的需要。另外，有些物种尚没有商品化的基因芯片可以提供，也需要通过定制芯片来制备。 上海伯豪生物技术有限公司/生物芯片上海国家工程研究中心（SBC）是Agilent公司在国内唯一认证的服务提供商，并被授予"Agilent公司亚太区最佳服务 ...

摘要 生物样本往往是非单一细胞的混合物，如原代分离的细胞样本和许多培养的细胞样本都是由不同种类或不同功能的细胞组成。而对于样本中不同细胞亚群的区分和定量恰恰是很多研究中的关键一环。这些混合在一起的不同细胞通常是使用流式细胞仪和荧光标记的细胞类型特异性抗体来进行区分的。值得注意的是，许多细胞的类型和生理状态的鉴定不仅仅可以通过蛋白表达的变化来鉴别，也可以根据细胞大小的变化来区分。 对疾病模型小鼠的 ...